精編實用免疫學實驗 pdf epub mobi txt 電子書 下載 2025

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薛雅蓉，劉常宏 著

圖書標籤:

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齣版社： 科學齣版社

ISBN：9787030381583

版次：1

商品編碼：11304569

包裝：平裝

開本：16開

齣版時間：2013-07-01

用紙：膠版紙

頁數：127

字數：202000

正文語種：中文

內容簡介

　　《精編實用免疫學實驗》通過精選，收集編著瞭涉及機體免疫功能檢測、抗體製備及利用免疫學原理方法進行的抗原抗體檢測等先進、實用內容的實驗，概括為八大部分：抗體製備、純化及標記；利用抗原抗體反應進行的檢測；機體免疫細胞的分離與鑒定；機體特異性細胞免疫功能的檢測；機體體液免疫功能的檢測；機體非特異性免疫功能檢測；HLA分型；淋巴細胞活化信號轉導分子檢測。

內頁插圖

目錄

第一篇 抗體的製備、純化及標記
一、免疫血清的製備及效價檢測
實驗1 弗氏佐劑的製備及與抗原的混閤
實驗2 抗原免疫兔子
實驗3 免疫血清的分離與保存
實驗4 雙嚮瓊脂擴散試驗檢測兔抗羊IgG血清效價
實驗5 凝集實驗檢測兔抗大腸杆菌抗血清效價
二、單剋隆抗體的製備
實驗6 單剋隆抗體的製備
三、抗體的純化
實驗7 鹽析法純化免疫球蛋白
實驗8 親和柱層析法純化免疫球蛋白
實驗9 SDS-PAGE法檢測免疫球蛋白純度
四、抗體的標記
實驗10 異硫氰酸熒光素標記IgG抗體
實驗11 R-藻紅蛋白標記IgG抗體
實驗12 辣根過氧化物酶標記IgG抗體
實驗13 生物素標記IgG抗體

第二篇 利用標記抗體進行的檢測
一、免疫熒光法
實驗14 直接免疫熒光法標記人T細胞
實驗15 間接免疫熒光法檢測大腸杆菌
實驗16 免疫熒光法顯示細胞的微管
二、酶免疫測定
實驗17 間接ELISA檢測兔抗羊IgG抗體效價
實驗18 夾心ELISA法檢測小鼠血清IL.2
實驗19 酶聯免疫斑點試驗檢測IFN-y分泌細胞數目
實驗20 ELISPOT法檢測小鼠脾髒抗羊IgG抗體形成細胞數目
實驗21 應用免疫組化ABC法檢測小鼠脾髒Thy1.2陽性細胞的分布
實驗22 免疫印跡試驗

第三篇 免疫細胞的分離與鑒定
一、免疫細胞分離
實驗23 密度梯度離心法分離外周血單個核細胞
實驗24 Percoll不連續密度梯度離心法分離NK細胞
實驗25 小鼠脾髒淋巴細胞分離及活率測定
實驗26 腫瘤浸潤淋巴細胞的製備
實驗27 黏附法分離單核細胞和淋巴細胞
實驗28 尼龍毛柱法分離T細胞與B細胞
實驗29 E.花環形成法從單個核細胞中分離T細胞
實驗30 免疫磁珠分選法分離小鼠脾髒CD4+T淋巴細胞
實驗31 流式細胞儀檢測小鼠IFN-'y分泌細胞
實驗32 小鼠髓源性DC的分離及誘導培養
二、免疫細胞鑒定

第四篇 機體免疫功能檢測
一、細胞吞噬相關功能檢測
實驗33 體外試管法檢測小鼠腹腔巨噬細胞吞噬雞紅細胞實驗
實驗34 中性紅法檢測小鼠腹腔巨噬細胞吞噬功能
實驗35 利用流式細胞儀檢測巨噬細胞吞噬活性
實驗36 巨噬細胞一氧化氮産生量的測定
實驗37 中性粒細胞呼吸爆發的檢測
二、細胞增殖及活力檢測
實驗38 MTT比色法檢測淋巴細胞活力
實驗39 ATP生物熒光檢測法檢測抗癌藥物對腫瘤細胞活力的影響
三、細胞介導的細胞毒試驗
實驗40 51Cr釋放試驗
實驗41 乳酸脫氫酶釋放試驗
實驗42 塗片染色法檢測凋亡細胞
實驗43 AnnexinV-FITC/PI雙染色法檢測凋亡細胞
實驗44 凋亡細胞DNA電泳
實驗45 TUNEL技術檢測凋亡細胞
四、APC抗原提呈功能分析
實驗46 樹突狀細胞抗原提呈能力檢測
五、免疫球蛋白的定量
實驗47 單嚮免疫擴散法檢測小鼠血清IgG、IgM、IgA
實驗48 夾心ELISA法檢測小鼠腸液中分泌型IgA水平
六、補體的細胞毒作用檢測
實驗49 補體的細胞毒作用檢測
參考文獻

附錄一 常用溶液配製方法
附錄二 荷瘤小鼠模型建立方法
一、腹水瘤小鼠模型建立方法
二、小鼠移植性實體瘤模型的建立
附錄三 南京大學生命科學學院本科生免疫學實驗教學內容及安排

精彩書摘

　　三、抗體的純化
　　在許多情況下我們需要用純化抗體進行研究及檢測。
　　抗體有多種來源。單剋隆抗體可從雜交瘤細胞培養上清液中純化；多剋隆抗體可從血清中純化；基因重組抗體因錶達係統不同可存在於錶達受體細胞培養液或細胞內，且胞內錶達往往以聚集、無活性的包含體的形式存在。胞外可溶性錶達抗體可直接純化，胞內包含體形式的抗體純化後還需要通過復性使其轉變為活性形式。
　　基於抗體的來源及純度要求不同，抗體純化方法也不同。一般應綜閤考慮産量和純度，盡可能用較少的純化步驟獲得較高純度的目標蛋白。沉澱法是一種快速但純度不高的純化方法，一般用高濃度鹽溶液使抗體沉澱而與溶液中的脂類、碳水化閤物、核酸、低分子質量蛋白質等物質分開。這種用鹽沉澱蛋白的方法也稱為鹽析法，常常用在蛋白純化的起始階段。除瞭鹽，也用一些多聚物（如PEG）及有機溶液沉澱蛋白質。
　　抗體純化的傳統方法在鹽析法之後常常還包括好幾個步驟，但現在普遍使用的親和層析法可使純化步驟大為減少，甚至隻需一步就可獲得高産量和高純度的目標抗體。該法利用抗體與固定在膠基質上的特定配體的特異、可逆結閤將抗體與溶液中其他物質分開，是獲得純淨抗體的理想方法，分離純度可達99%，産量可達10%-50%。親和配體若是與某種抗體同種型結閤的蛋白A和蛋白G，得到的純化抗體即為某種同種型抗體，如IgG、IgM或IgA；親和配體若為特定抗原，得到的抗體即為抗原特異性抗體。
　　在抗體純化過程中，目標抗體的監測非常重要。一個快速、簡單的蛋白濃度監測方法是在280nm波長處進行光度測量。要進行抗體的特異監測，可應用ELISA法、SDS-PAGE法或WesternBlot法。
　　實驗7鹽析法純化免疫球蛋白
　　利用一定濃度的鹽溶液使混閤蛋白溶液中某種蛋白質成分析齣而得到純化的蛋白質的純化方法通常稱為蛋白質的鹽析。是一種快速但所得蛋白純度不高的蛋白粗提方法。
　　硫酸銨、硫酸鈉、硫酸鎂、氯化鈉等鹽都能使蛋白質發生鹽析。硫酸銨因其在水中溶解度高且受溫度影響較小而最常應用。一般認為，在pH7.0時，50%的飽和硫酸銨可將所有的免疫球蛋白都沉澱齣來；33%飽和度時，大部分IgG可沉澱齣來；40%飽和度時，IgG沉澱物的得率最高，但含p球蛋白部分增多。
　　……

前言/序言

《精編實用免疫學實驗》一書，正如其名，專注於免疫學實驗的精細編排與實用性。這本書的宗旨在於為廣大免疫學研究者、學生以及相關從業人員提供一套係統、可靠、易於操作的實驗指南。 本書的內容涵蓋瞭免疫學研究中最核心、最基礎的實驗技術和方法。它並非一本理論性質的教材，而是以動手實踐為導嚮，旨在讓讀者能夠紮實掌握免疫學實驗的原理、步驟、操作要點以及結果的解讀。 具體而言，本書的章節設計緊密圍繞免疫學研究的關鍵環節展開，力求全麵而深入。 在引言部分，本書會詳細介紹免疫學實驗在現代生命科學研究中的重要地位和廣泛應用，闡述掌握實驗技能對於理解免疫係統運作機製、疾病診斷與治療的重要性。同時，也會對實驗室安全規範、常用儀器設備進行詳細說明，為讀者打下堅實的基礎。 隨後，本書將係統梳理免疫學實驗的基本技術。這包括： 細胞分離與培養技術： 詳細講解如何從外周血、淋巴組織等來源分離各種免疫細胞，如淋巴細胞、單核細胞、巨噬細胞、樹突狀細胞等。同時，會提供多種細胞培養基的配製方法，以及無菌操作、細胞傳代、細胞計數等關鍵技術。書中還會針對不同細胞類型的培養特點，提供優化培養條件的建議。 免疫細胞鑒定與功能分析技術： 重點介紹流式細胞術（Flow Cytometry）的應用，包括抗體標記、細胞分群、錶麵標誌物檢測（如CD標記物）等。此外，還會深入講解細胞因子檢測（ELISA, Luminex等）、細胞毒性測定、增殖測定（MTT, BrdU等）等，以全麵評估免疫細胞的功能狀態。 抗體相關實驗技術： 詳細闡述抗體製備的原理和常用方法，包括多剋隆抗體和單剋隆抗體的製備流程。在抗體應用方麵，會重點介紹Western Blot（用於檢測特定蛋白錶達）、免疫組化（IHC）和免疫熒光（IF）（用於觀察蛋白在組織或細胞中的定位）、ELISA（用於定量檢測抗原或抗體）等經典而重要的技術。書中會提供實驗優化的詳細指導，例如抗體稀釋度的選擇、封閉液的配製、顯色方法的選擇等，以獲得清晰、準確的結果。 分子生物學技術在免疫學中的應用： 闡述如何利用PCR、qPCR等技術檢測免疫相關基因的錶達水平。還會介紹Western Blot在檢測免疫信號通路中關鍵蛋白磷酸化狀態等方麵的應用。 動物模型與體內實驗技術： 針對需要動物實驗的研究，本書會詳細介紹動物模型的建立（如免疫缺陷模型、誘導自身免疫疾病模型等），以及動物給藥、取材、器官處理等規範操作。 生物信息學輔助免疫學研究： 簡要介紹如何利用公共數據庫（如NCBI, UniProt）獲取基因和蛋白信息，以及常用的生物信息學工具在免疫學數據分析中的輔助作用，為研究者提供更廣闊的研究視野。 本書的核心特色在於其“精編”和“實用”。 “精編”體現在： 體係化： 章節之間邏輯清晰，層層遞進，構成完整的實驗知識體係。 細節化： 每一個實驗步驟都力求描述詳盡、準確，包括試劑配製、儀器設置、操作技巧、注意事項等。 圖文並茂： 大量配有清晰的實驗流程圖、儀器操作圖、典型實驗結果圖，幫助讀者直觀理解。 “實用”則體現在： 操作指導性強： 嚴格按照實際操作流程編寫，讀者可照章操作，減少摸索時間。 結果分析詳盡： 每個實驗技術都附帶典型結果的解讀，幫助讀者理解實驗結果的意義，並掌握判斷實驗是否成功的標準。 常見問題與對策： 針對實驗中可能遇到的常見問題，本書會提供排查思路和解決對策，大大提高實驗成功率。 優化建議： 在許多實驗技術介紹中，會給齣優化實驗條件的建議，以適應不同研究需求。 本書的目標讀者廣泛，包括但不限於： 免疫學專業在校學生： 幫助他們建立紮實的實驗基礎，為後續的科研訓練打下堅實基礎。 生命科學相關專業的學生： 學習和掌握免疫學實驗技術，拓展研究視野。 免疫學領域的科研人員： 作為一本隨時查閱、解決實驗難題的參考工具書。 臨床檢驗技師、生物製藥研發人員： 掌握相關的實驗技能，提升工作效率和準確性。 總而言之，《精編實用免疫學實驗》是一本以實踐為核心，理論與操作相結閤的實驗手冊。它不僅能教會讀者“做什麼”，更能教會讀者“怎麼做”，並幫助讀者理解“為什麼這樣做”。通過本書的學習和實踐，讀者將能夠獨立、規範、高效地開展免疫學相關的實驗研究。

評分☆☆☆☆☆

這本書的封麵設計很有學術氛圍，紙張的質感也很好，捧在手裏很有分量。作為一名對生命科學充滿好奇的讀者，我一直以來都對免疫學這個領域抱有濃厚的興趣。我希望能夠通過閱讀一本書，係統地瞭解免疫係統的基本原理、組成部分以及它們是如何相互協作來保護我們的身體免受疾病的侵害。我曾經閱讀過一些相關的文章和科普讀物，但它們往往零散且不夠深入，難以形成一個完整的知識體係。而這本書的書名“精編實用”引起瞭我的注意，我猜想它可能在內容編排上非常精煉，並且在實用性方麵有所側重。我期待它能夠為我提供關於免疫係統工作機製的詳細講解，包括各種免疫細胞的功能、免疫應答的類型、疫苗的作用原理等等。同時，我也希望這本書能夠包含一些與日常生活相關的免疫學知識，例如如何通過生活方式來提高免疫力，以及如何應對常見的免疫相關疾病。

評分☆☆☆☆☆

這本書的紙質摸起來很舒服，封麵的設計簡約大氣，一看就很有專業感。我一直對生物領域很感興趣，尤其對生命如何抵禦外界的侵襲感到好奇。一直想找一本既能科普又能深入淺齣的書來係統地瞭解免疫係統的運作機製。我之前也翻閱過一些關於免疫學的書籍，但總覺得要麼過於學術化，讀起來很費勁，要麼就是太泛泛而談，缺乏實質性的內容。所以，當我在書店看到這本書時，簡直眼前一亮。書名“精編實用”幾個字就足夠吸引人瞭，我揣測它一定經過瞭精心挑選和編排，並且更側重於實際應用，這正是我所需要的。我期待它能為我打開一扇瞭解免疫世界的大門，讓我能夠更清晰地認識到我們身體內部的“守護者”是如何工作的，以及它們在維護我們健康方麵扮演著怎樣的關鍵角色。我希望這本書能用通俗易懂的語言，結閤生動的圖例，將復雜的免疫學概念一一剖析，讓我這個非專業人士也能輕鬆理解，並且在閱讀過程中，不時地能産生“原來是這樣！”的頓悟感。

評分☆☆☆☆☆

初拿到這本書，我就被它的裝幀深深吸引瞭。厚實有質感的封麵，搭配上沉靜而富有內涵的書名，散發齣一種嚴謹又不失溫度的氣息。作為一名對此領域稍有瞭解的愛好者，我總是在尋找能夠填補我知識盲區，同時又能激發我更深層次思考的讀物。現有的文獻和資料，雖然在某些特定方麵提供瞭深入的見解，但往往缺乏一個宏觀而又詳實的整體框架。我希望能有一本書，能夠係統地梳理免疫係統的演化曆程，從基礎的細胞識彆機製，到復雜的信號轉導通路，再到不同免疫細胞之間的協同作用，都能被清晰地勾勒齣來。更重要的是，我希望它能展現免疫係統在應對各種病原體入侵時的精妙策略，以及在自身免疫疾病、過敏反應等異常情況下的失調錶現。這本書的名字讓我覺得它可能正是這樣一本能夠滿足我多方麵需求的“百科全書”式的著作，能讓我站在更高的維度去審視和理解免疫學這門博大精深的科學。

評分☆☆☆☆☆

這本書的觸感和視覺衝擊力都很棒。我一直對醫學和生命科學領域有著濃厚的興趣，尤其是在疫情爆發之後，大傢對免疫係統的關注度空前提高。我希望能找到一本真正能夠幫助我理解我們身體是如何對抗病毒、細菌以及其他威脅的讀物。市麵上有很多關於免疫的科普讀物，但很多都過於簡略，或者在科學嚴謹性上有所欠缺。而我希望找到的，是一本能夠提供更詳盡、更深入的解釋，同時又不至於讓普通讀者望而卻步的書。這本書的“精編實用”這幾個字，讓我覺得它可能在內容上做到瞭詳略得當，既保證瞭學術的深度，又考慮到瞭實踐的意義。我期待它能夠帶領我深入探索免疫細胞的多樣性，瞭解它們的産生、分化和功能，以及它們如何協同作戰，形成一道強大的防綫。我希望它能讓我明白，為什麼有些人在麵對疾病時錶現齣不同的抵抗力，以及我們自身可以通過哪些方式來增強免疫力。

評分☆☆☆☆☆

翻開這本書，一股淡淡的油墨香撲鼻而來，讓人心曠神怡。我一直以來都對生命科學的奇妙之處著迷，特彆是我們身體內部的免疫係統，它就像一個精密運作的軍事指揮部，時刻保衛著我們的健康。隨著年齡的增長，我越來越意識到身體健康的重要性，也越來越渴望瞭解那些看不見的“戰士”是如何默默工作的。我之前也讀過一些免疫學的入門書籍，但總覺得它們要麼過於理論化，缺乏實踐指導，要麼就是過於淺顯，無法滿足我進一步探索的渴望。這本書的“精編實用”這幾個字，恰恰擊中瞭我的需求點。我希望它能像一位經驗豐富的老師，用最清晰、最有條理的方式，嚮我展示免疫學的核心概念，從抗原識彆到免疫記憶，從先天免疫到適應性免疫，都能夠被深入淺齣地講解。我期待它能夠為我提供一些實用的建議，讓我能夠更好地理解和維護自己的免疫係統，擁有更健康的生活。