蛋白质纯化与分析技术 [Protein Purication and Analysis Technologies] pdf epub mobi txt 电子书 下载 2025

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汪少芸 编

图书标签:

• 蛋白质纯化
• 蛋白质分析
• 生物化学
• 分子生物学
• 生物技术
• 蛋白质组学
• 色谱技术
• 电泳技术
• 光谱分析
• 实验技术

出版社： 中国轻工业出版社

ISBN：9787501974399

版次：1

商品编码：11344367

包装：平装

外文名称：Protein Purication and Analysis Technologies

开本：16开

出版时间：2014-01-01

用纸：胶版纸

页数：375

字数：571000

正文语种：中文

内容简介

　　《蛋白质纯化与分析技术》以蛋白质纯化与分析技术为核心，对其基本原理及应用实例做了详细的阐述。主要内容包括：蛋白质纯化的依据与设计、蛋白质的提取技术、蛋白质的纯化技术、特征蛋白质的纯化技术以及定量与分析检测技术。其中，蛋白质的提取技术包括蛋白质提取的准备、蛋白质的总提取、不同来源蛋白质的具体提取策略；蛋白质的纯化技术包括沉淀技术、透析和超滤、电泳技术和色谱技术；特征蛋白质的纯化技术包括抗体、钙调蛋白、膜蛋白、生物活性酶（尿激酶、激肽释放酶和植物溶菌酶）和重组蛋白包涵体的纯化；蛋白质的定量、储存与结晶包括提纯过程中的定量、提纯后的纯度标准、纯品蛋白质的储存和蛋白质的结晶等内容；蛋白质的分析与检测包括氨基酸序列分析、蛋白质免疫印迹、酶联免疫分析、质谱技术和肽图谱技术。

作者简介

　　汪少芸，博士、教授、博士生导师。
　　美国威斯康星大学麦迪逊分校（UW-Madison）和加州大学戴维斯分校（UC-Davis）博士后。从事生物活性蛋白质和功能食品的研究工作，已编写著作3部，申请发明专利19项（已授权13项），发表学术论文90篇（其中被SCI收录38篇）。担任中国食品学会青年工作委员会委员，福建省食品安全专家，福建省食品学会学术委主任；Hans Journal of Food and Nutrition Science和Food Science and Human Wellness杂志编委;多家SCI学术期刊的审稿专家.承担国家自然科学基金、国家留学归国人员基金、国家海洋公益基金、省科技厅重点项目和省自然科学基金等课题。入选福建省高校新世纪优秀人才、江苏省高层次创新人才和江海英才，获福州大学“教学名师”、“十佳科技工作者”和“新长征突击手”荣誉称号。

内页插图

目录

绪论
一、蛋白质及其性质
二、蛋白质纯化的意义
三、蛋白质纯化的依据
四、蛋白质纯化的一般程序
五、蛋白质纯化方案的设计与评价

第一篇 蛋白质的提取
第一章 蛋白质提取的准备
第一节 概述
第二节 蛋白质提取的影响因素
一、缓冲液
二、温度
三、溶液极性和离子强度
四、金属离子
五、还原剂
六、去垢剂
七、蛋白酶抑制剂
第二章 蛋白质提取技术
第一节 总提取策略
一、原料的选择与处理
二、细胞的破碎
三、细胞器的分离
四、蛋白质提取时的保护性措施
五、蛋白质提取液的浓缩与保存
第二节 具体提取策略
一、动物组织中蛋白质的提取
二、植物组织中蛋白质的提取
三、细菌体重组蛋白的提取
四、真菌中蛋白质的提取
五、动物组织亚细胞中蛋白质的提取
六、植物组织亚细胞中蛋白质的提取
七、富含多酚化合物的植物组织中酶的提取

第二篇 蛋白质纯化技术
第三章 沉淀法
第一节 概述
第二节 沉淀法的类型
一、盐析法
二、有机溶剂沉淀法
三、等电点沉淀法
四、亲和沉淀法
五、其他沉淀法
第四章 透析和超滤
第一节 透析
一、基本原理
二、基本操作
三、应用
第二节 超滤
一、基本原理
二、超滤膜
三、基本操作
四、应用
第五章 电泳技术
第一节 概述
一、基本原理
二、电泳的分类
第二节 聚丙烯酰胺凝胶电泳
一、基本原理
二、基本操作
三、应用
第三节 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳
一、基本原理
……
第三篇 蛋白质的定量与分析检测
缩略语表
参考文献

前言/序言

生物医学研究前沿：分子工具与实验设计 深入探索细胞信号通路与疾病机制 本书聚焦于当前生命科学研究中最前沿、最具挑战性的领域之一：细胞信号通路解析与疾病分子机制探究。我们摒弃了传统教科书中对基础生物学概念的冗余阐述，而是直接切入如何利用尖端技术工具，解决复杂的生物学问题。全书旨在为研究生、博士后以及资深研究人员提供一套系统化、可操作的实验设计与数据解读指南。 第一部分：高级细胞成像与动态追踪 本部分详细介绍了活细胞成像技术在解析细胞动态过程中的应用，重点探讨了分辨率的极限与突破。 1. 超分辨显微成像（Super-Resolution Microscopy）的实际操作与数据解析： 我们将深入讲解STED、PALM/STORM以及SIM等技术在解析蛋白质亚细胞定位和蛋白质-蛋白质相互作用界面方面的最新进展。书中包含了丰富的案例分析，例如，如何利用这些技术观察线粒体融合/分裂事件中的关键蛋白如何动态重塑膜结构，以及这些重塑过程如何影响细胞凋亡的启动。我们特别强调了图像重建算法的选择对最终生物学结论的潜在影响，并提供了严格的数据质量控制标准。 2. 活细胞荧光探针设计与应用： 传统荧光标记方法在实时监测细胞内离子浓度、pH值或特定酶活性时常存在背景干扰和毒性问题。本章重点介绍了新型的基于FRET/BRET原理的分子探针，以及如何针对特定信号分子（如活性氧物种、Ca2+瞬变）设计高特异性、高灵敏度的报告系统。书中详述了探针合成、细胞转染优化以及如何排除光漂白和光毒性对数据真实性的干扰。 3. 活体动物模型的实时成像（In Vivo Imaging）： 针对肿瘤发生、免疫细胞浸润等过程，本书介绍了基于小动物PET、SPECT和多光子显微镜技术的研究策略。重点讨论了如何开发靶向性示踪剂，实现对体内特定生物标志物的定量检测，并提供了一套规范化的体内实验流程，以确保结果的可重复性。 第二部分：基因编辑与功能验证的深度整合 本部分着眼于如何利用精准的基因操作工具来验证复杂的调控网络，并克服CRISPR/Cas9技术带来的脱靶效应和功能缺失的局限性。 1. 新一代基因编辑工具的优化与筛选： 除了标准的Cas9系统，我们详细介绍了Base Editing（碱基编辑）和Prime Editing（先导编辑）在修正点突变和精确插入报告基因方面的应用。书中提供了一套详细的筛选流程，用于快速鉴定具有最低脱靶风险的sgRNA组合，并展示了如何利用这些技术在原代细胞系中实现高效的等位基因敲除。 2. 功能获得与缺失研究的高级策略： 我们探讨了如何结合条件性敲除（Cre-LoxP系统的高级应用）与转录激活/抑制系统（CRISPRa/CRISPRi）来精确分离瞬时效应和长期适应性反应。书中通过一个关于内质网应激与脂肪肝形成关系的案例，演示了如何通过时间点和组织特异性地调控关键基因表达，从而揭示因果关系，而非仅仅是相关性。 3. 蛋白质相互作用组的高分辨率解析： 传统蛋白质互作技术（如双杂交）的局限性很大。本章介绍了基于生物正交化学的APEX/TurboID技术在快速标记和捕获蛋白质互作组中的应用。我们着重讲解了如何设计合适的连接子（Linker）长度，以及如何结合质谱分析（LC-MS/MS）对捕获到的新蛋白进行可靠鉴定，并区分“真实”的互作与非特异性背景。 第三部分：复杂生物系统的定量分析与计算生物学 生物学研究的未来在于数据的量化和模型的构建。本部分旨在弥合湿实验与干实验之间的鸿沟。 1. 单细胞多组学数据的高级分析： 随着单细胞RNA测序（scRNA-seq）和单细胞ATAC测序（scATAC-seq）的普及，数据量和复杂性呈指数级增长。本书不教授基础的聚类算法，而是侧重于如何识别稀有细胞群、如何整合不同模态的数据（如CITE-seq分析）以及如何利用轨迹推断（Trajectory Inference）来重建细胞命运决定过程。提供了详细的R/Python脚本示例，用于处理批次效应和稀疏性问题。 2. 通量蛋白质组学与磷酸化位点研究： 在药物筛选和信号传导研究中，对全蛋白组或特定修饰组的定量至关重要。本章详细介绍了TMT/iTRAQ标记策略的优化，特别是针对低丰度信号通路蛋白的富集方案。我们着重讨论了如何利用定量的肽段碎片信息，准确推断关键激酶的活性状态，并通过统计建模来区分具有生物学意义的修饰位点与随机噪音。 3. 系统生物学模型的构建与验证： 本部分探讨如何将实验数据转化为可预测的数学模型。以一个典型的信号传导网络（如MAPK通路）为例，介绍了动力学建模（ODE）和基于主成分分析（PCA）的简化模型构建方法。重点在于如何根据实验数据（如时间点反应曲线）校准模型参数，并利用模型来预测在不同环境刺激下细胞的稳态或振荡行为，从而指导下一轮关键实验的设计。 结语：跨学科思维与实验伦理 全书最后强调了在进行复杂研究时，研究人员必须具备跨越生物学、化学、物理学和计算机科学的综合视野。我们还探讨了在处理敏感生物数据和进行高通量筛选时，必须严格遵守的知识产权保护和数据共享伦理规范，确保科研成果的严谨性与社会责任感。

评分☆☆☆☆☆

坦白讲，这本书的内容之详实，在我阅读过的同类书籍中是屈指可数的。作者在每一个章节都力求做到面面俱到，不放过任何一个可能引起读者困惑的细节。当我阅读到关于蛋白质定量分析的部分时，我惊讶于作者对紫外吸收法、BCA法、Bradford法等不同方法的原理、适用范围、优缺点以及实验操作中的注意事项都进行了详尽的论述。他还特别强调了在选择定量方法时，需要考虑的因素，例如蛋白质的氨基酸组成、是否存在干扰物等。在蛋白质修饰分析方面，书中也给出了非常系统的介绍，从磷酸化、糖基化到泛素化等，都提供了相应的检测和鉴定策略。我特别喜欢他关于蛋白质印迹（Western Blotting）的章节，作者详细介绍了抗体选择、封闭液配制、显色底物选择等关键步骤，并提供了解决常见问题的故障排除指南，这对于任何一个需要进行蛋白质免疫学检测的研究者来说，都是极其宝贵的参考。这本书的深度和广度，无疑能满足最严谨的科研需求。

评分☆☆☆☆☆

我必须说，这本书的编写风格极具个人特色，与其说是一本教材，不如说是一位经验丰富的导师在循循善诱。我最欣赏的是作者在描述各种技术时，不厌其烦地讲解每一个细节背后的原理和考量。例如，在介绍亲和层析时，作者不仅仅是告诉你如何选择配体，更详细地分析了不同配体与目标蛋白质结合的亲和力、选择性以及可能存在的非特异性结合问题，并提供了如何优化结合条件和洗脱策略的实用建议。他甚至会分享一些自己曾经遇到的“坑”，以及如何巧妙地规避这些问题，这对于我们这些在实验室摸爬滚打的实践者来说，简直是无价之宝。书中对各种分析方法的比较也十分到位，比如在讨论质谱分析时，作者系统地对比了 MALDI-TOF 和 ESI-MS 在蛋白质鉴定和定量方面的优劣，以及它们各自适用的场景。这种深入的剖析，让我能够根据具体的实验需求，做出更明智的技术选择。此外，书中对数据解读的指导也非常细致，对于如何从复杂的色谱图或质谱图中提取有效信息，如何评估实验结果的可靠性，都有着独到的见解。

评分☆☆☆☆☆

这本书不仅仅是理论的堆砌，更充满了实践的智慧。作者仿佛一位经验丰富的“老司机”，在带领我们穿越蛋白质纯化和分析的复杂技术森林时，总是能及时地提醒我们注意路边的“陷阱”，并指引我们找到最佳的路径。我非常赞赏书中关于实验设计和优化的章节，作者用大量的实例说明了如何根据目标蛋白质的特性，设计出高效的纯化方案，以及如何通过调整实验条件来提高产率和纯度。例如，他会分析不同缓冲液的pH值和离子强度对蛋白质稳定性和结合亲和力的影响，并提供具体的优化建议。在蛋白质互作分析方面，书中也介绍了如酵母双杂交（Y2H）、共免疫沉淀（Co-IP）以及表面等离子体共振（SPR）等多种技术，并对这些技术的原理、操作要点以及数据分析方法进行了清晰的阐述。我尤其对作者关于质量控制的强调印象深刻，他反复强调在整个实验过程中，保持对样品和试剂的严格管理，以及对结果的充分验证的重要性，这对于确保研究的准确性和可重复性至关重要。

评分☆☆☆☆☆

我发现这本书最独特的地方在于它所传递的那种“求真务实”的精神。作者并没有回避技术的局限性，反而会坦诚地讨论各种方法的不足之处，并提供替代方案或改进建议。例如，在介绍液相色谱分离蛋白质时，作者会详细分析反相色谱、尺寸排阻色谱、离子交换色谱和亲和色谱各自的优缺点，并会根据目标蛋白质的理化性质，给出最优选择的指导。他甚至会提及一些新兴的、更具前瞻性的技术，如多维度色谱联用技术，并对其潜在的应用前景进行展望。更让我惊喜的是，书中还涉及了蛋白质组学研究中的一些高级话题，比如如何进行大规模蛋白质鉴定和定量，如何分析蛋白质翻译后修饰，以及如何结合生物信息学工具来解读复杂的蛋白质组数据。这种对前沿技术的关注，让这本书充满了活力和未来感。总而言之，这本书是一部集理论深度、实践指导和前沿视野于一体的优秀著作，对于任何从事蛋白质研究的人来说，都是一份宝贵的财富。

评分☆☆☆☆☆

一本令人振奋的科学读物，这本书以一种令人耳目一新的方式，将枯燥的实验原理转化为生动有趣的知识。我一直对生物化学领域充满了好奇，尤其是在蛋白质研究方面。这本书恰好满足了我这种渴望，它不仅深入浅出地介绍了蛋白质纯化的基本概念，更是详细阐述了各种先进的分析技术。比如，在提到离子交换色谱时，作者并没有仅仅列出公式和步骤，而是通过形象的比喻，将蛋白质的电荷特性与树脂上的电荷相互作用描绘得淋漓尽致，让我一下子就理解了其中的精髓。同样，在讲解凝胶电泳时，作者也花了相当大的篇幅来解释不同分子量蛋白质在凝胶中的迁移速率差异，并结合实际案例，说明了如何通过电泳来评估蛋白质的纯度和分子量。更让我惊喜的是，书中还穿插了许多关于蛋白质结构分析的章节，比如X射线晶体学和核磁共振谱（NMR）的应用，这让我对蛋白质的三维结构有了更直观的认识，也为我后续更深入的研究打下了坚实的基础。总的来说，这本书在科普性和专业性之间找到了绝佳的平衡点，无论是初学者还是有一定基础的研究者，都能从中获益匪浅。

评分☆☆☆☆☆

很好。。。。。。。。。。。

评分☆☆☆☆☆

好一般的书，不推荐购买，感觉哪里都在讲，哪里也不详细，泛泛的讲了一大堆，而且这么贵。

评分☆☆☆☆☆

还没看呢 ，不知道怎么样

评分☆☆☆☆☆

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适合初学者，正版图书

评分☆☆☆☆☆

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评分☆☆☆☆☆

好，东西不错，喜欢，下次还是会购买，谢谢