植物生物技术实验教程

植物生物技术实验教程 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2025

郭仰东 编
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出版社: 中国农业大学出版社
ISBN:9787565512049
版次:1
商品编码:11835106
包装:平装
丛书名: 普通高等教育农业部“十二五”规划教材
开本:16开
出版时间:2015-06-01
用纸:胶版纸
页数:319
字数:381000
正文语种:中文

具体描述

内容简介

  《植物生物技术实验教程》是为配合讲授植物细胞组织培养、植物生物技术等课程而编写的。编写者来自国内多所高校,具有多年的相关领域教学和科研经历。在植物细胞组织培养和植物生物技术课程教学工作中,编者感到缺乏合适的实验指导类教材,实验讲解过程中颇感不便,为此编写了《植物生物技术实验教程》。《植物生物技术实验教程》包含十五章,涵盖植物细胞和组织培养,遗传转化,核酸、蛋白质的提取和纯化,电泳技术,目的基因的获得,载体构建技术以及分子标记技术等内容。可以作为农林和生物类各专业大学生的实验指导教材,也可作为研究生及从事植物细胞组织培养和植物生物技术研究和应用的科技工作者的参考书。《植物生物技术实验教程》已人选第二批普通高等教育农业部“十二五”规划教材。

内页插图

目录

第一章 植物细胞组织培养的基本设备和技术
实验一 植物组织培养所需基本设备仪器用具的认知及其使用方法介绍
实验二 植物离体培养的基本技术简介
实验三 MS培养基的配制

第二章 植物组织器官培养
实验一 番茄离体根培养技术
实验二 菊花花器官培养技术
实验三 小麦胚培养技术
实验四 苹果胚乳培养技术

第三章 植物离体快繁
实验一 烟草微繁殖技术
实验二 蝴蝶兰的快繁技术
实验三 石刁柏茎段培养技术
实验四 香蕉快繁技术

第四章 植物茎尖分生组织培养
实验一 植物茎尖分生组织剥离和培养
实验二 草莓茎尖脱毒
实验三 马铃薯茎尖脱毒

第五章 植物单倍体细胞培养
实验一 甘蓝型油菜小孢子培养及植株再生
实验二 烟草花药培养及植株再生
实验三 水稻花药培养及植株再生
实验四 甜菜雌性单倍体的离体诱导
实验五 大麦小孢子培养及植株再生

第六章 原生质体培养、融合及植株再生
实验一 芥菜原生质体培养及植株再生
实验二 水稻原生质体培养及植株再生
实验三 石竹科植物细胞融合及植株再生
实验四 普通小麦和簇毛麦细胞融合及植株再生
实验五 烟草叶肉细胞原生质体的游离与融合

第七章 植物种质离体保存
实验一 苹果低温离体保存技术
实验二 马铃薯试管苗保存技术
实验三 大蒜茎尖玻璃化法超低温保存技术

第八章 植物人工种子
实验一 烟草人工种子制作
实验二 胡萝卜人工种子制作

第九章 植物细胞培养与次生代谢
实验一 烟草愈伤组织的诱导和培养
实验二 植物悬浮细胞系的建立
实验三 植物细胞生长量的测定
实验四 植物细胞活力的测定
实验五 植物细胞系的筛选与保存
实验六 植物培养物次生代谢产物的含量分析与分离纯化
实验七 植物细胞培养合成次生代谢产物的调节
实验八 植物细胞大规模培养生产次生代谢产物

第十章 核酸、蛋白质的提取和纯化
实验一 质粒DNA的提取以及纯化
实验二 水稻基因组DNA的提取和纯化
实验三 烟草叶片RNA的提取和纯化
实验四 小麦叶片总蛋白的提取
实验五 番茄果实的总蛋白的提取
实验六 拟南芥叶片的可溶性蛋白提取

第十一章 目的基因的获得
实验一 聚合酶链式反应(PCR)
实验二 烟草SGTI基因的3'RACE克隆
实验三 烟草SGTI基因的5'RACE克隆
实验四 月季染色体步移技术

第十二章 载体构建技术
实验一 大豆NAC克隆载体构建
实验二 黄瓜LOX2基因原核表达载体构建
实验三 番茄PIP亚细胞定位载体构建

第十三章 植物遗传转化
实验一 根癌农杆菌介导的烟草叶盘遗传转化
实验二 基因枪法转化小麦未成熟胚
实验三 花粉管通道法介导棉花基因转化
实验四 拟南芥的转化
实验五 黄瓜的转化
实验六 番茄的转化

第十四章 电泳技术
实验一 质粒的琼脂糖凝胶电泳检测
实验二 醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质
实验三 聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分析小麦过氧化物酶同工酶
实验四 用SDS一聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质的相对分子质量
实验五 蛋白质的双向凝胶电泳分离

第十五章 分子标记技术
实验一 RFLP检测水稻亲本遗传多样性
实验二 小麦耐盐种质遗传多样性的RAPD分析
实验三 菠菜种质遗传多样性和亲缘关系的AFLP分析
实验四 棉花耐盐性的SSR鉴定
实验五 拟南芥SNP遗传标记的检测
参考文献

附录
附录一 元素相对原子质量表
附录二 常用化合物相对分子质量表
附录三 常用英文缩写
附录四 植物组织培养常用培养基成分表
附录五 植物组织培养中经常使用的热不稳定物质
附录六 常用缓冲溶液的配制
附录七 常用酸碱摩尔浓度的近似配制表
附录八 培养基植物激素浓度换算表
附录九 常见植物生长调节物质及主要性质
附录十 温湿度换算表
附录十一 细胞筛孔径与目数换算表
附录十二 离心机转数与离心力的列线图及公式
附录十三 计量单位前缀
附录十四 常用电泳缓冲液
附录十五 常用试剂母液的配制
附录十六 pH计标准缓冲液的配制
附录十七 常用的抗生素
附录十八 核酸相对分子质量标准物
附录十九 蛋白质相对分子质量标准物

前言/序言


现代分子生物学技术与应用:从基础理论到前沿探索 本书简介 一、 绪论:分子生物学研究的时代背景与核心范畴 本书旨在全面系统地阐述现代分子生物学领域的核心技术、实验流程、数据分析方法及其在生命科学研究中的广泛应用。我们立足于当前生命科学研究的快速发展态势,聚焦于那些推动生物技术革命的关键技术平台,如基因组学、蛋白质组学、单细胞分析以及基因编辑技术等。 本书的编写遵循“理论与实践紧密结合,基础技术与前沿应用同步推进”的原则。第一部分将为读者奠定坚实的理论基础,深入剖析分子生物学研究的逻辑框架,包括遗传物质的结构与功能、中心法则的最新理解,以及分子生物学实验设计的基本原则,确保读者理解“为什么”要进行特定的实验操作。 二、 核心技术平台与实验实操精要 本书将篇幅重点投入到当前实验室操作中最常用、最关键的技术环节,力求提供详实的操作指南和故障排除建议。 1. 核酸的提取、纯化与定量分析: 详细阐述从不同生物材料(如细菌、酵母、动物组织、植物组织、微生物培养物等)中高效提取高质量DNA和RNA的技术路线,包括溶液法、柱式纯化法和磁珠法的原理及优劣比较。重点讲解紫外分光光度法、荧光定量法(如Qubit)在核酸浓度和纯度评估中的应用,以及评估降解程度的关键指标。 2. PCR及其衍生技术: 对聚合酶链式反应(PCR)的原理进行深入剖析,包括引物设计、退火温度的精确计算、酶的选择。随后,详细介绍并区分关键的衍生技术: 实时荧光定量PCR (qPCR/RT-qPCR): 侧重于基因表达水平的绝对/相对定量,探讨标准曲线的建立、内参基因的选择与校正,以及溶解曲线分析在引物二聚体和特异性判断中的作用。 高保真PCR与长片段PCR: 介绍用于构建克隆文库或进行基因组覆盖测序的策略。 数字PCR (dPCR): 阐述其在超低丰度靶点检测中的优势及操作流程。 3. 基因克隆与重组技术: 这是分子生物学研究的基石。本书详细涵盖了限制性内切酶的酶切策略、DNA的连接(T4 DNA连接酶的应用),以及连接产物的转化与筛选。特别强调了现代无缝克隆技术(如Gibson Assembly, Golden Gate Assembly)的原理和在多片段组装中的应用优势。 4. 载体构建与表达调控: 深入解析常用载体的结构(质粒、腺病毒、慢病毒、噬菌体等),讨论启动子、增强子、标签序列(如His-tag, FLAG-tag)的选择对下游蛋白表达和纯化的影响。提供了真核细胞和原核细胞异源表达系统的系统比较。 三、 基因组学与转录组学的高通量技术 本部分聚焦于后基因组时代驱动生物学研究范式的转变的下一代测序(NGS)技术。 1. NGS文库的制备: 详细介绍测序文库构建的通用流程,包括片段化、接头(Adapter)的连接、以及富集步骤。针对不同应用(WGS, WES, RNA-Seq, ChIP-Seq等),阐述其文库制备的特异性要求。 2. 转录组学(RNA-Seq)数据解析: 侧重于RNA测序数据的生物信息学处理流程。包括原始数据的质量控制(FastQC)、比对(Alignment,如STAR/HISAT2)、基因或转录本的定量(如Salmon/Kallisto),以及差异表达基因(DEG)的筛选和功能富集分析(GO/KEGG)。 3. 宏基因组学与宏转录组学简介: 对研究复杂微生物群落结构和功能的前沿技术进行概述,强调样本采集和DNA/RNA提取过程中的偏差控制。 四、 蛋白质组学与结构生物学基础 分子功能的实现依赖于蛋白质。本章旨在连接核酸研究与蛋白质功能探索。 1. 蛋白质的表达、纯化与鉴定: 详细描述在不同宿主系统中表达目标蛋白的优化策略,包括共表达伴侣分子、调节诱导时机等。重点介绍层析技术(亲和层析、离子交换层析、分子筛层析)的原理与操作,以及纯化过程中保持蛋白活性的注意事项。 2. 蛋白质相互作用研究: 系统介绍检测蛋白质间相互作用的经典方法(如酵母双杂交Y2H、GST-Pull Down)和高通量方法(如AP-MS)。 3. 免疫印迹(Western Blotting)的深度优化: 超越基础操作,深入探讨抗体选择、封闭条件、信号增强技术(如ECL的优化)以及膜剥离再探针的技术,以确保结果的可靠性和可重复性。 五、 基因编辑技术与细胞功能分析 本书的最后部分聚焦于能够直接操控基因组和细胞表型的尖端技术。 1. CRISPR/Cas9系统的机制与应用: 详细解释Cas9核酸酶的作用机制,sgRNA的设计原则,以及如何利用该系统进行基因敲除、敲入、点突变或基因组编辑。重点讨论脱靶效应的评估与降低策略。 2. 基因沉默技术: 比较siRNA、shRNA和ASO(反义寡核苷酸)在干扰基因表达中的效果差异和适用场景。 3. 细胞和组织水平的功能验证: 阐述如何通过流式细胞术(FACS)进行细胞分群、凋亡/增殖检测,以及免疫荧光/免疫组化(IF/IHC)在蛋白质定位与表达分析中的高分辨率应用。 本书的特色与目标读者 本书不仅是一本实验手册,更是一本方法学的指导书。我们通过大量的“案例分析”和“常见问题与解决方案”模块,帮助读者预判实验风险,培养独立解决问题的能力。本书适合分子生物学、生物技术、生物信息学、基础医学、农学及相关生命科学领域的高年级本科生、研究生以及科研工作者作为核心教材或参考手册使用。它致力于帮助读者掌握从设计实验、执行操作到数据解读的完整科研链条,为推动更深层次的生命科学研究提供坚实的技术支撑。

用户评价

评分

作为一名在校大学生,我经常需要参考各种实验指导书籍来完成我的课程项目。这次有幸接触到《植物生物技术实验教程》,我感到非常惊喜。它不仅包含了植物生物技术领域的核心实验方法,还对每种方法的原理、操作流程、注意事项以及结果分析都做了非常详尽的介绍。最重要的是,书中提供的实验方案都具有很高的可操作性,并且考虑到了成本和安全性,这对于实验室条件有限的学生来说,无疑是巨大的福音。我曾经尝试过书中关于植物基因转化的一些初步实验,虽然结果还有待进一步优化,但整个过程都进行得相当顺利,这让我对自己的实验能力有了更强的信心。

评分

说实话,我一直对植物的生长发育机制感到非常着迷,特别是那些能够抵抗恶劣环境、产量更高的品种。这本书在介绍植物生物技术时,并没有局限于枯燥的理论,而是巧妙地将实验操作与实际应用相结合。我了解到,通过基因工程等技术,我们可以赋予植物更强的抗虫、抗病能力,甚至使其在盐碱地、干旱地区也能茁壮成长。书中关于植物组织培养的章节,更是让我大开眼界,原来一片叶子、一小段茎,就能通过精心培养,最终长成一株完整的植株,这简直就是生命的奇迹!这本书让我看到了科学改变农业、造福人类的巨大潜力。

评分

自从我拿到这本书,就迫不及待地翻阅起来。它不仅仅是一本技术手册,更像是一位循循善诱的老师,用生动形象的语言,将复杂的植物生物技术概念化繁为简。我尤其喜欢它在介绍各种实验技术时,所附带的详尽图示和步骤分解,这让我这个初学者也能轻松理解每一个操作的原理和要点。比如,在讲解DNA提取时,作者不仅列出了所需的试剂和仪器,还非常细致地描述了每一步反应的化学过程,以及可能遇到的问题和解决方法。这种深入浅出的讲解方式,极大地激发了我学习的兴趣,让我觉得掌握这些高深的实验技术并非遥不可及。

评分

作为一名对植物科学领域充满好奇的爱好者,我一直渴望能有一本既能满足我理论学习需求,又能指导我动手实践的教材。在翻阅了市面上众多相关书籍后,我被一本名为《植物生物技术实验教程》的书深深吸引。虽然它以“实验教程”为名,但我更看重它在基础理论构建和前沿技术探索方面的价值。这本书的封面设计就充满了科技感,绿色与蓝色的碰撞,象征着生命的活力与科学的严谨,让人一眼就能感受到其内容的专业性。我期待它能够引领我深入了解植物的奥秘,从基因层面的改造到组织培养的奇妙,再到新品种的培育,每一个环节都能得到清晰的阐释。

评分

我一直认为,真正的学习在于实践。而《植物生物技术实验教程》恰恰满足了这一点。它不仅仅是理论知识的堆砌,更是一份详尽的实践指南。从最基础的试剂配制、仪器操作,到更复杂的基因克隆、蛋白表达,这本书都提供了清晰、易懂的指导。我特别欣赏书中对实验过程中可能出现的各种问题的预判和解决方案的提供,这极大地减少了我们摸索的时间,让我们能更专注于实验本身。通过这本书,我不仅掌握了许多实用的实验技能,更重要的是,它培养了我独立思考和解决问题的能力。这本书是我进行植物生物技术学习的得力助手。

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