現代分子生物學技術與實驗技巧 pdf epub mobi txt 電子書 下載 2025

簡體網頁||繁體網頁

☆☆☆☆☆

葉棋濃 著

圖書標籤:

• 分子生物學
• 生物技術
• 實驗技巧
• 基因工程
• 生物化學
• 細胞生物學
• 生命科學
• DNA
• RNA
• 蛋白質組學

店鋪： 悅讀時代圖書專營店

齣版社： 化學工業齣版社

ISBN：9787122245021

商品編碼：28279820104

包裝：精裝

齣版時間：2015-10-01

基本信息

書名：現代分子生物學技術與實驗技巧

定價：149.00元

作者：葉棋濃

齣版社：化學工業齣版社

齣版日期：2015-10-01

ISBN：9787122245021

字數：768

頁碼：480

版次：1

裝幀：精裝

開本：16開

商品重量：0.4kg

編輯推薦

---

鑒於在以往的相關書籍中缺乏對實驗結果的詳細分析，緻使讀者不易理解。所以本書強調對實驗結果作具體分析，每個實驗結果都附圖或照片，圖中設陰陽性對照，對照圖對實驗結果進行詳細分析，使讀者對實驗結果一目瞭然，本書還指齣瞭每個技術的難點和解決的辦法。

內容提要

---

現代分子生物學技術與實驗技巧係統介紹瞭現代分子生物實驗技術。~6章包括質粒的提取和目的基因的獲得、基因的剋隆和重要分子的篩選以及目的基因的錶達和檢測；第7~14章涉及近年來發展起來的一些新技術，包括報告基因分析、差異基因錶達譜分析、蛋白質-核酸相互作用技術、蛋白質-蛋白質相互作用技術、細菌體內同源重組技術、轉基因動物、基因打靶技術和流式細胞術；5~17章介紹瞭一些新的分子生物學研究技術，包括乾細胞的分離培養與誘導分化技術、小RNA的構建及實驗技術、非編碼RNA數據庫及在綫分析工具。

本書強調對實驗結果作具體分析，每個實驗結果都附圖或照片，圖中設陰陽性對照，對照圖對實驗結果進行詳細分析，使讀者對實驗結果一目瞭然，本書還指齣瞭每個技術的難點和解決的辦法。

本書是生物、醫學及相關實驗室的工具書，適閤於從事生命科學研究和教育的科技工作者和教師，更適閤於從事生命科學研究的碩士和博士研究生參考閱讀。

目錄

---

章分子生物學技術概述1

一、引言1

二、目的基因的獲取1

三、剋隆載體的構建和選擇2

四、載體的轉化2

五、重組子的篩選3

六、基因錶達4

七、生物工程技術的應用5

參考文獻6

第二章核酸提取技術7

節質粒DNA的提取7

一、引言7

二、堿裂解法小量質粒提取所需的儀器、材料及基本步驟8

三、Promega質粒DNA小量提取試劑盒操作程序9

四、注意事項10

五、實驗結果說明10

六、疑難解析10

第二節基因組DNA的提取12

一、引言12

二、從植物組織提取基因組DNA13

三、從動物組織提取基因組DNA14

四、細菌基因組DNA的製備15

五、用DNA提取試劑盒從全血和組織中提取基因組DNA15

六、注意事項17

七、實驗結果說明18

八、疑難解析18

第三節RNA的提取19

一、引言19

二、實驗設計思路和基本步驟20

三、實驗結果說明24

四、疑難解析24

參考文獻25

第三章目的基因的獲取及鑒定技術27

節普通PCR27

一、普通PCR的基本概念和原理27

二、普通PCR技術的實驗方法28

三、疑難解析33

第二節實時熒光定量PCR34

一、實時熒光定量PCR的基本概念和原理34

二、實時熒光定量PCR的定量方法38

三、熒光定量PCR的實驗方法43

四、熒光定量PCR技術的應用48

五、疑難解析54

第三節環介導恒溫擴增法快速檢測病原菌57

一、引言57

二、環介導恒溫核酸擴增的原理58

三、實驗設計思路和基本步驟60

四、實驗結果68

五、疑難解析69

六、小結72

參考文獻74

第四章載體的構建和鑒定78

節剋隆載體78

一、pBR322載體78

二、pUC8——一種Lac選擇型質粒80

三、pGEM3Z——剋隆DNA的體外轉錄80

四、柯斯質粒載體81

第二節錶達載體82

一、原核錶達載體82

二、真核錶達載體84

第三節載體構建中的關鍵工具和步驟90

一、關鍵工具90

二、關鍵步驟91

第四節載體構建的應用舉例93

一、實驗材料93

二、實驗方法94

參考文獻98

第五章細菌轉化與細胞轉染技術100

節細菌轉化100

一、基本原理100

二、實驗設計思路和基本步驟101

三、實驗結果及分析102

四、疑難解析102

第二節細胞轉染104

一、基本原理104

二、實驗設計和基本步驟107

三、實驗結果及分析108

四、疑難解析109

參考文獻110

第六章外源基因錶達的鑒定112

節Northern Blot112

一、引言112

二、實驗設計思路和基本步驟112

三、實驗結果說明115

四、疑難解析116

第二節RTPCR116

一、引言116

二、實驗設計思路和基本步驟117

三、實驗結果說明119

四、疑難解析119

第三節Western Blot120

一、引言120

二、實驗設計思路和基本步驟120

三、實驗結果說明125

四、疑難解析125

第四節ELISA126

一、引言126

二、實驗設計思路和基本步驟128

三、實驗結果說明130

四、疑難解析131

參考文獻132

第七章報告基因分析134

節報告基因的定義和種類134

一、報告基因的定義134

二、常用的報告基因134

第二節應用報告基因分析基因的轉錄活性135

一、實驗原理135

二、實驗設計和基本步驟136

三、實驗結果分析137

四、疑難解析139

第三節報告基因在動物成像中的應用140

一、實驗原理140

二、實驗設計和基本步驟142

三、實驗結果分析143

四、疑難解析144

參考文獻145

第八章差異基因錶達譜分析147

節基於雙嚮電泳技術的蛋白質組學分析147

一、引言147

二、實驗基本步驟和注意事項147

三、雙嚮電泳實驗結果說明及疑難解析154

四、質譜數據分析說明及疑難解析154

五、結語160

第二節基因芯片160

一、引言160

二、工作原理161

第三節基因芯片的製備163

一、概述163

二、探針的選擇和製備164

三、基因芯片基片的選擇和準備165

四、基因芯片的製作166

第四節基因芯片的檢測168

一、基因芯片的雜交和數據獲取168

二、基因芯片分析常用的軟件和數據庫170

第五節基因芯片的應用171

一、基因芯片與病原微生物檢測171

二、基因芯片與腫瘤172

三、基因芯片與藥物研發174

四、結束語176

參考文獻177

第九章蛋白質核酸相互作用技術178

節凝膠遷移實驗178

一、引言178

二、實驗設計與基本步驟179

三、實驗舉例與結果說明184

四、需要注意的問題186

第二節染色質免疫共沉澱技術187

一、引言187

二、實驗基本步驟188

三、實驗舉例190

四、實驗注意事項191

第三節RNA沉降192

一、實驗基本原理192

二、實驗基本思路193

三、實驗舉例說明198

參考文獻199

第十章蛋白質-蛋白質相互作用技術200

節運用酵母雙雜交技術篩選與靶蛋白相互作用的蛋白質200

一、引言200

二、實驗設備及材料201

三、實驗設計流程202

四、實驗方法202

五、實驗結果說明208

六、疑難解析212

第二節GST沉降213

一、實驗基本原理213

二、實驗基本步驟213

三、實驗舉例216

四、實驗注意事項220

第三節免疫共沉澱221

一、引言221

二、實驗設計和基本步驟222

三、實驗結果舉例223

四、需要注意的問題226

第四節細胞共定位226

一、引言226

二、實驗設計和基本步驟227

三、實驗結果舉例說明227

四、實驗注意事項229

參考文獻229

第十一章微生物體內同源重組技術231

節傳統的大腸杆菌體內同源重組方法（RecA重組係統）231

一、引言231

二、利用RecA重組係統構建痢疾杆菌hns基因插入突變體231

三、RecA重組係統構建突變體的其他方法234

四、存在的問題和解決方法235

五、小結235

第二節Red/ET重組係統236

一、引言236

二、痢疾杆菌酸hns基因缺失突變體的構建237

三、Red同源重組技術應用策略239

四、應用Gap-Repair剋隆技術構建pBR322-Red載體241

五、Red/ET重組係統的其他應用244

六、小結244

參考文獻244

第十二章轉基因動物技術246

節轉基因動物概述246

一、轉基因動物的概念246

二、轉基因動物的分類246

三、轉基因動物的命名247

四、轉基因動物的基本原理248

五、轉基因動物的安全性和倫理學問題249

六、轉基因動物技術的發展概況250

第二節顯微注射法製備轉基因動物251

一、儀器設備及材料251

二、實驗動物準備252

三、轉基因動物製備方法253

四、影響轉基因動物效率的因素256

第三節利用ES細胞製備轉基因動物257

一、ES細胞的研究曆史257

二、ES細胞的生物學特性257

三、ES細胞分離培養的基本方法258

四、ES細胞的遺傳修飾262

五、轉基因製備269

參考文獻270

第十三章基因打靶技術271

一、基因打靶技術的原理271

二、利用同源重組構建基因打靶動物模型的基本步驟272

三、基因打靶的策略274

四、基因打靶的生物學意義和應用前景286

參考文獻287

第十四章流式細胞術實驗方法291

一、引言291

二、實驗方法294

三、實驗結果分析299

四、流式細胞分析的質量控製309

參考文獻311

第十五章乾細胞的分離培養與誘導分化313

節人胎盤來源間充質乾細胞的分離培養與純化313

一、引言313

二、材料、試劑與主要儀器設備314

三、實驗方法315

四、實驗結果318

五、注意事項321

第二節小鼠間充質乾細胞的分離培養與純化324

一、引言324

二、骨髓法325

三、密質骨法325

第三節人胚胎乾細胞的培養334

一、引言334

二、實驗材料335

三、實驗方法335

四、注意事項339

第四節CD34 造血乾細胞與CD14 單核細胞嚮樹突狀細胞的誘導分化339

一、引言339

二、實驗材料與方法340

三、實驗結果343

四、注意事項345

參考文獻346

第十六章小RNA的構造及實驗技術351

節miRNA剋隆351

一、材料與設備352

二、實驗方法352

三、疑難解析355

第二節miRNA Northern Blot355

一、材料與設備355

二、實驗方法356

三、疑難解析357

第三節miRNA原位雜交357

一、材料與設備357

二、實驗方法358

三、疑難解析359

第四節基於poly(A)加尾的miRNA RT-PCR359

一、材料與設備359

二、實驗方法360

三、疑難解析361

第五節miRNA功能研究362

一、miRNA錶達檢測362

二、miRNA功能篩選鑒定362

三、miRNA靶基因鑒定364

第六節siRNA的構造及實驗研究365

一、引言365

二、如何進行siRNA實驗368

三、常用siRNA實驗的基本步驟371

四、實驗結果說明374

五、疑難解析376

參考文獻376

第十七章非編碼RNA數據庫及在綫分析工具介紹379

一、綜閤性非編碼RNA數據庫379

二、miRNA相關數據庫及預測403

三、rRNA相關數據庫及預測424

四、sRNA相關數據庫及預測432

五、siRNA相關數據庫及預測448

六、tRNA相關數據庫及預測456

七、snoRNA相關數據庫及預測471

參考文獻478

作者介紹

---

葉棋濃，軍事醫學科學院生物工程研究所，研究員，醫學分子生物學研究室主任。國傢傑齣青年科學基金和軍隊醫學傑齣人纔基金獲得者。總後勤部“科技銀星”。。《World Journal of Clinical Oncology》、《Journal of Chinese Clinical Medicine》、《中國生物化學與分子生物學雜誌》、《國際腫瘤學》等雜誌編委。

文摘

---

序言

---

考古學前沿：新石器時代聚落形態與環境適應研究 導言：重構人類早期生存圖景 本書聚焦於新石器時代（Neolithic Period）這一人類文明的關鍵轉型期，深入探討瞭聚落形態的演變、環境適應策略以及社會結構的復雜化進程。我們不僅僅是在描繪古代遺址的平麵布局，而是試圖通過嚴謹的考古學、地質學和古環境學交叉研究，重建史前人類與他們所處自然環境之間復雜而動態的相互作用關係。新石器時代標誌著人類從以狩獵采集為主的流動生活轉嚮定居農耕，這一轉變深刻地塑造瞭後世文明的底色。理解這一時期的聚落如何選擇地點、如何組織空間、以及如何應對氣候變遷和資源壓力，對於理解人類社會長期可持續發展的內在邏輯至關重要。 第一部分：聚落選址的生態經濟學分析 聚落的選址從來不是隨機的，而是對區域生態係統服務價值最大化的體現。本部分將詳細分析新石器時代早期定居點選址的驅動因素，並構建一套多因子評估模型。 1. 水源與地形的耦閤關係： 我們考察瞭不同文化區域內，聚落與永久性水源（河流、湖泊、地下水齣露點）的最小距離閾值。研究發現，早期聚落傾嚮於選擇地勢稍高、排水良好的颱地或河漫灘邊緣，這既能有效規避洪水風險，又能保證耕作的便利性。通過對典型遺址（如中國黃河流域的仰韶文化遺址群和歐洲的綫性陶文化遺址）的分析，我們揭示瞭不同地理單元對聚落密度的製約機製。 2. 生態位釋放與資源可得性： 新石器時代的生計模式轉型，使得對特定可利用生物資源的依賴性增強。本章通過對遺址周邊土壤類型（土壤肥力指數的古土壤學重建）和植被變遷（孢粉學證據）的分析，量化瞭不同聚落對初級生産力（農作物和可馴化野生資源的混閤利用）的依賴程度。我們特彆關注瞭“邊緣區”聚落的生存策略，即那些位於農業適宜區與非適宜區交界地帶的定居點，它們往往發展齣更具韌性的、多元化的資源獲取係統。 3. 景觀中的可防禦性與社會邊界： 在社會復雜性增加的背景下，聚落的防禦性特徵逐漸顯現。本研究對壕溝、圍牆等防禦性設施的考古學特徵進行瞭係統梳理。我們對比瞭防禦性聚落與非防禦性聚落的內部空間結構差異，探討瞭防禦需求是如何重塑社區內部的資源分配和公共空間的組織方式的。聚落的選址也反映瞭早期社會對外部環境（包括潛在的人群衝突或大型野生動物威脅）的風險評估。 第二部分：聚落內部空間組織與功能分區 聚落的內部布局是理解早期社會組織、傢庭結構和公共生活模式的直接窗口。本部分利用三維重建技術和地球物理勘探數據，對聚落的微觀空間進行瞭精細化解讀。 1. 居住單元的形態與變遷： 從早期的圓形或橢圓形半地穴式居所，到中晚期逐漸齣現的地麵式長方形或多間聯排建築，居住單元的演化反映瞭傢庭規模的擴大和技術的進步。我們基於建築遺跡的基槽形態、柱洞分布和陶器集中的密度，推斷齣不同類型居所的內部功能分區（如竈颱區、儲存區、睡眠區），並以此為基礎估算單元內常住人口規模。 2. 倉儲與食物安全： 定居生活的基礎在於食物的盈餘和有效儲存。本章著重分析瞭專門的儲藏設施（如窖穴、陶罐群）在聚落中的分布密度和空間位置。通過對窖穴內殘留物（碳化植物種子、動物骨骼）的殘留分析，我們可以評估不同聚落對季節性飢荒的抵抗能力，以及是否存在集體性的、受控的食物分配機製。 3. 遺址中的公共空間與禮儀中心： 在一些較大的或晚期的聚落中，齣現瞭明顯的非居住性建築群。本部分探討瞭廣場、祭祀坑、或大型共享建築的考古學證據。這些“公共空間”的齣現，暗示瞭社區內部權力結構、社會凝聚力的維係機製，以及可能存在的社會分層現象。我們通過分析公共空間周圍齣土的特殊器物（如具有儀式意義的陶器或工具）的分布，來解讀其社會功能。 第三部分：環境壓力下的適應與調整——以氣候波動為例 新石器時代並非一個均勻發展的階段，它經曆瞭數次顯著的氣候波動，這些波動對定居社區的生存構成瞭嚴峻挑戰。 1. 古氣候重建與事件對應： 利用湖泊沉積物、洞穴石筍等代用指標，我們重建瞭特定考古學時期（如全新世大暖期末期或早期乾旱事件）的環境變化軌跡。隨後，我們將這些環境數據與聚落的考古學記錄進行精確的時間對標。 2. 聚落的撤離、收縮與再適應策略： 當環境壓力閾值被突破時，聚落會采取何種應對策略？本研究識彆瞭在關鍵乾旱期或濕熱期齣現的聚落遷移模式（如嚮更高海拔或更濕潤地帶轉移）和聚落規模的顯著收縮現象。我們分析瞭聚落為應對資源稀缺而進行的生計結構調整，例如，某些社區可能臨時增強瞭漁獵活動的比重，或者開始利用以往被忽視的次生資源。 3. 景觀改造的痕跡與環境負荷： 隨著人口的增加和土地的長期耕種，人類活動對區域環境造成瞭不可逆轉的影響。本章通過對比不同時期的植矽體分析和土壤侵蝕證據，評估瞭早期農業活動對地貌和生物多樣性的影響程度。這部分揭示瞭新石器時代定居社區在追求生産力最大化的同時，是如何無意中埋下未來環境危機的種子。 結論：定居的遺産與長期演化 本書的最終目標是將分散的遺址點連綴成一個動態的、對環境有響應的社會係統。新石器時代的聚落形態研究，不僅是對遙遠過去的考古學重建，更是對人類適應性、技術創新能力以及社會組織靈活性的深刻洞察。這些早期定居的經驗與教訓，至今仍為我們理解當代人類社會與地球環境的復雜關係提供著寶貴的曆史參照。 --- 關鍵詞： 新石器時代，聚落考古學，環境適應，空間組織，生計策略，古氣候重建，社會結構。

評分☆☆☆☆☆

這本書在排版和圖錶質量上暴露齣瞭明顯的不足。很多關鍵的實驗流程圖看起來模糊不清，箭頭和標記混雜在一起，根本無法準確分辨步驟之間的先後順序和邏輯關係。更令人惱火的是，某些圖錶中的文字注釋小得幾乎看不清，需要藉助放大鏡纔能勉強辨認。這對於依賴視覺信息來學習實驗操作的讀者來說，簡直是災難。一次成功的實驗往往建立在對細節的精確把握上，而模糊的圖示恰恰是導緻細節缺失的罪魁禍首。此外，書中對參考文獻的標注也顯得零散且不規範，讓人無法追溯到原始的權威信息來源，這無疑削弱瞭整本書的學術可信度和實用價值。

評分☆☆☆☆☆

這本書的文字風格相當晦澀，大量的專業術語堆砌在一起，使得初次接觸這些領域的讀者會感到無所適從。我努力去理解那些復雜的句子結構和技術描述，但效果並不理想。舉個例子，在討論蛋白質純化時，書中用瞭大量的篇幅來描述不同層析介質的物理特性，卻對如何根據目標蛋白的特性來優化洗脫條件這一關鍵點著墨不多。這讓我想起我大學時讀的一些教科書，那種為瞭追求“學術嚴謹性”而犧牲瞭可讀性的感覺非常明顯。我希望能看到更生動的比喻或者更清晰的圖示來輔助理解，但這本書在這方麵做得非常不足。讀起來更像是對著一份枯燥的實驗記錄進行研讀，而不是在進行一次愉快的知識探索。希望作者能在後續的版本中考慮引入更多的教學輔助元素。

評分☆☆☆☆☆

從結構上講，這本書的章節劃分顯得有些隨意和不平衡。某些章節為瞭湊字數，反復囉嗦地描述一些已經被普遍接受且無需贅述的基礎概念，而另一些讀者迫切需要深入瞭解的復雜主題，卻被草草帶過，甚至被拆分到不同的、看似毫不相關的章節中去講解。這種內在邏輯的混亂，使得讀者在構建自己的知識體係時非常吃力。我需要花費大量時間去整理和重組書中分散的信息點，纔能拼湊齣一個完整的技術框架。一本優秀的工具書，應該像一張清晰的導航地圖，引導讀者高效地抵達知識的彼岸。而這本書更像是一堆零散的地圖碎片，需要讀者自己花費巨大的精力去重新繪製輪廓，這極大地降低瞭學習效率和閱讀體驗。

評分☆☆☆☆☆

我購買這本書的主要目的是希望能夠瞭解當前生物技術領域最新的發展動態和應用案例。然而，書中對一些經典技術的介紹雖然詳盡，但對於近年來突飛猛進的新興技術，如單細胞測序、空間轉錄組學等，涉及得非常有限，或者隻是蜻蜓點水般地提瞭一句。這讓我感覺這本書的內容更新速度有些滯後於學科發展的步伐。如果一本技術書籍不能及時反映行業前沿，那麼它的時效性就會大打摺扣。我期待的是一本能夠引領我站在技術製高點進行思考的工具書，而不是一本停留在上一個十年技術水平的資料匯編。這種內容上的“陳舊感”是它最大的短闆，使得我在查閱時，不得不將這本書作為背景知識參考，而將主要的精力投入到網絡上的最新文獻和研討會資料中去尋找答案。

評分☆☆☆☆☆

這本書的封麵設計得相當樸實，封麵上除瞭書名，幾乎沒有多餘的裝飾，這讓我原本對內容充滿瞭好奇。我抱著學習和探索的心態翻開瞭第一章，期待著能看到對基礎概念的深入闡述和對前沿技術的全麵梳理。然而，讀完前幾頁後，我發現這本書似乎更側重於對某些特定技術流程的機械化描述，而非對背後原理的係統性講解。比如，在涉及到基因編輯技術的部分，書中直接給齣瞭操作步驟，但對於為什麼要選擇特定的酶，或者不同條件下反應機理的差異，探討得非常少。這對於我這樣希望建立紮實理論基礎的讀者來說，多少有些令人失望。我期待的不僅僅是“怎麼做”，更重要的是“為什麼這麼做”。書中很多地方的論述顯得有些割裂，仿佛是將不同的實驗手冊拼湊在一起，缺乏一個連貫的、邏輯清晰的主綫來串聯起這些技術。