现代分子生物学技术及实验技巧(精)/生物实验室系列

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叶棋浓 编
图书标签:
  • 分子生物学
  • 生物技术
  • 实验技巧
  • 生物实验室
  • 基因工程
  • 生物化学
  • 生命科学
  • DNA
  • RNA
  • 蛋白质
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店铺: 博库网旗舰店
出版社: 化学工业
ISBN:9787122245021
商品编码:10124793779
开本:16
出版时间:2015-10-01

具体描述

>基本信息

  • 商品名称:现代分子生物学技术及实验技巧(精)/生物实验室系列
  • 作者:编者:叶棋浓
  • 定价:149
  • 出版社:化学工业
  • ISBN号:9787122245021

>其他参考信息(以实物为准)

  • 出版时间:2015-10-01
  • 印刷时间:2015-10-01
  • 版次:1
  • 印次:1
  • 开本:16开
  • 包装:精装
  • 页数:480
  • 字数:768千字

编辑推荐语

叶棋浓编著的《现代分子生物学技术及实验技巧》系统介绍了现代分子生物实验技术。**~6章包括质粒的提取和目的基因的获得、基因的克隆和重要分子的筛选以及目的基因的表达和检测;第7~14章涉及近年来发展起来的一些新技术,包括报告基因分析、差异基因表达谱分析、蛋白质一核酸相互作用技术、蛋白质一蛋白质相互作用技术、细菌体内同源重组技术、转基因动物、基因打靶技术和流式细胞术;**5~17章介绍了一些*新的分子生物学研究技术,包括干细胞的分离培养与诱导分化技术、小RNA的构建及实验技术、非编码RNA数据库及在线分析工具。 本书强调对实验结果作具体分析,每个实验结果都附图或照片,图中设阴阳性对照,对照图对实验结果进行详细分析,使读者对实验结果一目了然,本书还指出了每个技术的难点和解决的办法。 本书是生物、医学及相关实验室必备的工具书,适合从事生命科学研究和教育的科技工作者和教师,以及从事生命科学研究的硕士和博士研究生阅读参考。

目录

**章 分子生物学技术概述
一、引言
二、目的基因的获取
三、克隆载体的构建和选择
四、载体的转化
五、重组子的筛选
六、基因表达
七、生物工程技术的应用
参考文献
第二章 核酸提取技术
**节 质粒DNA的提取
一、引言
二、碱裂解法小量质粒提取所需的仪器、材料及基本步骤
三、Promega质粒DNA小量提取试剂盒操作程序
四、注意事项
五、实验结果说明
六、疑难解析
第二节 基因组DNA的提取
一、引言
二、从植物组织提取基因组DNA
三、从动物组织提取基因组DNA
四、细菌基因组DNA的制备
五、用DNA提取试剂盒从全血和组织中提取基因组DNA
六、注意事项
七、实验结果说明
八、疑难解析
第三节 RNA的提取
一、引言
二、实验设计思路和基本步骤
三、实验结果说明
四、疑难解析
参考文献
第三章 目的基因的获取及鉴定技术
**节 普通PCR
一、普通PCR的基本概念和原理
二、普通PCR技术的实验方法
三、疑难解析
第二节 实时荧光定量PCR
一、实时荧光定量PCR的基本概念和原理
二、实时荧光定量PCR的定量方法
三、荧光定量PCR的实验方法
四、荧光定量PCR技术的应用
五、疑难解析
第三节 环介导恒温扩增法快速检测病原菌
一、引言
二、环介导恒温核酸扩增的原理
三、实验设计思路和基本步骤
四、实验结果
五、疑难解析
六、小结
参考文献
第四章 载体的构建和鉴定
**节 克隆载体
一、pBR322载体
二、pUC8——一种Lac选择型质粒
三、pGEM3Z——克隆DNA的体外转录
四、柯斯质粒载体
第二节 表达载体
一、原核表达载体
二、真核表达载体
第三节 载体构建中的关键工具和步骤
一、关键工具
二、关键步骤
第四节 载体构建的应用举例
一、实验材料
二、实验方法
参考文献
第五章 细菌转化与细胞转染技术
**节 细菌转化
一、基本原理
二、实验设计思路和基本步骤
三、实验结果及分析
四、疑难解析
第二节 细胞转染
一、基本原理
二、实验设计和基本步骤
三、实验结果及分析
四、疑难解析
参考文献
第六章 外源基因表达的鉴定
第七章 报告基因分析
第八章 差异基因表达谱分析
第九章 蛋白质核酸相互作用技术
第十章 蛋白质-蛋白质相互作用技术
第十一章 微生物体内同源重组技术
第十二章 转基因动物技术
第十三章 基因打靶技术
第十四章 流式细胞术实验方法
第十五章 干细胞的分离培养与诱导分化
第十六章 小RNA的构造及实验技术
第十七章 非编码RNA数据库及在线分析工具介绍


现代分子生物学技术及实验技巧 (精)/生物实验室系列 本书介绍: 本书《现代分子生物学技术及实验技巧 (精)/生物实验室系列》旨在为分子生物学领域的学习者、研究人员和实验室技术人员提供一本全面、深入且实用的技术指南。它不仅涵盖了分子生物学领域的核心理论基础,更侧重于对当前最前沿、应用最广泛的实验技术进行详尽的解析与操作指导。 内容结构与特色: 本书内容组织严谨,逻辑清晰,从基础概念到高级应用层层递进,确保读者能够系统地掌握分子生物学实验的全貌。全书分为若干核心模块,每个模块都针对特定技术领域进行了深入探讨。 第一部分:分子生物学基础与通用技术 本部分聚焦于分子生物学研究的基石——核酸和蛋白质的提取、纯化与基础分析技术。 核酸的提取与纯化: 详细阐述了从不同来源(如细菌、酵母、植物组织、动物组织及血液)高效提取基因组DNA、质粒DNA和总RNA的方法。重点讲解了酚-氯仿抽提法、硅胶柱吸附法(Spin Column)的原理、操作细节及常见问题排查。对RNA提取中RNase污染的控制策略进行了详尽说明。 定量与纯度评估: 介绍了使用分光光度计(如NanoDrop)和荧光定量(如Qubit)对核酸进行定量的标准流程和优缺点对比。讨论了A260/A280和A260/A230比值的意义,以及琼脂糖凝胶电泳在初步判断核酸完整性中的应用。 电泳技术详解: 深入讲解了琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)的原理。尤其侧重于非变性和变性PAGE在分离不同大小DNA片段和蛋白质时的应用差异,包括分子量标记的选择和电泳条件(电压、缓冲液)的优化。 第二部分:分子克隆与基因操作核心技术 本部分是全书的重点,详细介绍了基因工程赖以生存的关键技术,为后续的分子研究奠定基础。 聚合酶链式反应 (PCR) 及其变体: 详述了标准PCR的反应体系、退火温度的确定方法(Tm值计算)、引物设计的原则(特异性、二级结构避免)。重点剖析了以下高级PCR技术: 实时荧光定量PCR (qPCR/RT-qPCR): 讲解了SYBR Green染料法和TaqMan探针法的原理、标准曲线的建立、溶解曲线分析以及绝对定量与相对定量的计算方法,强调其在基因表达水平分析中的应用。 反转录PCR (RT-PCR): 区分了单步骤和两步骤RT-PCR,并讨论了对cDNA文库构建的适用性。 高保真PCR与长片段PCR: 介绍了使用不同DNA聚合酶(如Pfu、Phusion)的优势及其在精确性克隆中的应用。 限制性内切酶的应用与酶切分析: 归纳了各类限制酶的切割特性,并详细讲解了单酶切、双酶切的判断标准。阐述了胶回收和纯化片段的规范操作。 分子克隆策略: 详尽描述了传统基于限制性内切酶的连接方法。着重介绍了TA克隆和Gateway(接入与转位)系统等高效克隆技术,包括载体构建、同源重组的原理和操作流程。 第三部分:基因表达调控与蛋白质研究 本部分关注基因产物——蛋白质的检测、定位和功能分析。 蛋白质的提取、定量与电泳: 涵盖了从细胞和组织中提取天然和变性蛋白质的方法。重点介绍Bradford法、BCA法等蛋白质定量方法的选择标准。深入解析了SDS-PAGE的分离原理,以及如何根据蛋白质分子量选择合适的胶浓度。 Western Blot (免疫印迹法): 提供了从转膜(PVDF膜与NC膜的选择)、一抗/二抗孵育、洗涤优化到显影的完整SOP。讨论了化学发光与酶联底物在检测灵敏度上的权衡。 免疫沉淀 (IP) 与共免疫沉淀 (Co-IP): 阐述了利用抗体捕获目标蛋白及其相互作用伙伴的原理,是研究蛋白质复合物形成的有力工具。 蛋白质表达与纯化: 介绍了原核表达系统(如大肠杆菌)和真核表达系统(如哺乳动物细胞系)的优缺点。重点讲解了使用亲和层析技术(如His-tag、GST-tag)纯化重组蛋白的步骤,包括诱导表达、裂解、层析柱装填、洗脱梯度优化。 第四部分:现代前沿技术与数据分析 本部分引入了当前生物学研究中最热门、最具颠覆性的技术,并强调了数据分析能力的重要性。 基因编辑技术 (CRISPR/Cas9): 详细介绍了Cas9核酸酶的作用机制、sgRNA的设计原则与脱靶效应的预防。重点演示了如何构建sgRNA表达载体,以及如何通过同源末端连接(HDR)或非同源末端连接(NHEJ)实现基因敲除或精确修饰。 下一代测序 (NGS) 基础流程: 概述了NGS文库的构建流程,重点关注RNA-seq(转录组测序)和ChIP-seq(染色质免疫共沉淀测序)的文库制备要求。 分子生物学数据分析入门: 提供了基础的生物信息学工具使用指导,例如如何使用Primer-BLAST设计引物,如何使用Geneious或SnapGene进行质粒图谱编辑和序列操作,以及基础的表达数据(如Ct值或FPKM)的统计学处理方法。 技术要点与安全规范: 本书特别设置了“实验室安全与规范”章节,强调了生物安全操作(BSL-1/BSL-2)、化学品安全处理、高压灭菌器的正确使用,以及分子生物学实验中交叉污染的预防措施。 目标读者: 本书内容深度适中,覆盖面广,是生命科学、生物工程、基础医学、农学等相关专业本科生高年级、研究生、博士后研究人员以及实验室技术人员案头必备的实用工具书。通过本书的学习和实践,读者将能够熟练掌握分子生物学实验的各项核心技术,并具备独立设计和实施复杂实验项目的能力。

用户评价

评分

这本《现代分子生物学技术及实验技巧》简直就是我实验室的“宝典”。它涵盖的实验技术非常全面,从基础的DNA/RNA提取,到复杂的基因编辑和蛋白质组学分析,几乎你想到的这里都有。而且,每一个技术都不仅仅是给出一个操作流程,而是从原理出发,深入浅出地解释了背后的分子机制。例如,在讲解基因沉默技术时,它不仅描述了siRNA和shRNA的设计原则,还解释了RISC复合体的形成和作用,让我对这些技术有了更深层次的理解。书中大量的图表和流程图也起到了画龙点睛的作用,将复杂的实验步骤变得清晰明了,即使是初学者也能快速掌握。我最欣赏的一点是,这本书对实验结果的分析和解读也给予了足够的重视。它不仅仅告诉你如何得到数据,更教你如何去理解这些数据,如何从中得出有意义的结论,甚至还讨论了数据可能存在的偏差和局限性。这让我觉得,这本书不仅仅是传授技术,更是在培养我们的科学思维。

评分

这本书的编排结构非常合理,查找起来非常方便。它将不同的分子生物学技术进行了清晰的分类,每个章节都聚焦于一个核心的技术领域,然后在这个领域内,再细分出具体的实验方法和技巧。这对于我这种需要经常查阅具体实验操作的人来说,简直太友好了。当我遇到一个具体的问题时,我可以直接翻到相应的章节,很快就能找到我需要的信息。而且,书中对于每一个实验的介绍,都包含了“目的”、“原理”、“主要仪器”、“试剂”、“操作步骤”、“结果判读”、“注意事项”等几个部分,逻辑性非常强,条理清晰。我尤其喜欢它在“注意事项”部分给出的建议,这些都是经过无数次实验验证的宝贵经验,能帮助我们避免很多不必要的弯路。比如,在进行酶切反应时,它会提醒你注意酶的活性、反应时间、温度控制等关键因素,这些看似不起眼的小细节,往往决定了实验的成败。这本书让我觉得,它不仅仅是一本技术手册,更像是一位经验丰富的导师,时刻在我们身边,指导我们如何才能做出高质量的实验。

评分

说实话,一开始我抱着“看看有什么新花样”的心态翻开了这本书,但很快就被它深深吸引了。它不是那种一本正经、严肃到让人打瞌睡的书。作者的语言风格非常幽默风趣,有时候读着读着会忍不住笑出声来。比如,在讲到一些容易出错的操作时,作者会用一些很形象的比喻,把枯燥的技术讲解变得活泼有趣,让我在学习的过程中一点也不觉得枯燥。而且,书中还穿插了很多作者自己的亲身经历和感悟,那些“过来人”的经验分享,比任何标准化的操作手册都来得有温度。它让我觉得,做实验不只是冷冰冰的机器和试剂,背后也充满了人的智慧和情感。比如,在介绍细胞培养时,作者详细描述了不同细胞系的生长特性,以及在遇到细胞污染时该如何处理,那种充满同情的语气,仿佛在安慰一个刚刚搞砸实验的菜鸟。这本书让我觉得,即使是在最严谨的科学研究领域,也可以充满人情味。

评分

这本书真的彻底颠覆了我对分子生物学实验的认知。原本以为只是枯燥的技术罗列,没想到作者用一种非常生动形象的方式,把那些复杂的原理和操作步骤娓娓道来。比如,在讲PCR扩增时,它不仅仅是告诉你“加入Taq酶、dNTPs、引物和模板DNA,然后进行热循环”,而是详细解释了为什么需要这些组分,它们在高温和低温循环中各自扮演的角色,甚至还模拟了DNA聚合酶在不同温度下的“工作状态”,读起来就像在听一位经验丰富的老师在课堂上讲课,充满了画面感。书中对于各种常用仪器的使用讲解也异常细致,从仪器的基本构造到日常维护,再到一些容易出错的操作细节,都给出了非常实用的建议。我记得之前做Western Blot时,总是会遇到背景很高的问题,这本书里专门有一章讲了如何优化显影条件,从封闭液的选择到洗膜的时间和次数,给出了好几种不同的方案,让我茅塞顿开,感觉以后做实验都能事半功倍了。而且,书中还穿插了很多“实验室小贴士”,那些都是我在其他地方很难找到的宝贵经验,比如如何避免移液枪枪头交叉污染,如何高效地配置溶液,甚至还有关于实验室安全的一些注意事项,这些都让我觉得这本书不仅仅是技术手册,更是一位良师益友。

评分

这本书给我最大的感受就是它的“接地气”。很多分子生物学教材,虽然内容权威,但往往过于理论化,读起来像是嚼蜡。而这本《现代分子生物学技术及实验技巧》,则完全是站在实验者的角度来写的。它深刻理解了我们在实际操作中会遇到的各种困境和瓶颈。比如,书中在介绍基因克隆时,并没有仅仅停留在理论层面,而是详细阐述了连接酶的选择、载体和插入片段的比例、转化效率的优化等关键环节,并且针对每一步可能出现的问题,都提供了非常具体的解决方案。我尤其喜欢其中关于“疑难杂症排查”的部分,它把一些常见但又难以解决的实验问题,比如PCR扩增产物模糊、基因测序结果不理想等,进行系统性的归类分析,并给出了一系列排查思路和应对策略,这种“故障排除”指南式的写作风格,对于我们这些在实验室摸爬滚打的人来说,简直是救星!它让我明白,很多时候实验失败并不是因为原理不清,而是操作中的一些细节没有把握好,这本书恰恰能弥补这些“细节的鸿沟”。

评分

书是不错的,可竟然周折到21天才到货,快递签收自动收贷!亏得京东大平台!书找回!

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还好,不过要具体到试剂盒,提供一个思路吗。

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书还不错!内容详细,适合初学者

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发过来的书都跟旧书一样,皱巴巴的

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帮别人买 的

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包装很好,物流偏慢

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书的质量不错 包装严谨 送货快

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还好

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书挺好,就是物流不怎么样,书角都搞皱了,心疼

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