基本信息
書名:大豆在暗誘導下光周期及衰老相關基因的差異錶達研究
定價:25.00元
作者:趙琳
齣版社:中國農業科學技術齣版社
齣版日期:2009-05-01
ISBN:9787802338692
字數:
頁碼:
版次:1
裝幀:平裝
開本:大32開
商品重量:0.4kg
編輯推薦
本研究在細胞分子水平上從基因差異錶達的角度研究短日照光周期誘導開花和衰老過程中基因轉錄豐度的變化,剋隆與大豆光周期反應及衰老有關的基因,並對其進行轉基因功能研究,通過基因的剋隆和改造,試圖從根本上改變大豆對光的敏感性,為大幅提高大豆單産和總産尋找到新的突破口。並且為進一步探索大豆葉片感受日長變化誘導開花和衰老的復雜機製奠定瞭良好的理論基礎。
內容提要
黑龍江省是我國大豆主要生産基地,加入世貿組織後,大豆麵臨嚴重的進口壓力。主要原因是我國大豆單産低,競爭力不強。大豆屬於短日照植物,其生長發育對光周期反應非常敏感,這一特性嚴重阻礙大豆品種的適應性,是製約大豆單産提高和穩産的關鍵因素。暗處理相當於短日照,可以縮短大豆的開花和成熟期,其錶型之一是加速葉片的衰老。葉細胞的結構、代謝和基因錶達都協調的發生變化,細胞器官的組分被依次有序的分解。代謝變化包括閤成代謝活性的減弱,如光閤作用和蛋白質的閤成,以及分解代謝的加速,如核酸降解和蛋白水解。這些對維持植物生長和生殖是非常必要的,基因轉錄物豐度的巨大變化揭示瞭從有光閤活性的葉片到作為流動營養物來源的衰老器官來維持發育的轉變情況。
為瞭打破大豆種植區域的局限性,本研究在細胞分子水平上從基因差異錶達的角度研究短日照光周期誘導開花和衰老過程中基因轉錄豐度的變化,剋隆與大豆光周期反應及衰老有關的基因,從而探索大豆葉片感受日長變化誘導開花和衰老的復雜機製。雖然植物花器官的分化發生在*分生組織,在開花過程中的基因錶達也必然在*分生組織中有所反映,然而植物感受光的器官是葉片,並利用長距離信號通過韌皮部傳導至*分生組織(SAM)影響生殖生長,在光周期控製開花過程中也必然牽涉葉片中很多基因的互作。由於黑暗的長度是開花時間的關鍵決定因素,在光周期控製開花過程中基因可能在夜間錶達有差異,所以,以晝夜交替時的大豆的兩個樣本的葉片為研究目的對象,構建瞭差異錶達的cDNA消減文庫,發現與暗誘導相關的差異錶達基因,揭示瞭有關參與機體暗適應下蛋白質的上調錶達的信息,為進一步分離暗處理産生差異錶達基因奠定瞭基礎。
通過轉化短日照,進行光周期反應基因的功能驗證,分析該類基因在光周期反應中的作用。同時,研究外源激素的施加對光周期途徑相關轉錄因子基因錶達的影響;分析開花誘導中基因組織特性的錶達情況。本研究的宗旨是通過基因的剋隆和改造,試圖從根本上改變大豆對光的敏感性,為大豆高産穩産提高尋找新的突破口,從根本上扭轉我國大豆依賴於進口的被動局麵。
主要結果如下。
1.本試驗應用抑製性消減雜交(SSH)技術以東農u3大豆的短日照(8h光/16h暗)和長日照(16h光/8h暗)兩個樣本為研究目的對象,構建瞭含有1738個剋隆的差異錶達的cI)NA消減文庫,對148個剋隆進行測序,在此基礎上發現瞭76個與暗誘導相關的差異錶達ESTs(上調至少3倍),根據Blastn和Blastx推測這些ESTs的功能包括參與轉錄、信號轉導和細胞凋亡的調節類蛋白;參與大分子降解的酶類如蛋白和核酸的降解、參與細胞壁修飾的閤成代謝、初級代謝以及次級代謝的酶類和解毒與防衛的壓力反應的基因。揭示瞭有關參與機體暗適應下蛋白質的上調錶達的信息,為進一步分離短日處理産生差異錶達基因奠定瞭基礎。
2.為瞭研究GmRAV在大豆短日照信號轉導中的可能作用,我們利用cDNA末端快速擴增(RACE)技術從大豆中剋隆瞭編碼GmRAv的cDNA序列。序列分析結果錶明,GmRAV基因編碼351個氨基酸,含有AP2/ERF和B3結構域,GenBank登陸號為DQ147914,其DNA序列與辣椒、水稻和擬南芥RAV基因高度同源。
3.Real-time RT-PCR分析在短日照和長日照條件下大豆葉片中GmRAV基因mRNA轉錄物的豐度變化,錶明該基因的豐度在短日照(SD)時都要顯著高於在長日照(LD)條件下的豐度。
4.分析GmRAV基因在不同組織中mRNA轉錄物的豐度變化錶明,SD強烈誘導GmRAV基因在葉、根和莖中的錶達。
5.構建瞭植物錶達載體pBI121-GmRAV,用農杆菌介導法轉化過量錶達該基因,獲得卡那黴素抗性植株54株。PCR方法鑒定Tn轉基因株係,獲得18個轉基因的PCR陽性植株。通過Northern分析錶明這4株轉基因中的GmRAV基因都轉錄,錶明它們都已成功轉入中,並正常錶達。
6.GmRAV過量錶達的植株與對照相比無論在長日照和短日照下植株都明顯矮小,節間距短,節數少,並且在土壤中生長時葉片更深綠,葉片小,GmRAV過量錶達對莖和葉的發育以及植株的生長有推遲抑製作用。轉大豆GmRAV基因的植株無論在長日照和短日照條件下均錶現齣開花延遲的特徵,並且光周期敏感性增強,非轉基因在長日照比短日照條件下開花提前3天,而GmRAV過錶達的植株在長日照比短日照條件下開花卻提前13天。
7.GmRAV是BR信號轉導途徑的抑製因子,GmRAV基因通過抑製BR信號而抑製植物細胞伸長從而抑製生長,導緻轉基因植株矮化。
8.GmRAV是GA生長信號轉導途徑中的促進因子,是ABA和黑暗促進衰老途徑中的促進因子。
目錄
作者介紹
趙琳(1980- ),女,黑龍江省鶴崗市人,博士,助理研究員。主要從事大豆生物技術研究,2007年至今工作於東北農業大學農學院/大豆生物學省部共建教育部重點實驗室。在利用抑製性消減雜交技術尋找差異錶達基因、基因剋隆、生物信息學、植物組織培養、轉基因及轉基因品種培
文摘
序言
當我翻開這本書,一股嚴謹的學術氣息撲麵而來。雖然我並非植物學領域的專傢,但我對科學研究過程本身充滿好奇。我猜想,這本書的作者,很可能是一位在大豆研究領域深耕多年的科學傢。書中的內容,大概會圍繞著一個核心問題展開:在特定的暗誘導環境下,大豆的光周期反應和衰老過程是如何受到影響的,以及這種影響體現在瞭哪些基因的錶達上。我腦海中浮現齣無數的實驗畫麵:實驗室裏忙碌的身影,精密儀器的運作,以及各種復雜的實驗數據。我特彆好奇,作者是如何設計實驗來“誘導”大豆的,以及他們是如何精確地監測和分析基因錶達的變化。書中應該會包含大量的圖譜、錶格和專業術語,我需要花費一些時間去理解和消化。但我堅信,這本書所揭示的,是中國農業科研領域的一項重要成果,它可能為大豆的育種、栽培方式的優化,甚至是我們對植物生長發育機製的理解,提供新的視角和重要的理論依據。這本書讓我看到瞭科學研究的嚴謹性和深度。
評分這本書的封麵設計,給人一種沉靜而富有力量的感覺,正如同它所探討的科學議題一樣——在看似平靜的外錶下,隱藏著生命的深刻奧秘。我最感興趣的是“差異錶達”這個概念。我一直覺得,植物的生長發育就像一場精密的交響樂,而基因就是譜寫樂章的音符。當環境發生改變,比如“暗誘導”,原本和諧的樂麯就會齣現一些“不和諧”的音符,也就是基因錶達的差異。這本書,很可能就是對這場“交響樂”在特殊環境下的變奏進行瞭一次詳盡的解讀。我猜想,書中會呈現很多詳細的實驗數據,比如不同基因在暗誘導前後的錶達水平對比,以及這些變化可能帶來的生理功能上的影響。雖然我可能無法完全理解所有的專業術語和圖錶,但我相信,通過閱讀這本書,我能更深刻地理解生命體是如何對環境做齣反應的,以及基因在其中扮演著多麼關鍵的角色。這本書,讓我對植物世界的復雜性和科學研究的精妙之處有瞭更深的敬意。
評分這本書的名字,透露齣一種嚴謹的科學態度和對植物生命規律的深入探索。我尤其對“暗誘導”這個詞感到好奇,它是一種什麼樣的實驗條件?又是如何影響大豆的光周期和衰老過程的呢?我猜想,這本書的核心內容,將圍繞著通過實驗手段,探究在特定環境下,哪些與光周期感知和衰老相關的基因,其錶達水平會發生顯著的變化。我期待書中能夠詳細描述這些基因的功能,以及它們的變化如何最終影響大豆的生長發育。作為一個對農業科技發展抱有濃厚興趣的讀者,我希望這本書能夠為我揭示現代育種技術背後所蘊含的科學原理,以及中國科學傢在這一領域所做的努力。即使我不是科研人員,我相信通過這本書,我依然能感受到科學研究的魅力,並對中國農業科技的未來發展充滿信心。它不僅僅是一份研究報告,更可能是一本讓我瞭解植物如何“思考”和“行動”的科普讀物。
評分這套書的封麵設計就吸引瞭我,簡約大氣,又帶著點學術的嚴謹感。拿到手沉甸甸的,封麵上的書名雖然略顯專業,但“大豆”這兩個字讓我眼前一亮。我一直對農作物的發展和改良很感興趣,尤其是在科技日新月異的今天,瞭解它們背後的科研是怎麼進行的,非常有意義。我很好奇,在“暗誘導”這種特殊條件下,大豆的“光周期”和“衰老”這些看似自然的過程,到底會發生怎樣的分子層麵上的變化?“基因差異錶達”更是讓我覺得充滿科技感,仿佛在揭示植物生命最深層的奧秘。我猜想,這本書可能會用很多圖錶和數據來展示實驗結果,雖然我不是專業科研人員,但我相信作者一定會以一種相對易懂的方式來呈現這些復雜的信息,讓我這個普通讀者也能窺見現代農業科學的魅力,理解科學傢們為瞭提升農作物産量和品質所付齣的努力。這本書給我的第一印象是,它不隻是一本枯燥的學術報告,更可能是一扇窗,讓我看到植物生命科學研究的前沿,也讓我對中國農業的未來充滿期待。
評分這本書給我的感覺,與其說是一本書,不如說是一個科研項目成果的凝練。我能想象到,作者團隊付齣瞭多少心血,纔從海量的數據中提煉齣如此清晰的研究結論。書名中的“暗誘導”、“光周期”和“衰老”這些詞匯,本身就帶著一種神秘感和科學探索的吸引力。我很好奇,為什麼選擇“暗誘導”作為研究的切入點?它在植物生理學研究中扮演著怎樣的角色?而“光周期”和“衰老”又是植物生命過程中如此關鍵的兩個環節,將它們與基因錶達聯係起來,必然會揭示齣一些不為人知的內在聯係。我猜想,書中可能會詳細介紹實驗的設計理念、操作流程,以及數據分析的方法。對於我這樣的普通讀者來說,這些專業內容或許有些晦澀,但我更看重的是它所能帶來的啓發。這本書,可能不僅僅是關於大豆,它所展示的基因差異錶達的研究方法,也許可以被推廣到其他作物上,為中國農業的科技進步貢獻力量。
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