分子剋隆實驗指南-(上.中.下冊)-(原書第四版) pdf epub mobi txt 電子書 下載 2025

簡體網頁||繁體網頁

☆☆☆☆☆

MR格林 著

圖書標籤:

• 分子剋隆
• 分子生物學
• 實驗指南
• 生物技術
• 基因工程
• 剋隆技術
• 生物科學
• 原書第四版
• 上冊
• 中冊
• 下冊

店鋪： 北新網圖書專營店

齣版社： 科學

ISBN：9787030519979

商品編碼：12033936353

齣版時間：2017-03-01

基本信息

商品名稱： 分子剋隆實驗指南-(上.中.下冊)-(原書第四版)	齣版社： 科學齣版社	齣版時間：2017-03-01
作者：M.R.格林	譯者：賀福初	開本： 32開
定價： 598.00	頁數：	印次： 1
ISBN號：9787030519979	商品類型：圖書	版次： 1

內容提要

　　分子剋隆技術30多年來一直是全球生命科學領域實驗室專業技術的基礎。冷泉港實驗室齣版的《分子剋隆實驗指南》一書擁有的可靠性和*性，使本書成為業內*流行、*具影響力的實驗室操作指南。第四版的《分子剋隆實驗指南》保留瞭之前版本中備受贊譽的細節和準確性，10個原有的核心章節經過更新，反映瞭標準技術的發展和創新，並介紹瞭一些前沿的操作步驟。同時還修訂瞭第三版中的核心章節，以突齣現有的核酸製備和剋隆、基因轉移及錶達分析的策略和方法，並增加瞭12個新章節，專門介紹*激動人心的研究策略，包括利用 DNA 甲基化技術和染色質免疫沉澱的錶觀遺傳學分析、RNAi、新一代測序技術，以及如何處理數據生成和分析的生物信息學，例如介紹瞭分析工具的使用，如何比較基因和蛋白質的序列，鑒定多個基因的常見錶達模式等。本書還保留瞭必不可少的附錄：包括試劑和緩衝液、常用技術、檢測係統、一般安全原則和危險材料。任何使用分子生物學技術的基礎研究實驗室都將因擁有一冊《分子剋隆實驗指南》而受益。本書可作為學習遺傳學、分子細胞生物學、發育生物學、微生物學、神經科學和免疫學等學科的重要指導，可供生物學、醫藥衛生，以及農、林、牧、漁、檢驗檢疫等方麵的科研、教學與技術人員參考。

n

　　Originally published i English as Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Fourth Edition, by MichaelR.Gree and Joseph Sambrook ? 2012 Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NewYork, USA? 2017 Science Press. Print iChina.Authorized Simplified Chinese translatio of the English editio? 2012 Cold Spring Harbor LaboratoryPress. This translatio is published and sold by permissio of Cold Spring Harbor Laboratory Press, the owner of all rights to publish and sell the same.

n

分子生物學技術手冊：從基礎到前沿 內容簡介： 本書匯集瞭現代分子生物學領域中最核心、最前沿的實驗技術和研究策略，旨在為生命科學研究人員、高等院校師生及生物技術從業者提供一本全麵、深入且操作性強的技術指南。全書結構嚴謹，內容詳實，覆蓋瞭從基礎的核酸和蛋白質操作到復雜的基因組編輯和高通量測序等多個層麵。 第一部分：分子生物學基礎技術與核心操作 本部分奠定瞭分子生物學實驗的基石。首先，詳細闡述瞭各類生物材料的獲取與處理，包括細胞的培養、組織勻漿及核酸的提取純化。在核酸操作方麵，對DNA、RNA（包括總RNA、mRNA、非編碼RNA）的提取方法進行瞭詳盡的比較和優化指導，強調瞭不同來源樣本對下遊應用的影響。 PCR（聚閤酶鏈式反應）技術的原理、優化、常見故障排除及各類衍生技術（如定量實時熒光PCR (qPCR)、反轉錄PCR (RT-PCR)、長片段PCR、熱啓動PCR等）被係統地介紹。對於引物和探針的設計，給齣瞭精確的計算模型和注意事項，以確保實驗的高效性和特異性。 在分子剋隆的經典範式中，本書深入探討瞭限製性內切酶的選擇與酶切反應的控製，連接反應（包括粘性末端連接和平末端連接）的最佳條件，以及連接效率的評估。載體的選擇是剋隆成功的關鍵，書中詳細對比瞭原核錶達載體、真核錶達載體、酵母載體以及用於特定目的（如腺病毒、慢病毒包裝）載體的結構特點、拷貝數調控和篩選標記。 第二部分：基因錶達與蛋白質工程 本部分聚焦於基因的功能驗證和蛋白質的生産與分析。在基因錶達研究方麵，重點介紹瞭瞬時轉染、穩定轉染的技術流程，包括化學法（磷酸鈣法、脂質體法）、物理法（電穿孔法、微注射法）以及病毒載體介導的基因遞送策略。針對不同細胞係（如原代細胞、永生化細胞係、乾細胞）的轉染效率優化方案被詳細列齣。 蛋白質的錶達與純化是生物製藥和基礎研究的核心環節。書中詳細描述瞭在大腸杆菌、酵母、昆蟲細胞和哺乳動物細胞係統中錶達重組蛋白的策略。尤其對蛋白質的溶解性問題（包涵體的復性）提供瞭多種化學和物理方法。純化部分，係統闡述瞭層析技術（親和層析、離子交換層析、分子篩層析）的選擇與串聯使用，並對層析介質的活化、上樣和洗脫條件進行瞭精確指導。 蛋白質的定性與定量分析技術占據瞭重要篇幅，包括SDS-PAGE（聚丙烯酰胺凝膠電泳）、Western Blotting（免疫印跡）的抗體選擇、封閉液優化及顯色體係的選擇。此外，酶活性的測定、蛋白質修飾（如磷酸化、糖基化）的檢測也得到瞭充分的闡述。 第三部分：基因組編輯與前沿技術 隨著基因組學時代的到來，本部分著重介紹瞭顛覆性的基因編輯技術和高通量測序原理。 CRISPR/Cas9係統作為當前最主流的技術，本書不僅介紹瞭其基本原理，更詳盡地闡述瞭sgRNA的設計原則、遞送方式（質粒、mRNA、RNP）的選擇，以及如何評估脫靶效應。書中專門闢章節討論瞭新型堿基編輯器（Base Editing）和先導編輯器（Prime Editing）的應用場景和操作難點。 對於基因敲除/敲入的驗證，不僅僅局限於傳統的測序，還包含瞭T7內切酶I/核酸酶消化法、高分辨熔解麯綫分析（HRM）等快速驗證方法。 高通量測序（NGS）方麵，本部分涵蓋瞭主流測序平颱（Illumina等）的文庫構建流程，包括DNA/RNA片段化、接頭連接、PCR擴增和質控標準。特彆針對ChIP-seq（染色質免疫沉澱測序）、RNA-seq（全長與測序）以及單細胞測序（scRNA-seq）的實驗設計、數據預處理和基本分析流程，提供瞭詳盡的實驗操作流程圖和常見問題解析。 第四部分：分子生物學實驗的質量控製與規範 成功的分子生物學實驗依賴於嚴格的質量控製。本部分強調瞭試劑的製備與儲存規範（如酶、抗體、核酸/蛋白的保存條件），強調瞭無菌操作和汙染控製的重要性。此外，書中還提供瞭大量關於實驗數據分析的統計學基礎知識，以及如何撰寫規範的實驗記錄和報告，確保實驗結果的可重復性和可追溯性。從安全角度，對涉及生物危害性材料（如病毒載體、緻病菌株）的操作規範進行瞭詳細說明。 本書內容覆蓋麵廣，技術細節豐富，力求為讀者提供一個從理論概念到實際操作的無縫銜接的實驗參考平颱。

評分☆☆☆☆☆

這本書簡直是為我這種分子生物學初學者量身打造的“救星”！拿到手沉甸甸的三冊，那種厚重感就讓人覺得內容絕對紮實可靠。我最欣賞的是它的敘事方式，不是那種枯燥的教科書羅列，而是真的像一位經驗豐富的導師，手把手地帶著你走進每一個實驗的細節。剛開始接觸PCR和質粒構建的時候，我常常感到無從下手，那些理論公式看得我頭大。但是這本書，它會細緻到告訴你試劑的品牌選擇、微量移液的技巧，甚至連離心機轉速和時間的設定都給得非常明確。特彆是關於酶切和連接的章節，我之前總是搞不清楚為什麼有時候會失敗，讀瞭它之後，我纔明白其中一個關鍵點在於緩衝液的配比和溫度控製的細微差彆。它的圖示非常精妙，很多復雜的步驟都有清晰的流程圖和配圖，讓你一眼就能明白“下一步該做什麼”。對於需要頻繁進行剋隆實驗的科研人員來說，這套書簡直是“開箱即用”的實戰寶典，比查閱零散的SOP有效率高太多瞭。我甚至覺得，光是把裏麵的操作步驟嚴格執行一遍，我的實驗成功率就有瞭質的飛躍。

評分☆☆☆☆☆

我之前購買過好幾本同類彆的書籍，但往往要麼過於理論化，要麼就是操作步驟過於簡化，缺乏對“為什麼”的解釋。這套《分子剋隆實驗指南》最打動我的是它所體現齣的“嚴謹的包容性”。它既照顧到瞭第一次接觸實驗的本科生，通過清晰的步驟指導他們完成基礎操作；同時也為資深的研究人員提供瞭優化和創新實驗的理論深度和參考案例。特彆是它對負對照和陽性對照的設置給齣瞭詳盡的指導和預期結果分析，這對於確保實驗結果的可靠性是至關重要的。閱讀過程中，我能感受到作者團隊在編寫過程中的那種高度的責任感，他們似乎預料到瞭讀者在實驗中可能遇到的所有陷阱和睏惑。讀完它，我不僅學會瞭如何剋隆基因，更重要的是，學會瞭如何像一個專業的分子生物學傢那樣去思考和設計實驗。這套書不僅是工具，更是一種思維方式的培養。

評分☆☆☆☆☆

說實話，我原本以為這種“指南”性質的書籍，內容難免會有些過時，畢竟生物技術更新速度太快瞭。但這本書的第四版，展現齣瞭令人驚喜的與時俱進。它不僅僅停留在基礎的質粒文庫構建，對於一些新興的分子工具和策略也有所涉獵，這讓我這個在讀研究生感到非常欣慰。尤其是在處理一些疑難雜癥時，它提供的“故障排除”部分簡直是金玉良言。比如當我遇到DNA電泳條帶拖尾或者剋隆效率低下時，我不再是茫然地在網上搜索零散的論壇帖子，而是直接翻到對應章節，裏麵羅列瞭所有可能的原因，並給齣瞭針對性的解決方案和驗證步驟。這種係統性的錯誤排查能力，是任何網絡資源都無法比擬的。它的寫作風格非常嚴謹，用詞精確，但又不失親和力，不像某些專業文獻那麼晦澀難懂。閱讀過程中，我感覺自己不是在“學習”知識，而是在“掌握”一項技能。對於我這種需要獨立完成課題的實驗狗來說，這套書無疑是大大縮短瞭我的摸索時間，讓我的研究進程能更穩健地嚮前推進。

評分☆☆☆☆☆

拿到這三冊書時，我首先關注的是它的排版和索引係統。對於這種內容極其豐富的工具書，清晰的導航至關重要。這本書在這方麵做得堪稱業界標杆。頁邊空白處有明確的小標題提示，章節之間的跳轉非常流暢。更棒的是，它有一個非常詳盡的術語索引和試劑/儀器索引。我記得有一次我急需查找一種特定緩衝液的配方，但記不清具體是哪個實驗環節，我直接通過試劑索引，幾秒鍾內就定位到瞭準確的配方和操作步驟。這極大地提高瞭我的工作效率。此外，它的紙張質量也非常好，便於在潮濕的實驗室環境中翻閱和標記，這點小細節足見齣版方的用心。這本書的使用體驗非常順暢，它不是那種“讀完就束之高閣”的書，而是那種需要隨時放在實驗颱邊，頻繁翻閱、做筆記的“工作夥伴”。其結構設計完全符閤高強度實驗工作的實際需求。

評分☆☆☆☆☆

這套書的價值，遠超齣瞭一個普通實驗手冊的範疇，它更像是一部分子生物學領域的“工具箱”。令我印象深刻的是它對於實驗設計的哲學思考。很多初學者隻關注“怎麼做”，這本書卻花瞭不少篇幅去解釋“為什麼這麼做”，以及在不同實驗體係下，哪種策略是最優解。這種對原理的深入挖掘，幫助我從根本上理解瞭分子剋隆背後的邏輯。例如，在選擇限製性內切酶時，它不僅列齣瞭切割位點，還深入分析瞭酶的活性對GC含量、DNA濃度等環境因素的敏感性，並給齣瞭應對策略。中冊和下冊在高級應用的拓展上也做得非常到位，涉及到一些復雜的基因編輯技術的前期準備工作，這些內容在其他入門級書籍中是很難找到的。可以說，它為我後續深入學習基因編輯和蛋白質錶達打下瞭極其堅實的基礎。它要求你精確，但同時也教會你變通，這種平衡掌握得恰到好處。