PCR理論與技術(第三版) 王廷華,劉佳,夏慶傑,景強,習楊彥彬 科學齣版社 pdf epub mobi txt 電子書 下載 2025

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王廷華，劉佳，夏慶傑，景強，習楊彥彬 著

圖書標籤:

• PCR
• 分子生物學
• 生物技術
• 基因擴增
• 聚閤酶鏈式反應
• 王廷華
• 科學齣版社
• 實驗技術
• 生物醫學
• 核酸檢測

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齣版社： 科學齣版社

ISBN：9787030379344

版次：1

商品編碼：1740290230

包裝：平裝

齣版時間：2013-06-01

基本信息

書名：PCR理論與技術(第三版)

作者：王廷華,劉佳,夏慶傑,景強,習楊彥彬

齣版社：科學齣版社

齣版日期：2013-06-01

ISBN：9787030379344

字數：286000

頁碼：177

版次：1

裝幀：平裝

開本：16開

商品重量：0.4kg

編輯推薦

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內容提要

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《PCR理論與技術（第3版）》是《PCR理論與技術（第3版）》的一個分冊，分上、下篇，共13章。上篇主要介紹PCR基礎理論和技術操作知識，以及技術操作中可能遇到的各種問題的解決方法。下篇介紹PCR相關技術的應用，包括PCR技術在構建cDNA文庫、測序及基因突變檢測，性彆鑒定，動植物、微生物DNA分型研究中的應用；PCR技術分析DNA序列多態性、VNTR和STR；PCR技術檢測CDK4敲入轉基因鼠的基因型；PCR體係中模闆DNA濃度與PCR擴增效率的關係。
《PCR理論與技術（第3版）》可供生物醫學專業研究生、本科生及從事分子生物學研究的科研人員閱讀和實驗時參考。

目錄

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上篇 PCR的基本理論與技術
第一章 常規PCR技術的原理與方法
第一節 PCR技術的發展簡史
第二節 PCR技術的基本原理
第三節 PCR反應體係與反應條件
第四節 PCR反應體係和反應條件的優化
第五節 PCR反應的保真性
第六節 PCR常見問題及對策
第二章 PCR模闆製備
第一節 基因組DNA提取技術
第二節 RNA提取技術與cDNA模闆的製備
第三章 PCR擴增産物處理與PCR實驗室
第一節 PCR擴增産物分析與處理
第二節 PCR産物的純化
第三節 PCR汙染與對策
第四節 PCR技術實驗室
第四章 定量PCR技術
第一節 定量PCR的基本概念與基本原理
第二節 實時熒光定量PCR
第五章 原位PCR相關技術
第一節 原位PCR
第二節 原位PCR的分類
第三節 原位PCR技術流程
第六章 其他PCR相關技術進展
第一節 反嚮PCR技術
第二節 巢式PCR
第三節 多重PCR
第四節 串聯重復序列的PCR擴增
第五節 RAPD技術
下篇 PCR相關技術的應用
第七章 PCR技術在構建cDNA文庫、測序及基因突變檢測中的應用
第一節 PCR在cDNA文庫構建中的應用
第二節 PCR在DNA測序中的應用
第三節 PCR技術在基因突變檢測中的應用
第八章 PCR技術分析DNA序列多態性
第一節 DNA的兩種多態性和遺傳標記分類
第二節 PCR技術分析DNA序列多態性
第九章 PCR技術分析VNTR和STR
第一節 概述
第二節 擴增片段長度多態性分析分型技術基本原理
第三節 用PCR技術分析小衛星VNTR基因座分型的基本技術
第四節 用PCR技術分析微衛星(STR)基因座
第十章 PCR技術在性彆鑒定中的應用
第一節 概述
第二節 PCR擴增的基本方法
第三節 討論
第十一章 PCR技術在動植物、微生物DNA分型研究中的應用
第一節 概述
第二節 實驗方法與步驟
第三節 結果與討論
第十二章 PCR技術檢測CDK4敲入轉基因鼠的基因型
第一節 實驗原理
第二節 實驗方法
第三節 實驗結果
第四節 結果分析及注意事項
第十三章 PCR體係中模闆DNA濃度與PCR擴增效率的關係
第一節 實驗目的
第二節 實驗方法
第三節 實驗結果
第四節 結果分析

作者介紹

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文摘

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序言

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生物技術前沿進展與應用：方法、實踐與展望 本書聚焦於當代生命科學研究中的核心技術領域，深入探討瞭從基礎原理到前沿應用的一係列關鍵方法論。內容涵蓋瞭分子生物學、細胞生物學、基因組學、蛋白質組學以及生物信息學等多個交叉學科的前沿動態。本書旨在為生命科學領域的研究人員、研究生以及高新技術産業的專業人員提供一份全麵、深入且具有實踐指導意義的參考資料。 第一部分：分子生物學基礎與高級技術 第一章：核酸操作的精度革命：新一代測序技術（NGS）的深度解析 本章係統闡述瞭新一代測序技術（Next-Generation Sequencing, NGS）從原理、平颱演變到數據分析的全過程。重點介紹瞭Illumina測序平颱的高通量優勢及其堿基識彆機製。內容細緻剖析瞭不同類型的測序應用，包括全基因組測序（WGS）、全外顯子組測序（WES）、RNA測序（RNA-Seq）及其在轉錄組研究中的定量優勢。特彆探討瞭長讀長測序技術（如PacBio和Oxford Nanopore）的興起，及其在解決復雜基因組組裝和結構變異檢測中的獨特價值。此外，還深入分析瞭文庫構建、質量控製以及原始數據處理中的關鍵技術瓶頸和優化策略。 第二章：基因編輯技術的迭代與精確調控 本章深入研究瞭基因編輯技術的發展曆程，著重於CRISPR/Cas係統的最新突破。詳細解析瞭Cas9、Cas12等核酸酶的作用機製，以及通過引導RNA（gRNA）實現靶嚮切割的精確性。本書超越瞭基礎的基因敲除，著重介紹瞭堿基編輯器（Base Editors）和先導編輯器（Prime Editors）等第二代和第三代技術的原理，探討它們如何實現單堿基替換或小片段插入/缺失而無需引入雙鏈斷裂（DSB），極大地提高瞭編輯的安全性和精確性。內容還包括基因編輯的體內外遞送策略（如病毒載體和非病毒載體）的效率比較與優化。 第三章：蛋白質結構解析與功能探究的最新範式 本章聚焦於蛋白質組學和結構生物學的前沿技術。係統闡述瞭冷凍電子顯微鏡（Cryo-EM）在解析大分子復閤物高分辨率三維結構方麵的突破性進展，對比瞭其在結構生物學中的應用優勢與挑戰。在蛋白質相互作用組學方麵，詳細介紹瞭基於親和純化質譜（AP-MS）和酵母雙雜交（Y2H）的高通量篩選技術，並探討瞭原位（in situ）相互作用捕獲技術（如BioID和TurboID）在揭示細胞內動態網絡中的作用。此外，本章還涵蓋瞭化學蛋白質組學，特彆是探針設計和活性位點識彆的技術細節。 第二部分：細胞與組織水平的成像技術 第四章：活細胞成像的動態監測與高分辨率重建 本章全麵介紹瞭用於活細胞實時成像的技術體係。詳細闡述瞭熒光顯微鏡技術的經典（如共聚焦）到尖端（如STED、PALM/STORM等超分辨顯微技術）的發展脈絡。重點討論瞭熒光探針和報告基因係統的設計原則，以及如何利用光漂白和光激活技術實現對特定分子事件的時間追蹤。內容還包括活細胞成像中剋服光毒性、實現長時間活體記錄的策略，以及多色成像中光譜串擾的校正方法。 第五章：組織學與空間轉錄組學的融閤 本章深入探討瞭如何將分子信息與組織空間背景相結閤的研究範式。詳細介紹瞭空間轉錄組學（Spatial Transcriptomics）技術，包括原位測序（In Situ Sequencing, ISS）和基於捕獲點陣（LCM）的方法。本書不僅描述瞭這些技術如何重建組織內的基因錶達圖譜，還著重分析瞭相關數據如何用於定義細胞在復雜微環境中的異質性及相互關係。對於組織切片的製備、免疫熒光與組織學染色的聯閤分析，以及數據空間對齊（Spatial Alignment）的技術難點進行瞭詳盡論述。 第三部分：生物信息學與大數據整閤分析 第六章：高通量數據的統計建模與機器學習應用 本章是針對生物學大數據分析的核心方法論介紹。詳盡講解瞭從原始測序數據（FASTQ）到可解釋生物學結論的完整流程，包括質量控製、比對、定量和差異分析。在統計建模方麵，重點介紹瞭處理RNA-Seq數據的負二項分布模型（如DESeq2和edgeR）的適用性。更進一步，本章深入探討瞭深度學習（Deep Learning）在基因組學中的前沿應用，例如捲積神經網絡（CNN）在識彆增強子元件和預測非編碼區功能中的作用，以及循環神經網絡（RNN）在序列預測中的潛力。 第七章：生物網絡構建與係統生物學整閤 本章著眼於將離散的分子數據整閤成功能性係統模型。詳細闡述瞭基因調控網絡（GRN）和蛋白質-蛋白質相互作用網絡（PPI）的構建方法，包括基於信息論（如互信息）和基於統計推斷的方法。內容涵蓋瞭網絡拓撲分析（如中心性指標、模塊發現），並介紹瞭動態網絡建模（如微分方程模型）在模擬細胞狀態轉換中的應用。本書強調瞭整閤多組學數據（如基因組學、轉錄組學、代謝組學）以構建更具魯棒性的係統模型的方法論。 第四部分：應用前沿與産業轉化 第八章：細胞療法（CAR-T/NK）的設計、優化與規模化生産 本章聚焦於當前生物醫學領域最熱門的細胞治療技術。係統梳理瞭嵌閤抗原受體T細胞（CAR-T）和自然殺傷細胞（CAR-NK）的設計原理，包括不同代際CAR結構（如共刺激結構域的選擇）對激活和持久性的影響。內容深入討論瞭如何利用基因編輯技術優化T細胞或NK細胞，以增強其抗腫瘤活性並剋服腫瘤微環境的抑製。此外，本章還詳細探討瞭用於GMP級彆大規模生産的工藝流程優化、質量控製（QC）標準建立以及臨床前有效性評估的模型選擇。 第九章：微生物組與宿主相互作用的調控策略 本章關注腸道、皮膚等微生物群落與宿主健康之間的復雜關係。詳細介紹瞭宏基因組學（Metagenomics）和宏轉錄組學（Metatranscriptomics）在描繪微生物群落結構和功能活性方麵的技術差異。內容重點分析瞭微生物代謝産物（如短鏈脂肪酸）作為信號分子對宿主生理（如免疫、神經係統）的影響機製。在調控策略方麵，本書探討瞭益生菌、閤生菌的設計原則，以及糞菌移植（FMT）的標準化挑戰與未來發展方嚮。 第十章：生物傳感與即時診斷（POC）技術展望 本章探討瞭將生命科學發現轉化為快速、便攜式檢測係統的技術路徑。詳細介紹瞭基於微流控芯片（Microfluidics）的樣本處理技術，以及如何將分子識彆元件（如核酸探針、抗體、適配體）集成到電化學、光學或基於納米材料的傳感器平颱。內容涵蓋瞭從樣本采集到結果輸齣的集成化設計理念，並探討瞭利用數字PCR（dPCR）等高靈敏度技術實現早期疾病的床旁診斷（Point-of-Care Testing, POCT）的工程挑戰與解決方案。 --- 本書的特點： 理論與實踐並重： 每個技術章節都包含必要的理論基礎闡述和最新的實驗操作優化建議。 前沿性： 緊跟生命科學領域最新發錶的突破性技術，如Prime Editing、Cryo-EM解析、空間組學等。 跨學科整閤： 強調分子生物學、生物信息學與工程技術的交叉融閤，為解決復雜生物學問題提供多維度工具箱。 麵嚮未來： 探討瞭從基礎研究到臨床轉化和産業應用的關鍵技術瓶頸及未來十年可能的技術演進方嚮。

評分☆☆☆☆☆

作為一名生物技術專業的學生，PCR實驗是我們日常實驗中必不可少的一部分。這本書的內容，簡直就是我們期末考試復習的“定海神針”！它對PCR的各個方麵都做瞭非常詳盡的闡述，無論是反應體係的組分，還是各個組分的作用機製，都講解得非常到位。我特彆喜歡書中的圖解，把那些復雜的分子相互作用描繪得一目瞭然。還有就是關於“DNA聚閤酶”的介紹，書中詳細對比瞭不同種類的DNA聚閤酶的特性，比如熱穩定性、保真性、延伸速度等，並且結閤實際應用場景，給齣瞭選擇建議。這讓我對不同聚閤酶的優勢和劣勢有瞭清晰的認識，也讓我理解瞭為什麼在某些實驗中需要選擇特定的酶。這本書還對PCR的常見問題及解決策略進行瞭係統的梳理，比如引物二聚體、非特異性擴增、擴增效率低等，提供瞭非常實用的排除故障指南。這對於我們這些新手來說，簡直是“救命稻草”！讀完這本書，我對PCR的理解提升瞭一個檔次，自信心也大大增強。

評分☆☆☆☆☆

坦白說，在入手這本書之前，我對於PCR的認知是碎片化的，主要依靠零散的文獻和網絡資料。這次有幸讀到《PCR理論與技術(第三版)》，感覺像是為我構建瞭一個完整而堅實的知識體係。書中的邏輯非常清晰，從基礎的PCR反應機製，到各種改良型PCR技術，再到PCR在基因診斷、分子進化、法醫鑒定等領域的應用，層層遞進，環環相扣。我印象最深刻的是關於“定量PCR (qPCR)”的章節，它不僅僅介紹瞭SYBR Green法和TaqMan探針法的原理，還深入探討瞭各種影響定量準確性的因素，比如標準麯綫的繪製、內參基因的選擇、數據分析方法等。書中還提供瞭很多實用的操作技巧和注意事項，比如如何避免交叉汙染、如何正確使用儀器等，這些都是在理論教學中很難接觸到的寶貴經驗。讀這本書，我感覺自己仿佛置身於一個經驗豐富的導師的實驗室，在他的指導下，一點點地掌握PCR的“秘籍”。這本書對我最大的價值在於，它幫助我從“知其然”上升到“知其所以然”，讓我對PCR技術有瞭更深刻的理解和更高的操作水平。

評分☆☆☆☆☆

這本書簡直是我在學習PCR過程中遇到的“及時雨”！作為一名剛入門的博士生，之前對PCR的理解僅僅停留在教科書上的基本概念，遇到實際操作中的問題時，總是感覺力不從心。讀瞭這本書之後，我最大的感受就是“豁然開朗”。它不僅僅講解瞭PCR的原理，更深入地剖析瞭影響PCR效率的各種因素，比如模闆DNA的質量、dNTP的濃度、Mg2+的濃度、退火溫度等等，並給齣瞭詳細的優化建議。我尤其欣賞書中對“溫度梯度PCR”的介紹，以前隻知道有這個技術，但具體怎麼設置梯度、如何解讀結果，一直很模糊。這本書裏不僅有清晰的圖示，還有具體的案例分析，讓我一下子就明白瞭其中的奧妙，這對於我今後在摸索最佳退火溫度時，節省瞭大量的試錯時間和試劑。另外，書中對PCR産物的鑒定和分析方法，比如瓊脂糖凝膠電泳、Sanger測序、高通量測序等，也都有非常詳細的介紹，讓我對PCR的應用有瞭更全麵的認識。這本書讓我覺得，PCR不再是一個神秘莫測的“黑匣子”，而是可以通過科學的原理和精細的操作來掌握的強大工具。

評分☆☆☆☆☆

這本書的內容深度和廣度都讓我非常滿意。在理論方麵，它不僅覆蓋瞭PCR的基本原理，還深入探討瞭其背後的分子生物學機製，讓我對PCR反應的每一步都瞭然於心。在技術方麵，它詳細介紹瞭各種改良型PCR技術，比如長片段PCR、高保真PCR、巢式PCR等等，並且結閤實際應用，分析瞭這些技術的優缺點和適用範圍。我尤其欣賞書中關於“PCR優化”的章節，它係統地闡述瞭影響PCR效率的各個因素，比如模闆DNA的質量、dNTP的濃度、Mg2+的濃度、退火溫度、循環次數等，並且提供瞭詳細的優化步驟和實驗設計思路。這讓我意識到，PCR實驗並非一成不變，而是需要根據具體的實驗目的和樣本特點進行精細的優化。此外，書中還對PCR在基因剋隆、基因分型、突變檢測等領域的應用進行瞭詳盡的介紹，為我提供瞭很多啓發性的思路。總而言之，這本書是一本集理論、技術、應用為一體的優秀教材，無論你是初學者還是有一定經驗的研究者，都能從中獲益匪淺。

評分☆☆☆☆☆

拿到這本書時，我最先被它的裝幀吸引瞭，簡潔大方，科學齣版社的齣品果然有保證。迫不及待地翻開，首先映入眼簾的是那清晰的排版和流暢的文字，閱讀體驗就如同在咖啡館裏享受一杯溫熱的拿鐵，舒適而愜意。書中的插圖和錶格更是點睛之筆，將那些抽象的分子生物學概念具象化，讓我這個對PCR稍有瞭解但又希望深入挖掘的讀者，能夠更直觀地理解其原理。尤其是關於引物設計那一部分，作者的講解由淺入深，循序漸進，從最基礎的原則講到各種優化策略，還結閤瞭大量的實例分析，這對於我在實際科研操作中遇到的各種棘手問題，提供瞭非常實用的指導。我特彆喜歡其中關於特異性設計的部分，詳細闡述瞭如何避免非特異性擴增，以及在麵對復雜的基因組背景時，如何選擇閤適的引物組閤。這部分內容的處理，展現瞭作者深厚的學術功底和豐富的實踐經驗，讓我覺得這本書不僅僅是理論的堆砌，更是智慧的結晶。而且，書中對不同PCR技術變種的介紹，比如RT-PCR、qPCR、ddPCR等，也都有詳盡的描述，這讓我對PCR技術的多樣性和應用前景有瞭更全麵的認識，也為我今後選擇和優化實驗方案提供瞭寶貴的參考。