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马文丽编 著

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• 核酸提取
• 核酸纯化
• 分子生物学
• 生物化学
• 实验指南
• 实验室技术
• DNA提取
• RNA提取
• 基因组学
• 生物技术

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出版社： 化学工业出版社

ISBN：9787122147516

商品编码：1112036826

出版时间：2012-10-01

作  者:马文丽 编 著作 定  价:49 出 版 社:化学工业出版社 出版日期:2012年10月01日 页  数:153 装  帧:平装 ISBN:9787122147516 ● 概述1
● 核酸提取与纯化的历史1
●第二节 核酸提取与纯化的现状7
●一、当前核酸提取与纯化的应用领域7
●二、当前核酸提取与纯化的常见方法10
●三、核酸提取与纯化存在的问题和解决方法19
●参考文献22
●
●第二章 动物核酸的提取与纯化24
● 概述24
●第二节 动物基因组DNA的提取与纯化25
●一、动物组织材料的预处理25
●二、DNA提取的预处理26
●三、DNA提取的方法29
●四、DNA的纯化方法34
●五、DNA的检测和鉴定37
●第三节 动物RNA的提取与纯化39
●一、动物总RNA的提取与纯化40
●二、动物mRNA的提取与纯化42
●三、动物microRNA的提取与纯化43
●部分目录

内容简介

核酸是遗传信息的携带者，是基因表达的物质基础，是分子生物学研究的主要对象。无论是进行核酸的结构还是功能研究，首先都需要对核酸进行提取和纯化。 《核酸提取与纯化实验指南》(作者马文丽)根据近几年核酸提取与纯化技术的发展现状组织编写，内容涵盖动物、植物、细菌、病毒和其他核酸提取与纯化技术。全书内容新、技术全、操作性强，具有较好的可读性、实用性。 《核酸提取与纯化实验指南》可供遗传学、分子生物学、医学基础等专业的研究生、高年级本科生以及相关研究人员阅读参考。

深入探索：现代分子生物学技术与应用（精装典藏版） 本书聚焦于分子生物学领域中，那些与核酸提取和纯化技术紧密相关，但又涵盖更广阔范围的核心理论、前沿方法、应用拓展及质量控制体系的构建。它旨在为实验室研究人员、高校师生以及生物技术产业专业人士提供一套全面、深入且高度实用的技术参考与知识体系。 --- 第一部分：分子生物学基础原理与研究范式革新 本部分深入回顾了分子生物学领域自发现以来所经历的几次重大范式转变，重点阐述了支撑现代生物技术发展的核心概念。 第一章：生命信息的载体与动态平衡 本章超越了对DNA和RNA结构的基本描述，着重探讨了染色质的高级结构、基因组的组织方式（从原核到真核）以及表观遗传修饰（如DNA甲基化、组蛋白修饰）对基因表达的精细调控机制。内容涵盖了染色质免疫沉淀技术（ChIP）的原理基础，以及如何通过理解这些结构动态，来设计更具针对性的下游实验。特别分析了非编码RNA（ncRNA）在基因沉默与激活中的关键作用及其在疾病发生中的潜在生物标志物价值。 第二章：蛋白质组学的前沿进展与样本制备 虽然本书的主题侧重于核酸，但准确的实验结果离不开对样本整体生物学状态的理解。本章详细介绍了现代蛋白质组学（Proteomics）的最新技术进展，包括高分辨率质谱分析（LC-MS/MS）的优化策略。核心内容在于，如何根据研究目标（如细胞凋亡、信号通路激活），选择合适的裂解缓冲液、蛋白酶抑制剂组合，以及如何进行初步的蛋白质分离（如亲和层析、离子交换），为后续的定量蛋白质组学研究奠定坚实基础。我们探讨了从复杂生物体液（血浆、尿液）中高效富集低丰度蛋白的技术路线。 第三章：细胞培养与组织工程的质量控制 本章详细阐述了对实验系统本身进行严格控制的重要性。对于动物细胞培养，内容涵盖了无菌操作的深度解析、培养基的优化配方（包括无血清培养基的挑战）、支原体检测与根除策略。在组织工程领域，本章探讨了生物支架材料的选择标准、细胞与支架的相互作用（如细胞粘附、迁移）的体外模型建立，以及如何利用生物反应器来模拟体内微环境，确保实验结果的可重复性与生理相关性。 --- 第二部分：高级分离、鉴定与成像技术 本部分聚焦于超越基础核酸提取方法的复杂分离技术，以及用于验证和定位生物大分子的先进显微技术。 第四章：电泳分离技术的精细化调控 本章系统梳理了凝胶电泳（琼脂糖和聚丙烯酰胺）在分子诊断和研究中的应用。详细讨论了如何通过调整凝胶浓度、缓冲液的pH值和电压梯度，实现对特定大小DNA片段或蛋白质亚型的最佳分离。内容特别包括：变性梯度凝胶电泳（DGGE）用于检测点突变、高分辨率等电聚焦（IEF）在蛋白质分析中的应用，以及毛细管电泳（CE）在快速片段分析中的优势与局限性。 第五章：免疫杂交技术（Southern/Northern/Western）的优化与自动化 本章深入探讨了基于核酸和蛋白质检测的杂交技术。针对Southern/Northern Blot，不仅介绍了膜的选择（尼龙、硝酸纤维素）和探针的制备（放射性、地高辛标记、荧光标记），还重点分析了如何优化退火温度和洗膜条件，以提高信噪比和特异性。在Western Blot方面，详细对比了化学发光（ECL）和荧光检测法的优劣，并介绍了基于高通量系统的自动化印迹设备的操作流程与维护要点。 第六章：活细胞与组织成像技术：从荧光到超分辨 本章全面介绍分子生物学研究中最强大的可视化工具。内容从传统的荧光显微镜、共聚焦显微镜（Confocal Microscopy）的深度扫描原理讲起，延伸至活细胞成像技术（如FRET/BRET）在监测分子间相互作用中的应用。高阶部分涵盖了突破衍射极限的超分辨显微技术（STED, STORM/PALM）的成像原理、数据重建算法，以及如何利用这些技术对细胞内的核酸或蛋白质进行纳米尺度的动态追踪。 --- 第三部分：分子诊断与应用拓展 本部分探讨了基础技术如何转化为临床或工业应用，尤其关注于高灵敏度检测和大数据整合。 第七章：聚合酶链式反应（PCR）的进阶应用与故障排除 本章是分子诊断的基石。除了标准的热循环PCR，内容重点深入到定量PCR（qPCR/RT-qPCR）的动力学分析、溶解曲线分析和内参基因的选择标准。对于复杂样本（如环境水样、法医样本），本章提供了多种PCR抑制剂的去除策略，并详细介绍了数字PCR（dPCR）的工作原理、绝对定量能力及其在微小残留病灶（MRD）检测中的突破性进展。 第八章：高通量测序（NGS）的数据预处理与生物信息学流程 本章关注于从原始测序数据（FASTQ文件）到有意义生物学结论的转化过程。内容详细分解了： 1. 数据质量控制（QC）： 使用FastQC等工具评估序列质量、接头污染和GC含量分布。 2. 比对与组装： 针对全基因组测序（WGS）、RNA测序（RNA-Seq）和ChIP-Seq，选择合适的参考基因组和比对算法（如BWA, HISAT2）。 3. 变异识别与注释： 介绍SNPs, Indels的召回率优化，并利用Ensembl/UCSC等数据库进行功能性注释。 4. 差异表达分析： RNA-Seq数据中，使用DESeq2或edgeR进行标准化、分散度估计和统计显著性判断。 第九章：分子生物学研究的标准化、验证与合规性 本章旨在提升研究的科学严谨性。内容涵盖了实验设计的统计学基础（如样本量估算、对照组设置的科学性）。特别关注了如何对关键实验步骤（如引物效率、抗体特异性）进行严格的系统验证。同时，本书也探讨了生物安全（Biosafety Level, BSL）的等级划分、生物样本的长期存储规范（-80°C, 液氮）及其对核酸和蛋白质完整性的影响，确保研究成果符合国际学术规范和法规要求。 --- 本书特色： 深度与广度的完美结合： 覆盖了从分子机制到高通量数据分析的全流程技术链条。 面向实践的优化策略： 提供了大量针对常见实验难题的“疑难杂症排查指南”。 前沿技术聚焦： 详细解析了单细胞技术（scRNA-seq）和空间转录组学（Spatial Transcriptomics）的样本制备与数据解析挑战。 目标读者： 分子生物学、生物化学、免疫学、医学检验等相关领域的研究人员、博士后、研究生及高级技术人员。

评分☆☆☆☆☆

作为一名即将进入生物医药行业工作的学生，我对实验技能的掌握有着极高的要求。偶然间看到了这本书，虽然我还没有来得及深入研读，但仅仅从书本的厚度和目录的丰富程度来看，就能感受到其内容的深度和广度。我注意到书中不仅涵盖了经典的核酸提取和纯化方法，还可能包含了一些最新的技术进展，这对于我保持知识的更新非常重要。我尤其对其中关于“核酸纯化质量评估”的章节充满期待，因为我知道，提取出来的核酸质量直接影响到后续的实验结果，所以能够学会如何有效地评估和提高核酸纯度，对我来说是至关重要的技能。此外，这本书的语言风格也给我留下了深刻的印象，它没有使用过于学术化的语言，而是力求清晰易懂，即使是复杂的概念，也能用相对简明的语言来解释。这使得我可以更专注于理解实验本身，而不是被生涩的文字所困扰。

评分☆☆☆☆☆

这本书的封面设计着实吸引人，简洁大方，以一种非常清晰的医学蓝作为主色调，搭配上分子结构的抽象图案，一下子就勾勒出了本书的主题——生命科学研究的核心技术。拿到手上，纸张的触感也相当不错，有一种厚实而光滑的质感，翻阅起来页脚声很悦耳，这对于一本经常需要查阅的实验指南来说，无疑是加分项。我特别喜欢它内页的排版，字体大小适中，行间距也恰到好处，读起来不会感到拥挤或疲惫。即使是像我这样初涉分子生物学领域的新手，也能迅速找到自己需要的信息，不会被繁杂的文字信息淹没。而且，书中对一些关键概念的解释，都非常到位，没有过多晦涩的术语，而是用一种相对通俗易懂的方式进行阐述，这对于我理解实验的原理和目的至关重要。我感觉这本书就像一位耐心细致的老师，一步步地引导我进入核酸提取与纯化的奇妙世界，让我觉得学习过程不再是枯燥的背诵，而是充满探索的乐趣。

评分☆☆☆☆☆

在我看来，一本优秀的实验指南，不仅仅在于理论知识的传授，更在于它能否真正帮助读者在实践中解决问题。我翻阅了本书的几页，发现它对实验步骤的描述非常详尽，几乎可以说是手把手教学。每一个操作步骤都配有清晰的图示，甚至是一些细节的操作技巧，比如如何准确地移取液体、如何控制离心速度和时间等，都讲解得非常到位。我特别欣赏它在介绍试剂和仪器时，会给出一些选购和使用的建议，这对于我们这些资源有限的研究者来说，非常有价值。而且，我注意到书中提到了不同应用场景下的核酸提取和纯化差异，例如从血液、组织、细胞、植物、微生物等不同样本中提取核酸，虽然我还没有深入研究，但我预感它在这方面会提供非常实用的指导，帮助我选择最合适的实验方案。总的来说，这本书给我的感觉是“专业且实用”，它能够有效地 bridging the gap between theory and practice。

评分☆☆☆☆☆

我是一位实验室的老前辈了，见过的实验手册不计其数。这本书给我带来的惊喜，在于它不仅仅是罗列实验步骤，更深层次地探讨了每一步操作背后的科学原理。它不仅仅告诉我们“怎么做”，更重要的是“为什么这么做”。我翻阅了其中的几页，发现它对各种化学试剂的作用机理、物理过程（如离心、加热、冷却）对核酸的影响，都有着深入的剖析。这对于培养学生的实验思维，提高他们解决问题的能力，有着不可估量的价值。我尤其看重书中关于“实验优化”和“故障排除”的内容，因为在实际的科研工作中，实验很少能一次成功，能够掌握一些通用的优化策略和快速定位问题的方法，是提高效率的关键。这本书的排版也十分用心，图文并茂，细节之处的处理也非常到位，让人感觉作者是在用心做这本书，而不是简单地拼凑。这本手册，我感觉不仅仅是一本工具书，更是一本能够激发思考、提升能力的良师益友。

评分☆☆☆☆☆

我一直对生物技术领域怀有浓厚的兴趣，特别是那些能够直接观察生命分子活动的实验技术。这本书虽然我还没有深入阅读，但从它目录的章节划分来看，就已经让我感受到了其内容的全面性和逻辑性。它似乎从最基础的原理讲起，然后逐步深入到各种不同的样本类型和相应的提取方法，再到质量控制和下游应用。我尤其关注的是它关于不同核酸（DNA、RNA）提取方法的区分和侧重点，因为我明白它们在生物学研究中扮演着不同的角色，需要不同的处理方式。而且，我看到目录中提到了“常见问题及解决方案”这样的章节，这对于我这样在实验中常常会遇到意料之外情况的新手来说，简直是救星。我迫切希望它能提供一些实用的技巧和建议，帮助我避免走弯路，减少实验失败的概率。总而言之，这本书给我的第一印象是严谨、系统，并且非常贴合实际实验操作的需求，预感它将成为我实验室中的重要参考书。