核酸提取與純化實驗指南

核酸提取與純化實驗指南 pdf epub mobi txt 電子書 下載 2025

馬文麗編 著
圖書標籤:
  • 核酸提取
  • 核酸純化
  • 分子生物學
  • 生物化學
  • 實驗指南
  • 實驗室技術
  • DNA提取
  • RNA提取
  • 基因組學
  • 生物技術
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店鋪: 文軒網旗艦店
齣版社: 化學工業齣版社
ISBN:9787122147516
商品編碼:1112036826
齣版時間:2012-10-01

具體描述

作  者:馬文麗 編 著作 定  價:49 齣 版 社:化學工業齣版社 齣版日期:2012年10月01日 頁  數:153 裝  幀:平裝 ISBN:9787122147516  概述1
 核酸提取與純化的曆史1
第二節 核酸提取與純化的現狀7
一、當前核酸提取與純化的應用領域7
二、當前核酸提取與純化的常見方法10
三、核酸提取與純化存在的問題和解決方法19
參考文獻22

第二章 動物核酸的提取與純化24
 概述24
第二節 動物基因組DNA的提取與純化25
一、動物組織材料的預處理25
二、DNA提取的預處理26
三、DNA提取的方法29
四、DNA的純化方法34
五、DNA的檢測和鑒定37
第三節 動物RNA的提取與純化39
一、動物總RNA的提取與純化40
二、動物mRNA的提取與純化42
三、動物microRNA的提取與純化43
部分目錄

內容簡介

核酸是遺傳信息的攜帶者,是基因錶達的物質基礎,是分子生物學研究的主要對象。無論是進行核酸的結構還是功能研究,首先都需要對核酸進行提取和純化。 《核酸提取與純化實驗指南》(作者馬文麗)根據近幾年核酸提取與純化技術的發展現狀組織編寫,內容涵蓋動物、植物、細菌、病毒和其他核酸提取與純化技術。全書內容新、技術全、操作性強,具有較好的可讀性、實用性。 《核酸提取與純化實驗指南》可供遺傳學、分子生物學、醫學基礎等專業的研究生、高年級本科生以及相關研究人員閱讀參考。
深入探索:現代分子生物學技術與應用(精裝典藏版) 本書聚焦於分子生物學領域中,那些與核酸提取和純化技術緊密相關,但又涵蓋更廣闊範圍的核心理論、前沿方法、應用拓展及質量控製體係的構建。它旨在為實驗室研究人員、高校師生以及生物技術産業專業人士提供一套全麵、深入且高度實用的技術參考與知識體係。 --- 第一部分:分子生物學基礎原理與研究範式革新 本部分深入迴顧瞭分子生物學領域自發現以來所經曆的幾次重大範式轉變,重點闡述瞭支撐現代生物技術發展的核心概念。 第一章:生命信息的載體與動態平衡 本章超越瞭對DNA和RNA結構的基本描述,著重探討瞭染色質的高級結構、基因組的組織方式(從原核到真核)以及錶觀遺傳修飾(如DNA甲基化、組蛋白修飾)對基因錶達的精細調控機製。內容涵蓋瞭染色質免疫沉澱技術(ChIP)的原理基礎,以及如何通過理解這些結構動態,來設計更具針對性的下遊實驗。特彆分析瞭非編碼RNA(ncRNA)在基因沉默與激活中的關鍵作用及其在疾病發生中的潛在生物標誌物價值。 第二章:蛋白質組學的前沿進展與樣本製備 雖然本書的主題側重於核酸,但準確的實驗結果離不開對樣本整體生物學狀態的理解。本章詳細介紹瞭現代蛋白質組學(Proteomics)的最新技術進展,包括高分辨率質譜分析(LC-MS/MS)的優化策略。核心內容在於,如何根據研究目標(如細胞凋亡、信號通路激活),選擇閤適的裂解緩衝液、蛋白酶抑製劑組閤,以及如何進行初步的蛋白質分離(如親和層析、離子交換),為後續的定量蛋白質組學研究奠定堅實基礎。我們探討瞭從復雜生物體液(血漿、尿液)中高效富集低豐度蛋白的技術路綫。 第三章:細胞培養與組織工程的質量控製 本章詳細闡述瞭對實驗係統本身進行嚴格控製的重要性。對於動物細胞培養,內容涵蓋瞭無菌操作的深度解析、培養基的優化配方(包括無血清培養基的挑戰)、支原體檢測與根除策略。在組織工程領域,本章探討瞭生物支架材料的選擇標準、細胞與支架的相互作用(如細胞粘附、遷移)的體外模型建立,以及如何利用生物反應器來模擬體內微環境,確保實驗結果的可重復性與生理相關性。 --- 第二部分:高級分離、鑒定與成像技術 本部分聚焦於超越基礎核酸提取方法的復雜分離技術,以及用於驗證和定位生物大分子的先進顯微技術。 第四章:電泳分離技術的精細化調控 本章係統梳理瞭凝膠電泳(瓊脂糖和聚丙烯酰胺)在分子診斷和研究中的應用。詳細討論瞭如何通過調整凝膠濃度、緩衝液的pH值和電壓梯度,實現對特定大小DNA片段或蛋白質亞型的最佳分離。內容特彆包括:變性梯度凝膠電泳(DGGE)用於檢測點突變、高分辨率等電聚焦(IEF)在蛋白質分析中的應用,以及毛細管電泳(CE)在快速片段分析中的優勢與局限性。 第五章:免疫雜交技術(Southern/Northern/Western)的優化與自動化 本章深入探討瞭基於核酸和蛋白質檢測的雜交技術。針對Southern/Northern Blot,不僅介紹瞭膜的選擇(尼龍、硝酸縴維素)和探針的製備(放射性、地高辛標記、熒光標記),還重點分析瞭如何優化退火溫度和洗膜條件,以提高信噪比和特異性。在Western Blot方麵,詳細對比瞭化學發光(ECL)和熒光檢測法的優劣,並介紹瞭基於高通量係統的自動化印跡設備的操作流程與維護要點。 第六章:活細胞與組織成像技術:從熒光到超分辨 本章全麵介紹分子生物學研究中最強大的可視化工具。內容從傳統的熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡(Confocal Microscopy)的深度掃描原理講起,延伸至活細胞成像技術(如FRET/BRET)在監測分子間相互作用中的應用。高階部分涵蓋瞭突破衍射極限的超分辨顯微技術(STED, STORM/PALM)的成像原理、數據重建算法,以及如何利用這些技術對細胞內的核酸或蛋白質進行納米尺度的動態追蹤。 --- 第三部分:分子診斷與應用拓展 本部分探討瞭基礎技術如何轉化為臨床或工業應用,尤其關注於高靈敏度檢測和大數據整閤。 第七章:聚閤酶鏈式反應(PCR)的進階應用與故障排除 本章是分子診斷的基石。除瞭標準的熱循環PCR,內容重點深入到定量PCR(qPCR/RT-qPCR)的動力學分析、溶解麯綫分析和內參基因的選擇標準。對於復雜樣本(如環境水樣、法醫樣本),本章提供瞭多種PCR抑製劑的去除策略,並詳細介紹瞭數字PCR(dPCR)的工作原理、絕對定量能力及其在微小殘留病竈(MRD)檢測中的突破性進展。 第八章:高通量測序(NGS)的數據預處理與生物信息學流程 本章關注於從原始測序數據(FASTQ文件)到有意義生物學結論的轉化過程。內容詳細分解瞭: 1. 數據質量控製(QC): 使用FastQC等工具評估序列質量、接頭汙染和GC含量分布。 2. 比對與組裝: 針對全基因組測序(WGS)、RNA測序(RNA-Seq)和ChIP-Seq,選擇閤適的參考基因組和比對算法(如BWA, HISAT2)。 3. 變異識彆與注釋: 介紹SNPs, Indels的召迴率優化,並利用Ensembl/UCSC等數據庫進行功能性注釋。 4. 差異錶達分析: RNA-Seq數據中,使用DESeq2或edgeR進行標準化、分散度估計和統計顯著性判斷。 第九章:分子生物學研究的標準化、驗證與閤規性 本章旨在提升研究的科學嚴謹性。內容涵蓋瞭實驗設計的統計學基礎(如樣本量估算、對照組設置的科學性)。特彆關注瞭如何對關鍵實驗步驟(如引物效率、抗體特異性)進行嚴格的係統驗證。同時,本書也探討瞭生物安全(Biosafety Level, BSL)的等級劃分、生物樣本的長期存儲規範(-80°C, 液氮)及其對核酸和蛋白質完整性的影響,確保研究成果符閤國際學術規範和法規要求。 --- 本書特色: 深度與廣度的完美結閤: 覆蓋瞭從分子機製到高通量數據分析的全流程技術鏈條。 麵嚮實踐的優化策略: 提供瞭大量針對常見實驗難題的“疑難雜癥排查指南”。 前沿技術聚焦: 詳細解析瞭單細胞技術(scRNA-seq)和空間轉錄組學(Spatial Transcriptomics)的樣本製備與數據解析挑戰。 目標讀者: 分子生物學、生物化學、免疫學、醫學檢驗等相關領域的研究人員、博士後、研究生及高級技術人員。

用戶評價

評分

我是一位實驗室的老前輩瞭,見過的實驗手冊不計其數。這本書給我帶來的驚喜,在於它不僅僅是羅列實驗步驟,更深層次地探討瞭每一步操作背後的科學原理。它不僅僅告訴我們“怎麼做”,更重要的是“為什麼這麼做”。我翻閱瞭其中的幾頁,發現它對各種化學試劑的作用機理、物理過程(如離心、加熱、冷卻)對核酸的影響,都有著深入的剖析。這對於培養學生的實驗思維,提高他們解決問題的能力,有著不可估量的價值。我尤其看重書中關於“實驗優化”和“故障排除”的內容,因為在實際的科研工作中,實驗很少能一次成功,能夠掌握一些通用的優化策略和快速定位問題的方法,是提高效率的關鍵。這本書的排版也十分用心,圖文並茂,細節之處的處理也非常到位,讓人感覺作者是在用心做這本書,而不是簡單地拼湊。這本手冊,我感覺不僅僅是一本工具書,更是一本能夠激發思考、提升能力的良師益友。

評分

作為一名即將進入生物醫藥行業工作的學生,我對實驗技能的掌握有著極高的要求。偶然間看到瞭這本書,雖然我還沒有來得及深入研讀,但僅僅從書本的厚度和目錄的豐富程度來看,就能感受到其內容的深度和廣度。我注意到書中不僅涵蓋瞭經典的核酸提取和純化方法,還可能包含瞭一些最新的技術進展,這對於我保持知識的更新非常重要。我尤其對其中關於“核酸純化質量評估”的章節充滿期待,因為我知道,提取齣來的核酸質量直接影響到後續的實驗結果,所以能夠學會如何有效地評估和提高核酸純度,對我來說是至關重要的技能。此外,這本書的語言風格也給我留下瞭深刻的印象,它沒有使用過於學術化的語言,而是力求清晰易懂,即使是復雜的概念,也能用相對簡明的語言來解釋。這使得我可以更專注於理解實驗本身,而不是被生澀的文字所睏擾。

評分

在我看來,一本優秀的實驗指南,不僅僅在於理論知識的傳授,更在於它能否真正幫助讀者在實踐中解決問題。我翻閱瞭本書的幾頁,發現它對實驗步驟的描述非常詳盡,幾乎可以說是手把手教學。每一個操作步驟都配有清晰的圖示,甚至是一些細節的操作技巧,比如如何準確地移取液體、如何控製離心速度和時間等,都講解得非常到位。我特彆欣賞它在介紹試劑和儀器時,會給齣一些選購和使用的建議,這對於我們這些資源有限的研究者來說,非常有價值。而且,我注意到書中提到瞭不同應用場景下的核酸提取和純化差異,例如從血液、組織、細胞、植物、微生物等不同樣本中提取核酸,雖然我還沒有深入研究,但我預感它在這方麵會提供非常實用的指導,幫助我選擇最閤適的實驗方案。總的來說,這本書給我的感覺是“專業且實用”,它能夠有效地 bridging the gap between theory and practice。

評分

這本書的封麵設計著實吸引人,簡潔大方,以一種非常清晰的醫學藍作為主色調,搭配上分子結構的抽象圖案,一下子就勾勒齣瞭本書的主題——生命科學研究的核心技術。拿到手上,紙張的觸感也相當不錯,有一種厚實而光滑的質感,翻閱起來頁腳聲很悅耳,這對於一本經常需要查閱的實驗指南來說,無疑是加分項。我特彆喜歡它內頁的排版,字體大小適中,行間距也恰到好處,讀起來不會感到擁擠或疲憊。即使是像我這樣初涉分子生物學領域的新手,也能迅速找到自己需要的信息,不會被繁雜的文字信息淹沒。而且,書中對一些關鍵概念的解釋,都非常到位,沒有過多晦澀的術語,而是用一種相對通俗易懂的方式進行闡述,這對於我理解實驗的原理和目的至關重要。我感覺這本書就像一位耐心細緻的老師,一步步地引導我進入核酸提取與純化的奇妙世界,讓我覺得學習過程不再是枯燥的背誦,而是充滿探索的樂趣。

評分

我一直對生物技術領域懷有濃厚的興趣,特彆是那些能夠直接觀察生命分子活動的實驗技術。這本書雖然我還沒有深入閱讀,但從它目錄的章節劃分來看,就已經讓我感受到瞭其內容的全麵性和邏輯性。它似乎從最基礎的原理講起,然後逐步深入到各種不同的樣本類型和相應的提取方法,再到質量控製和下遊應用。我尤其關注的是它關於不同核酸(DNA、RNA)提取方法的區分和側重點,因為我明白它們在生物學研究中扮演著不同的角色,需要不同的處理方式。而且,我看到目錄中提到瞭“常見問題及解決方案”這樣的章節,這對於我這樣在實驗中常常會遇到意料之外情況的新手來說,簡直是救星。我迫切希望它能提供一些實用的技巧和建議,幫助我避免走彎路,減少實驗失敗的概率。總而言之,這本書給我的第一印象是嚴謹、係統,並且非常貼閤實際實驗操作的需求,預感它將成為我實驗室中的重要參考書。

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