基因克隆和DNA分析（第7版 影印版） [Gene Cloning & DNA Analysis An Introduction] pdf epub mobi txt 电子书 下载 2025

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[英] T.A.Brown 著

图书标签:

• 分子生物学
• 基因克隆
• DNA分析
• 生物技术
• 遗传学
• 生物化学
• 实验技术
• 生命科学
• 影印版
• 教材

出版社： 高等教育出版社

ISBN：9787040489132

版次：1

商品编码：12288395

包装：平装

外文名称：Gene Cloning & DNA Analysis An Introduction

开本：16开

出版时间：2018-01-01

用纸：胶版纸

页数：353

字数：600000

正文语种：英文

内容简介

　　《基因克隆和DNA分析（第7版 影印版）》的英文原版是一本在国外很有影响，且使用广泛的基因克隆和DNA分析的入门教材。全书深入浅出地阐述了分子生物学基本技术如基因克隆、基因表达、PCR、基因组学等的原理，同时又生动地介绍了基因克隆和DNA分析在基础研究、医学、农学、法医学等领域中的实际应用。
　　《基因克隆和DNA分析（第7版 影印版）》适合作为高等院校生物学、农林、医药类专业的教学参考书，也可供生命科学相关科研人员和中学生物教师参考。

内页插图

目录

Preface to the Seventh Edition
About the Companion Website
Part 1 The Basic Principles of Gene Cloning and DNA Analysis
1 Why Gene Cloning and DNA Analysis are Important
1．1 The early development of genetics
1．2 The advent of gene cloning and the polymerase chain reaction
1．3 What is gene cloning?
1．4 What is PCR?
1．5 Why gene cloning and PCR are so important
1．5．1 Obtaining a pure sample of a gene by cloning
1．5．2 PCR can also be used to purify a gene
1．6 How to find your way through this book
Further reading 12

2 Vectors for Gene Cloning： Plasmids and Bacteriophages
2．1 Plasmids
2．1．1 Size and copy number
2．1．2 Conjugation and compatibility
2．1．3 Plasmid classification
2．1．4 Plasmids in organisms other than bacteria
2．2 Bacteriophages
2．2．1 The phage infection cycle
2．2．2 Lysogenic phages
Gene organization in the □ DNA molecule
The linear and circular forms of □ DNA
M13-a filamentous phage
2．2．3 Viruses as cloning vectors for other organisms
Further reading

3 Purification of DNA from Living Cells
3．1 Preparation of total cell DNA
3．1．1 Growing and harvesting a bacterial culture
3．1．2 Preparation of a cell extract
3．1．3 Purification of DNA from a cell extract
Removing contaminants by organic extraction and enzyme digestion
Using ion-exchange chromatography to purify DNA from a cell extract
Using silica to purify DNA from a cell extract
3．1．4 Concentration of DNA samples
3．1．5 Measurement of DNA concentration
3．1．6 Other methods for the preparation of total cell DNA
3．2 Preparation of plasmid DNA
3．2．1 Separation on the basis of size
3．2．2 Separation on the basis of conformation
Alkaline denaturation
Ethidium bromide-caesium chloride density gradient centrifugation
3．2．3 Plasmid amplification
3．3 Preparation of bacteriophage DNA
3．3．1 Growth of cultures to obtain a high □ titre
3．3．2 Preparation of non-lysogenic □ phages
3．3．3 Collection of phages from an infected culture
3．3．4 Purification of DNA from □ phage particles
3．3．5 Purification of M13 DNA causes few problems
Further reading

4 Manipulation of Purified DNA
4．1 The range of DNA manipulative enzymes
4．1．1 Nucleases
4．1．2 Ligases
4．1．3 Polymerases
4．1．4 DNA-modifying enzymes
4．2 Enzymes for cutting DNA： Restriction endonucleases
4．2．1 The discovery and function of restriction endonucleases
4．2．2 Type II restriction endonucleases cut DNA at specific nucleotide sequences
4．2．3 Blunt ends and sticky ends
4．2．4 The frequency of recognition sequences in a DNA molecule
4．2．5 Performing a restriction digest in the laboratory
4．2．6 Analysing the result of restriction endonuclease cleavage
Separation of molecules by gel electrophoresis
Visualizing DNA molecules in an agarose gel
4．2．7 Estimation of the sizes of DNA molecules
4．2．8 Mapping the positions of different restriction sites in a DNA molecule
Part Ⅱ The Applications of Gene Cloning and DNA Analysis in Research
Part Ⅲ The Applications of Gene Cloning and DNA Analysis in Biotechnology
Glossary
Index

《分子生物学前沿技术：从基础到应用》 内容简介 本书旨在为学习分子生物学、生物技术以及相关交叉学科的读者提供一个全面且深入的知识框架，重点聚焦于当前最前沿和最具影响力的实验技术和理论进展。本书结构严谨，内容详实，涵盖了从分子克隆、基因组学到蛋白质工程等多个关键领域。 第一部分：分子生物学基础与核心技术 本部分首先奠定了坚实的理论基础，回顾了生命科学的核心概念，如中心法则的深化理解，以及基因表达调控的复杂网络。随后，我们将详述现代分子生物学实验的基石——核酸的分离、纯化与定量技术。 核酸的提取与纯化： 详细阐述了从不同来源（如哺乳动物组织、植物、微生物、FFPE样本）高效提取高质量DNA和RNA的方法。内容深入到酚氯仿萃取法的优化、基于硅胶柱的快速纯化流程，以及在处理微量样本时所需的特殊技术，如微量离心和样品浓缩策略。同时，对RNA的完整性评估（如使用RNA完整性数[RIN值]）和DNA的质粒/基因组分离策略进行了详尽的对比分析。 电泳技术与分离： 不仅仅停留在琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳的基础原理，更扩展至高分辨率的分离技术。包括用于DNA/RNA分离的变性电泳，以及用于蛋白质分析的SDS-PAGE及其后续的等电点聚焦（IEF）技术，为后续的鉴定步骤做准备。 分子杂交技术（Southern/Northern Blotting）： 深入探讨了这些经典技术在特定序列检测中的应用，包括探针的合成（放射性、荧光标记）、高灵敏度检测体系的建立，以及如何通过改变杂交条件来提高特异性。 第二部分：基因重组与序列分析的飞跃 本部分是全书的核心，聚焦于基因操作和序列解析的革命性进展。 重组DNA技术进阶： 详细剖析了现代克隆策略，超越了传统的限制性内切酶切割和连接。重点介绍了几种主流的高效克隆系统，包括： Gibson装配法（Gibson Assembly）： 阐述其多片段一次性连接的机制、优缺点及适用范围，是构建复杂载体的首选方法。 Gateway克隆系统： 深入解析了λ噬菌体整合酶介导的定向重组原理，及其在构建高通量载体库中的应用。 Golden Gate无缝克隆： 解释了基于Type IIS限制性内切酶的原理，如何在不引入多余序列的情况下实现多片段的线性组装，并应用于合成生物学。 聚合酶链式反应（PCR）的深度应用： 从基础的热循环理论，扩展到多种高级变体： 定量PCR (qPCR/RT-qPCR)： 详述了SYBR Green和TaqMan探针技术的定量原理，内参照的选择与校正，以及绝对定量与相对定量的计算模型。 高保真PCR技术： 介绍了利用校对机制提高扩增准确性的新型聚合酶及其在序列克隆中的重要性。 反转录技术（RT）： 区分了一步法和两步法RT-PCR的效率差异，并讨论了cDNA文库构建中的偏好性问题。 下一代测序（NGS）技术概览： 本章节提供对主流测序平台的概述，重点讲解其核心原理和数据产出特点： Illumina平台（SBS）： 详细描述了簇生成、可逆终止子测序的化学过程。 PacBio/Oxford Nanopore技术： 阐述了单分子实时测序（SMRT）和纳米孔测序如何解决传统短读长测序在重复序列和结构变异检测中的局限性。 第三部分：基因功能研究与表达调控 本部分将技术应用于生物学问题的解析，涵盖了对基因组、转录组和表观遗传学的深入研究。 基因编辑与定点突变技术： 深入探讨了CRISPR/Cas系统（包括Cas9、Cas12等）的作用机制，以及在原核生物、真核生物中实现基因敲除、敲入和碱基编辑的精确操作。讨论了脱靶效应的评估与最小化策略。 转录组学（Transcriptomics）： 全面介绍RNA测序（RNA-Seq）的数据分析流程，从数据质控、比对到差异表达基因（DEG）的识别和富集分析。同时，也覆盖了基于FISH和原位杂交（ISH）的组织定位技术。 表观遗传学研究工具： 重点介绍目前用于解析DNA甲基化和组蛋白修饰的技术： MeDIP-Seq与WGBS： 对比分析基于抗体富集和基于亚硫酸氢盐转化对全基因组甲基化图谱的绘制。 ChIP-Seq (染色质免疫沉淀测序)： 详细讲解抗体选择、文库构建的挑战，以及如何识别转录因子结合位点。 第四部分：蛋白质工程与系统生物学接口 本部分将视角从核酸转向蛋白质，并探讨如何将这些信息整合到更宏大的系统中。 蛋白质表达与纯化： 详述在大肠杆菌、酵母、昆虫细胞和哺乳动物细胞中进行重组蛋白表达的系统选择依据。内容涵盖了标签蛋白（如His-tag, GST-tag）的引入与去除，以及多种层析技术（亲和层析、离子交换层析、尺寸排阻层析）的串联应用，以达到高纯度要求。 蛋白质结构解析与相互作用： 介绍了结构生物学的关键技术，如X射线晶体学和冷冻电镜（Cryo-EM）的基本原理及其在解析复合物结构中的应用。同时，讲解了酵母双杂交（Y2H）和生物物理学方法（如表面等离子共振SPR）用于研究蛋白质-蛋白质相互作用的实验设计。 生物信息学整合： 强调现代分子生物学实验的最终产出是大数据，因此需要整合高效的生物信息学工具进行数据解读。本书提供关于公共数据库检索、序列比对算法（如BLAST）的高级用法，以及网络分析工具在系统生物学中的应用指导。 本书的特色在于其极强的实验可操作性和前沿性，所有技术描述均注重细节，适合科研人员、研究生以及致力于分子生物学实践的专业技术人员作为参考手册和教学用书。通过本书的学习，读者将能独立设计和执行复杂的高端分子生物学实验，并能批判性地分析和解释实验数据。

评分☆☆☆☆☆

这本书简直是打开了我对分子生物学领域新世界的大门！在开始阅读之前，我对基因克隆和DNA分析的概念一直有些模糊，总觉得它们是深奥难懂的专业术语。然而，《基因克隆和DNA分析（第7版 影印版）》以一种非常直观、循序渐进的方式，将这些复杂的概念一一拆解，并且用我能够理解的语言进行了阐述。书中对各种技术，例如PCR、凝胶电泳、DNA测序的原理和应用都进行了详尽的介绍。我尤其喜欢作者在讲解时，会穿插一些实际的应用案例，比如如何利用基因克隆技术来生产胰岛素，或者如何通过DNA分析来诊断遗传疾病。这些生动的例子让抽象的理论变得触手可及，也让我看到了这些技术在现实生活中的巨大价值。而且，影印版保留了原版书籍的排版和图示，虽然在某些细节上可能不如国内最新出版的书籍那样精美，但其严谨性和学术性却是毋庸置疑的。每当我遇到难懂的部分，都会回头翻看之前的章节，或者查找书中提供的参考文献，这种学习过程虽然需要付出一些努力，但收获是巨大的。这本书不仅仅是一本教材，更像是一位耐心的导师，引导我一步步探索基因的奥秘。

评分☆☆☆☆☆

我最近购买的这本《基因克隆和DNA分析（第7版 影印版）》给我留下了深刻的印象，它成功地将一个原本可能枯燥的技术性话题，转化为一场引人入胜的探索之旅。作者在内容的组织上非常巧妙，从最基础的DNA结构和功能讲起，逐步深入到基因克隆的各个环节，包括限制性内切酶的使用、载体的选择、转化、筛选等等。让我惊喜的是，书中对于每一步操作的原理都解释得非常透彻，并且配有高质量的插图，这些插图不仅清晰地展示了实验过程，还帮助我理解了分子层面的相互作用。让我觉得特别有价值的是，这本书并没有仅仅停留在理论层面，而是花了大量篇幅讨论了各种DNA分析技术的实际应用，从基础研究到疾病诊断，再到法医学，让我看到了基因克隆和DNA分析技术在不同领域的广泛影响。我尤其对书中关于基因组学和蛋白质组学的介绍感到兴奋，这让我对未来的生物技术发展充满了期待。虽然是影印版，但纸张质量和印刷清晰度都相当不错，阅读起来不会感到疲劳。这本书无疑是我在生物技术领域学习路上的一个重要里程碑。

评分☆☆☆☆☆

说实话，在拿到《基因克隆和DNA分析（第7版 影印版）》之前，我对这个领域并没有太多概念，只知道大概是什么，但具体操作和原理却是一窍不通。然而，这本书的出现完全改变了我的看法。它就像一个详尽的地图，为我指明了探索基因世界的方向。作者的叙述风格非常务实，直奔主题，但又不会让你感到不知所措。他通过清晰的逻辑线，一步步引导读者理解基因克隆的核心思想——如何分离、复制和操作特定的DNA片段。书中对各种实验技术的描述，都非常具体，甚至包含了操作过程中的一些关键细节和注意事项，这对于我这样想要亲手实践的读者来说，无疑是宝贵的财富。我特别欣赏作者在讲解过程中，会不断地回顾和强调前面学到的概念，确保我们能够融会贯通。而且，书中还包含了大量的参考文献，这为我进一步深入学习提供了丰富的资源。尽管是影印版，但内容本身的价值是无可替代的。它让我看到了基因克隆和DNA分析作为生物技术基石的强大力量。

评分☆☆☆☆☆

我对《基因克隆和DNA分析（第7版 影印版）》的阅读体验非常满意，它为我提供了一个系统且深入的理解基因克隆和DNA分析方法的途径。这本书的内容编排非常有条理，从DNA的基本知识讲起，然后逐步展开到各种复杂的分子生物学技术。我特别喜欢书中对各种技术原理的详细解释，例如DNA聚合酶链式反应（PCR）的每一个循环是如何进行的，以及限制性内切酶是如何精确地切割DNA的。作者在书中也深入探讨了基因组文库的构建、DNA杂交技术以及各种DNA测序方法的演进。这些内容对于我理解现代基因组学研究至关重要。除了技术性的讲解，书中还提供了许多关于这些技术在实际研究和应用中的案例，比如基因工程在农业和医药领域的突破，以及DNA指纹技术在法医学中的应用。这让我深刻认识到基因克隆和DNA分析技术的广阔前景和重要意义。影印版保留了原著的风格，对于追求学术严谨性的读者来说，是一个不错的选择。

评分☆☆☆☆☆

这本书，准确地说，《基因克隆和DNA分析（第7版 影印版）》，给我带来的最大感受就是“清晰”和“全面”。在阅读过程中，我感觉自己就像是在跟着一位经验丰富的向导，深入了解基因世界。作者并没有回避任何技术细节，相反，他将各种复杂的分子生物学技术，如限制性酶切、分子克隆、基因组DNA提取、RNA提取以及各种DNA分析方法，都进行了细致的剖析。我尤其欣赏书中对于不同克隆载体（如质粒、噬菌体、酵母人工染色体）的特性和选择的讲解，这让我能够更好地理解在不同实验需求下，如何选择最合适的工具。此外，书中还详细介绍了DNA序列分析的多种方法，包括DNA测序技术的原理和发展历程，这对于理解后基因组时代的研究至关重要。尽管是影印版，但其内容深度和广度都是我期望的。它不仅仅是一本教科书，更像是一本宝贵的参考资料，为我今后的学习和研究打下了坚实的基础。