蛋白質純化與分析技術 [Protein Purication and Analysis Technologies] pdf epub mobi txt 電子書 下載 2025

簡體網頁||繁體網頁

☆☆☆☆☆

汪少蕓 編

圖書標籤:

• 蛋白質純化
• 蛋白質分析
• 生物化學
• 分子生物學
• 生物技術
• 蛋白質組學
• 色譜技術
• 電泳技術
• 光譜分析
• 實驗技術

齣版社： 中國輕工業齣版社

ISBN：9787501974399

版次：1

商品編碼：11344367

包裝：平裝

外文名稱：Protein Purication and Analysis Technologies

開本：16開

齣版時間：2014-01-01

用紙：膠版紙

頁數：375

字數：571000

正文語種：中文

內容簡介

　　《蛋白質純化與分析技術》以蛋白質純化與分析技術為核心，對其基本原理及應用實例做瞭詳細的闡述。主要內容包括：蛋白質純化的依據與設計、蛋白質的提取技術、蛋白質的純化技術、特徵蛋白質的純化技術以及定量與分析檢測技術。其中，蛋白質的提取技術包括蛋白質提取的準備、蛋白質的總提取、不同來源蛋白質的具體提取策略；蛋白質的純化技術包括沉澱技術、透析和超濾、電泳技術和色譜技術；特徵蛋白質的純化技術包括抗體、鈣調蛋白、膜蛋白、生物活性酶（尿激酶、激肽釋放酶和植物溶菌酶）和重組蛋白包涵體的純化；蛋白質的定量、儲存與結晶包括提純過程中的定量、提純後的純度標準、純品蛋白質的儲存和蛋白質的結晶等內容；蛋白質的分析與檢測包括氨基酸序列分析、蛋白質免疫印跡、酶聯免疫分析、質譜技術和肽圖譜技術。

作者簡介

　　汪少蕓，博士、教授、博士生導師。
　　美國威斯康星大學麥迪遜分校（UW-Madison）和加州大學戴維斯分校（UC-Davis）博士後。從事生物活性蛋白質和功能食品的研究工作，已編寫著作3部，申請發明專利19項（已授權13項），發錶學術論文90篇（其中被SCI收錄38篇）。擔任中國食品學會青年工作委員會委員，福建省食品安全專傢，福建省食品學會學術委主任；Hans Journal of Food and Nutrition Science和Food Science and Human Wellness雜誌編委;多傢SCI學術期刊的審稿專傢.承擔國傢自然科學基金、國傢留學歸國人員基金、國傢海洋公益基金、省科技廳重點項目和省自然科學基金等課題。入選福建省高校新世紀優秀人纔、江蘇省高層次創新人纔和江海英纔，獲福州大學“教學名師”、“十佳科技工作者”和“新長徵突擊手”榮譽稱號。

內頁插圖

目錄

緒論
一、蛋白質及其性質
二、蛋白質純化的意義
三、蛋白質純化的依據
四、蛋白質純化的一般程序
五、蛋白質純化方案的設計與評價

第一篇 蛋白質的提取
第一章 蛋白質提取的準備
第一節 概述
第二節 蛋白質提取的影響因素
一、緩衝液
二、溫度
三、溶液極性和離子強度
四、金屬離子
五、還原劑
六、去垢劑
七、蛋白酶抑製劑
第二章 蛋白質提取技術
第一節 總提取策略
一、原料的選擇與處理
二、細胞的破碎
三、細胞器的分離
四、蛋白質提取時的保護性措施
五、蛋白質提取液的濃縮與保存
第二節 具體提取策略
一、動物組織中蛋白質的提取
二、植物組織中蛋白質的提取
三、細菌體重組蛋白的提取
四、真菌中蛋白質的提取
五、動物組織亞細胞中蛋白質的提取
六、植物組織亞細胞中蛋白質的提取
七、富含多酚化閤物的植物組織中酶的提取

第二篇 蛋白質純化技術
第三章 沉澱法
第一節 概述
第二節 沉澱法的類型
一、鹽析法
二、有機溶劑沉澱法
三、等電點沉澱法
四、親和沉澱法
五、其他沉澱法
第四章 透析和超濾
第一節 透析
一、基本原理
二、基本操作
三、應用
第二節 超濾
一、基本原理
二、超濾膜
三、基本操作
四、應用
第五章 電泳技術
第一節 概述
一、基本原理
二、電泳的分類
第二節 聚丙烯酰胺凝膠電泳
一、基本原理
二、基本操作
三、應用
第三節 SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳
一、基本原理
……
第三篇 蛋白質的定量與分析檢測
縮略語錶
參考文獻

前言/序言

生物醫學研究前沿：分子工具與實驗設計 深入探索細胞信號通路與疾病機製 本書聚焦於當前生命科學研究中最前沿、最具挑戰性的領域之一：細胞信號通路解析與疾病分子機製探究。我們摒棄瞭傳統教科書中對基礎生物學概念的冗餘闡述，而是直接切入如何利用尖端技術工具，解決復雜的生物學問題。全書旨在為研究生、博士後以及資深研究人員提供一套係統化、可操作的實驗設計與數據解讀指南。 第一部分：高級細胞成像與動態追蹤 本部分詳細介紹瞭活細胞成像技術在解析細胞動態過程中的應用，重點探討瞭分辨率的極限與突破。 1. 超分辨顯微成像（Super-Resolution Microscopy）的實際操作與數據解析： 我們將深入講解STED、PALM/STORM以及SIM等技術在解析蛋白質亞細胞定位和蛋白質-蛋白質相互作用界麵方麵的最新進展。書中包含瞭豐富的案例分析，例如，如何利用這些技術觀察綫粒體融閤/分裂事件中的關鍵蛋白如何動態重塑膜結構，以及這些重塑過程如何影響細胞凋亡的啓動。我們特彆強調瞭圖像重建算法的選擇對最終生物學結論的潛在影響，並提供瞭嚴格的數據質量控製標準。 2. 活細胞熒光探針設計與應用： 傳統熒光標記方法在實時監測細胞內離子濃度、pH值或特定酶活性時常存在背景乾擾和毒性問題。本章重點介紹瞭新型的基於FRET/BRET原理的分子探針，以及如何針對特定信號分子（如活性氧物種、Ca2+瞬變）設計高特異性、高靈敏度的報告係統。書中詳述瞭探針閤成、細胞轉染優化以及如何排除光漂白和光毒性對數據真實性的乾擾。 3. 活體動物模型的實時成像（In Vivo Imaging）： 針對腫瘤發生、免疫細胞浸潤等過程，本書介紹瞭基於小動物PET、SPECT和多光子顯微鏡技術的研究策略。重點討論瞭如何開發靶嚮性示蹤劑，實現對體內特定生物標誌物的定量檢測，並提供瞭一套規範化的體內實驗流程，以確保結果的可重復性。 第二部分：基因編輯與功能驗證的深度整閤 本部分著眼於如何利用精準的基因操作工具來驗證復雜的調控網絡，並剋服CRISPR/Cas9技術帶來的脫靶效應和功能缺失的局限性。 1. 新一代基因編輯工具的優化與篩選： 除瞭標準的Cas9係統，我們詳細介紹瞭Base Editing（堿基編輯）和Prime Editing（先導編輯）在修正點突變和精確插入報告基因方麵的應用。書中提供瞭一套詳細的篩選流程，用於快速鑒定具有最低脫靶風險的sgRNA組閤，並展示瞭如何利用這些技術在原代細胞係中實現高效的等位基因敲除。 2. 功能獲得與缺失研究的高級策略： 我們探討瞭如何結閤條件性敲除（Cre-LoxP係統的高級應用）與轉錄激活/抑製係統（CRISPRa/CRISPRi）來精確分離瞬時效應和長期適應性反應。書中通過一個關於內質網應激與脂肪肝形成關係的案例，演示瞭如何通過時間點和組織特異性地調控關鍵基因錶達，從而揭示因果關係，而非僅僅是相關性。 3. 蛋白質相互作用組的高分辨率解析： 傳統蛋白質互作技術（如雙雜交）的局限性很大。本章介紹瞭基於生物正交化學的APEX/TurboID技術在快速標記和捕獲蛋白質互作組中的應用。我們著重講解瞭如何設計閤適的連接子（Linker）長度，以及如何結閤質譜分析（LC-MS/MS）對捕獲到的新蛋白進行可靠鑒定，並區分“真實”的互作與非特異性背景。 第三部分：復雜生物係統的定量分析與計算生物學 生物學研究的未來在於數據的量化和模型的構建。本部分旨在彌閤濕實驗與乾實驗之間的鴻溝。 1. 單細胞多組學數據的高級分析： 隨著單細胞RNA測序（scRNA-seq）和單細胞ATAC測序（scATAC-seq）的普及，數據量和復雜性呈指數級增長。本書不教授基礎的聚類算法，而是側重於如何識彆稀有細胞群、如何整閤不同模態的數據（如CITE-seq分析）以及如何利用軌跡推斷（Trajectory Inference）來重建細胞命運決定過程。提供瞭詳細的R/Python腳本示例，用於處理批次效應和稀疏性問題。 2. 通量蛋白質組學與磷酸化位點研究： 在藥物篩選和信號傳導研究中，對全蛋白組或特定修飾組的定量至關重要。本章詳細介紹瞭TMT/iTRAQ標記策略的優化，特彆是針對低豐度信號通路蛋白的富集方案。我們著重討論瞭如何利用定量的肽段碎片信息，準確推斷關鍵激酶的活性狀態，並通過統計建模來區分具有生物學意義的修飾位點與隨機噪音。 3. 係統生物學模型的構建與驗證： 本部分探討如何將實驗數據轉化為可預測的數學模型。以一個典型的信號傳導網絡（如MAPK通路）為例，介紹瞭動力學建模（ODE）和基於主成分分析（PCA）的簡化模型構建方法。重點在於如何根據實驗數據（如時間點反應麯綫）校準模型參數，並利用模型來預測在不同環境刺激下細胞的穩態或振蕩行為，從而指導下一輪關鍵實驗的設計。 結語：跨學科思維與實驗倫理 全書最後強調瞭在進行復雜研究時，研究人員必須具備跨越生物學、化學、物理學和計算機科學的綜閤視野。我們還探討瞭在處理敏感生物數據和進行高通量篩選時，必須嚴格遵守的知識産權保護和數據共享倫理規範，確保科研成果的嚴謹性與社會責任感。

評分☆☆☆☆☆

我必須說，這本書的編寫風格極具個人特色，與其說是一本教材，不如說是一位經驗豐富的導師在循循善誘。我最欣賞的是作者在描述各種技術時，不厭其煩地講解每一個細節背後的原理和考量。例如，在介紹親和層析時，作者不僅僅是告訴你如何選擇配體，更詳細地分析瞭不同配體與目標蛋白質結閤的親和力、選擇性以及可能存在的非特異性結閤問題，並提供瞭如何優化結閤條件和洗脫策略的實用建議。他甚至會分享一些自己曾經遇到的“坑”，以及如何巧妙地規避這些問題，這對於我們這些在實驗室摸爬滾打的實踐者來說，簡直是無價之寶。書中對各種分析方法的比較也十分到位，比如在討論質譜分析時，作者係統地對比瞭 MALDI-TOF 和 ESI-MS 在蛋白質鑒定和定量方麵的優劣，以及它們各自適用的場景。這種深入的剖析，讓我能夠根據具體的實驗需求，做齣更明智的技術選擇。此外，書中對數據解讀的指導也非常細緻，對於如何從復雜的色譜圖或質譜圖中提取有效信息，如何評估實驗結果的可靠性，都有著獨到的見解。

評分☆☆☆☆☆

一本令人振奮的科學讀物，這本書以一種令人耳目一新的方式，將枯燥的實驗原理轉化為生動有趣的知識。我一直對生物化學領域充滿瞭好奇，尤其是在蛋白質研究方麵。這本書恰好滿足瞭我這種渴望，它不僅深入淺齣地介紹瞭蛋白質純化的基本概念，更是詳細闡述瞭各種先進的分析技術。比如，在提到離子交換色譜時，作者並沒有僅僅列齣公式和步驟，而是通過形象的比喻，將蛋白質的電荷特性與樹脂上的電荷相互作用描繪得淋灕盡緻，讓我一下子就理解瞭其中的精髓。同樣，在講解凝膠電泳時，作者也花瞭相當大的篇幅來解釋不同分子量蛋白質在凝膠中的遷移速率差異，並結閤實際案例，說明瞭如何通過電泳來評估蛋白質的純度和分子量。更讓我驚喜的是，書中還穿插瞭許多關於蛋白質結構分析的章節，比如X射綫晶體學和核磁共振譜（NMR）的應用，這讓我對蛋白質的三維結構有瞭更直觀的認識，也為我後續更深入的研究打下瞭堅實的基礎。總的來說，這本書在科普性和專業性之間找到瞭絕佳的平衡點，無論是初學者還是有一定基礎的研究者，都能從中獲益匪淺。

評分☆☆☆☆☆

我發現這本書最獨特的地方在於它所傳遞的那種“求真務實”的精神。作者並沒有迴避技術的局限性，反而會坦誠地討論各種方法的不足之處，並提供替代方案或改進建議。例如，在介紹液相色譜分離蛋白質時，作者會詳細分析反相色譜、尺寸排阻色譜、離子交換色譜和親和色譜各自的優缺點，並會根據目標蛋白質的理化性質，給齣最優選擇的指導。他甚至會提及一些新興的、更具前瞻性的技術，如多維度色譜聯用技術，並對其潛在的應用前景進行展望。更讓我驚喜的是，書中還涉及瞭蛋白質組學研究中的一些高級話題，比如如何進行大規模蛋白質鑒定和定量，如何分析蛋白質翻譯後修飾，以及如何結閤生物信息學工具來解讀復雜的蛋白質組數據。這種對前沿技術的關注，讓這本書充滿瞭活力和未來感。總而言之，這本書是一部集理論深度、實踐指導和前沿視野於一體的優秀著作，對於任何從事蛋白質研究的人來說，都是一份寶貴的財富。

評分☆☆☆☆☆

這本書不僅僅是理論的堆砌，更充滿瞭實踐的智慧。作者仿佛一位經驗豐富的“老司機”，在帶領我們穿越蛋白質純化和分析的復雜技術森林時，總是能及時地提醒我們注意路邊的“陷阱”，並指引我們找到最佳的路徑。我非常贊賞書中關於實驗設計和優化的章節，作者用大量的實例說明瞭如何根據目標蛋白質的特性，設計齣高效的純化方案，以及如何通過調整實驗條件來提高産率和純度。例如，他會分析不同緩衝液的pH值和離子強度對蛋白質穩定性和結閤親和力的影響，並提供具體的優化建議。在蛋白質互作分析方麵，書中也介紹瞭如酵母雙雜交（Y2H）、共免疫沉澱（Co-IP）以及錶麵等離子體共振（SPR）等多種技術，並對這些技術的原理、操作要點以及數據分析方法進行瞭清晰的闡述。我尤其對作者關於質量控製的強調印象深刻，他反復強調在整個實驗過程中，保持對樣品和試劑的嚴格管理，以及對結果的充分驗證的重要性，這對於確保研究的準確性和可重復性至關重要。

評分☆☆☆☆☆

坦白講，這本書的內容之詳實，在我閱讀過的同類書籍中是屈指可數的。作者在每一個章節都力求做到麵麵俱到，不放過任何一個可能引起讀者睏惑的細節。當我閱讀到關於蛋白質定量分析的部分時，我驚訝於作者對紫外吸收法、BCA法、Bradford法等不同方法的原理、適用範圍、優缺點以及實驗操作中的注意事項都進行瞭詳盡的論述。他還特彆強調瞭在選擇定量方法時，需要考慮的因素，例如蛋白質的氨基酸組成、是否存在乾擾物等。在蛋白質修飾分析方麵，書中也給齣瞭非常係統的介紹，從磷酸化、糖基化到泛素化等，都提供瞭相應的檢測和鑒定策略。我特彆喜歡他關於蛋白質印跡（Western Blotting）的章節，作者詳細介紹瞭抗體選擇、封閉液配製、顯色底物選擇等關鍵步驟，並提供瞭解決常見問題的故障排除指南，這對於任何一個需要進行蛋白質免疫學檢測的研究者來說，都是極其寶貴的參考。這本書的深度和廣度，無疑能滿足最嚴謹的科研需求。

評分☆☆☆☆☆

還沒看呢 ，不知道怎麼樣

評分☆☆☆☆☆

對於初學者很有用，如果是專業搞科研的建議還是讀外文的專著。

評分☆☆☆☆☆

這本書適閤稍微有些經驗的人讀。還是不錯的

評分☆☆☆☆☆

這本書適閤稍微有些經驗的人讀。還是不錯的

評分☆☆☆☆☆

好一般的書，不推薦購買，感覺哪裏都在講，哪裏也不詳細，泛泛的講瞭一大堆，而且這麼貴。

評分☆☆☆☆☆

還沒看呢 ，不知道怎麼樣

評分☆☆☆☆☆

東西不錯，喜歡，下次還會再購買，謝謝。

評分☆☆☆☆☆

適閤初學者，正版圖書

評分☆☆☆☆☆

東西不錯，喜歡，下次還會再購買，謝謝。