生命科學實驗指南係列：抗體製備與使用實驗指南 [Making and Using Antibodies] pdf epub mobi txt 電子書 下載 2025

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[美] G.C.霍華德，M.R.凱瑟 著，張權庚，張玉祥，丁衛 等 譯

圖書標籤:

• 抗體
• 免疫學
• 實驗指南
• 生命科學
• 生物技術
• 蛋白質
• 實驗室技術
• 免疫分析
• 生物化學
• 研究方法

齣版社： 科學齣版社

ISBN：9787030285560

版次：1

商品編碼：11883042

包裝：平裝

叢書名： 生命科學實驗指南係列

外文名稱：Making and Using Antibodies

開本：16開

齣版時間：2010-08-01

用紙：膠版紙

頁數：293

字數：434000

正文語種：中文

內容簡介

　　《生命科學實驗指南係列：抗體製備與使用實驗指南》收集瞭抗體製備與使用中的基本實驗方法及相關的新科研進展，這些方法是開展抗體製備研究的必備知識，包括鼠源性單剋隆抗體的製備、純化、應用以及抗體的修飾等，同時也包括部分基因重組性單剋隆抗體，涉及內容具體、全麵，反映瞭國際上的新發展方嚮。
　　《生命科學實驗指南係列：抗體製備與使用實驗指南》對從事生物學、免疫學、生物化學與分子生物學、醫藥衛生科學領域的科研技術人員，以及高等院校師生具有參考價值。

內頁插圖

目錄

譯者序
前言
第1章 抗體
1．1 一種多功能分子——抗體
1．2 相關倫理思考
1．3 實驗室安全
1．4 手冊編排
參考文獻

第2章 抗原
2．1 抗原的選擇
2．2 多肽抗原
2．2．1 多肽抗原的免疫進度錶
2．3 蛋白質抗原
2．3．1 原核蛋白
2．3．2 真核蛋白
2．4 全細胞免疫原
2．4．1 全細胞免疫原的免疫方案
2．5 基因免疫
2．5．1 質粒DNA
2．5．2 腺病毒
參考文獻

第3章 佐劑
3．1 引言
3．2 佐劑的使用
3．2．1 總體要求
3．2．2 弗氏佐劑的使用
3．2．3 TiterMax佐劑的使用方案
3．2．4 Ribi佐劑係統（RAS）的應用
3．2．5 Gerbu佐劑的應用
3．2．6 Imject鋁鹽佐劑的使用
參考文獻

第4章 多剋隆抗體製備
4．1 概要
4．2 抗原提呈細胞
4．2．1 B細胞的抗原識彆
4．2．2 T細胞的抗原識彆
4．2．3 B細胞受體和抗體産生
4．2．4 免疫記憶
4．2．5 抗體
4．2．6 佐劑的作用
4．2．7 抗原特點
4．2．8 免疫途徑
4．2．9 免疫步驟
4．2．10 物種選擇
4．3 結論
參考文獻

第5章 單剋隆抗體的製備
5．1 引言
5．2 材料
5．2．1 免疫原
5．2．2 免疫用的動物
5．2．3 免疫策略
5．3 免疫程序
5．3．1 培養基和骨髓瘤細胞
5．3．2 免疫B細胞的製備
5．3．3 融閤和鋪闆
5．3．4 篩選
5．3．5 亞剋隆和低溫凍存
5．3．6 雜交瘤細胞的擴增
5．4 結論
參考文獻

第6章 單剋隆抗體的定量生産
6．1 引言：方法比較
6．2 抗體製備方法概況
6．2．1 産量
6．2．2 費用和設備
6．2．3 動物福利
6．2．4 免疫活性分子汙染
6．2．5 微生物汙染
6．2．6 抗體糖基化
6．3 腹水的製備
6．3．1 方法概述
6．3．2 免疫原同種異體反應性或異種抗原反應性的對策
……
第7章 抗體的純化和鑒定
第8章 細菌中製備抗體
第9章 抗體的化學和蛋白水解修飾
第10章 抗體的應用
第11章 免疫組織化學法
第12章 免疫電子顯微鏡
第13章 流式細胞術
第14章 酶聯免疫吸附試驗
第15章 抗體的未來：挑戰與機遇
索引
彩圖

前言/序言

　　抗體可稱為在地球上生命的發展曆史中最重要的一群蛋白。這些“魔彈”已經成為生物學和醫學研究中不可或缺的工具。在近25年生物學領域所收獲的重要知識的浪潮中，抗體起著關鍵性的作用，而在醫學實踐方麵，各種各樣疫苗的研究成功和使用已經使多種傳染性疾病得到瞭控製（至少在發達國傢是這樣），例如脊髓灰質炎、腮腺炎、麻疹、水痘等，並且已基本使天花絕跡。
　　我們希望本書對生物醫學領域的研究人員和學生有所幫助。盡管未來在製備和使用抗體方麵一定還會齣現新的方法，但目前抗體的使用方法，如酶聯免疫試驗（ELISAs）、蛋白質印跡方法（We。te，nBlot）、免疫組化、流式細胞術等，其功能是如此強大，以緻於在未來相當長的時間內這些技術方法仍將對生物醫學科學領域起著關鍵作用。
　　我們想在此對本書的所有作者錶達深切謝意，在他們傑齣的專業知識，優秀的寫作和對本書的熱心支持下，本書的齣版纔成為可能。我們也想在此深切感謝CRC齣版公司負責本書齣版工作的編輯JudithSpiegel，感謝她對本書的諸多幫助和極大的耐心。

生命科學實驗指南係列：抗體製備與使用實驗指南 核心內容概述 本書是“生命科學實驗指南係列”中的一本，專注於抗體的製備與使用這一生命科學領域至關重要的核心技術。本書力求為廣大生命科學研究人員、研究生及相關技術人員提供一套係統、詳實、可操作性強的實驗指南，涵蓋從基礎理論到具體實驗操作的方方麵麵，旨在幫助讀者掌握獨立完成抗體製備與應用的全過程，並能熟練運用抗體作為強大的研究工具，解決生命科學領域的各種難題。 內容深度與廣度 本書內容詳盡，結構清晰，理論與實踐緊密結閤。 第一部分：抗體基礎理論與製備原理 抗體概述： 詳細介紹抗體的結構、分類（單剋隆抗體、多剋隆抗體）、免疫球蛋白傢族的特徵，以及抗體在免疫係統中的重要作用。 免疫應答機製： 深入闡述抗體産生的免疫學基礎，包括抗原識彆、B細胞活化、漿細胞分化、記憶細胞形成等關鍵過程。 抗體製備策略： 詳細介紹兩種主要抗體製備策略——多剋隆抗體和單剋隆抗體的製備原理、優缺點、適用範圍。 抗原設計與選擇： 詳細講解如何選擇閤適的抗原（純蛋白質、多肽、全細胞等），以及抗原純化、修飾、佐劑選擇等關鍵環節。 第二部分：多剋隆抗體製備實驗技術 動物選擇與免疫： 詳細介紹常用的動物模型（兔、大鼠、小鼠、羊、馬等），動物的飼養、健康檢查，以及免疫程序的設計，包括初次免疫、加強免疫的劑量、頻率、途徑等。 采血與血清製備： 詳細指導如何安全有效地采集動物血液，以及血清的分離、保存和初步處理。 抗體效價測定： 介紹多種常用的抗體效價測定方法，如ELISA、Western Blot、瓊脂擴散法等，並提供詳細的操作步驟和數據分析方法。 抗體純化： 詳述多種多剋隆抗體純化技術，包括硫酸銨沉澱法、Protein A/G親和層析法、離子交換層析法等，提供詳細的實驗流程、試劑配製及優化建議。 抗體鑒定與質量控製： 介紹如何評估純化後抗體的特異性、親和力、特異性結閤等關鍵質量指標。 第三部分：單剋隆抗體製備實驗技術 雜交瘤技術詳解： 詳細介紹單剋隆抗體製備的核心——雜交瘤技術的每一個步驟。 動物免疫與脾細胞獲取： 優化動物免疫方案，高效獲取富含B細胞的脾髒。 骨髓瘤細胞株的選擇與準備： 介紹常用的骨髓瘤細胞株及其特性，以及細胞培養前的準備工作。 細胞融閤： 詳細講解聚乙二醇（PEG）法等經典融閤方法的具體操作，包括試劑配製、反應條件控製等。 雜交瘤篩選與剋隆培養： 介紹HAT選擇性培養基的原理及使用方法，以及有限稀釋法等剋隆擴增技術。 雜交瘤剋隆的鑒定與篩選： 詳細介紹如何通過ELISA、Western Blot等方法檢測陽性剋隆，並進行進一步的特異性篩選。 抗體生産與下遊應用： 介紹腹水法、培養法等大規模生産抗體的方法，以及抗體亞型鑒定、DNA測序等。 噬菌體展示技術（作為現代單抗製備的補充）： 簡要介紹噬菌體展示技術在抗體庫構建、抗體篩選中的應用，為讀者提供更廣闊的視野。 第四部分：抗體使用與應用實驗技術 抗體標記技術： 詳細介紹常用的抗體標記方法，包括熒光染料標記（FITC, PE, Cy3等）、酶標記（HRP, AP等）、生物素標記等，以及相應的標記試劑和操作流程。 免疫組化/免疫細胞化學（IHC/ICC）： 樣本製備： 詳細指導組織切片（石蠟包埋、冰凍）和細胞爬片（貼壁細胞、懸浮細胞）的固定、透化、抗原修復等關鍵步驟。 抗體孵育與信號檢測： 詳細介紹一抗、二抗的孵育條件，顯色體係（DAB, AEC, 熒光標記等）的選擇與應用，以及封片和顯微鏡觀察。 技術優化與故障排除： 提供常見的染色問題分析及解決方案。 Western Blotting（WB）： 樣本提取與蛋白質定量： 詳細指導不同類型樣本的蛋白質提取方法，以及蛋白質濃度測定。 SDS-PAGE電泳： 介紹凝膠配製、電泳條件的選擇與優化。 蛋白質轉膜： 詳細講解乾轉、濕轉、半乾轉等方法的原理與操作。 封閉、一抗/二抗孵育： 詳細指導封閉液選擇、抗體稀釋度、孵育時間與溫度的優化。 顯色與信號檢測： 介紹化學發光、酶促顯色等方法，以及成像設備的使用。 酶聯免疫吸附測定（ELISA）： 不同類型ELISA的設計與操作： 詳細講解間接ELISA、夾心ELISA、競爭ELISA等設計思路和具體操作步驟，包括包被、封閉、樣品孵育、酶結閤物孵育、顯色、結果判讀等。 ELISA實驗優化： 提供抗體濃度、孵育時間、溫度、洗滌條件等優化建議。 流式細胞術（Flow Cytometry）： 細胞懸液製備與染色： 詳細指導細胞的獲取、過濾、抗體直接/間接染色方法。 儀器設置與數據采集： 介紹流式細胞儀的基本原理、補償設置、電壓調整和數據采集。 數據分析： 介紹門設、單參數/雙參數分析、陽性細胞比例計算等。 免疫沉澱（IP）： 裂解液選擇與樣本準備： 詳細指導不同細胞/組織裂解液的配製與使用。 抗體選擇與孵育： 介紹閤適的IP抗體選擇原則，以及抗體與細胞裂解液的孵育條件。 蛋白A/G珠的使用： 詳細介紹蛋白A/G珠的活化、抗體偶聯、免疫沉澱物的結閤與洗脫。 IP産物的鑒定： 介紹後續WB檢測。 其他抗體應用： 簡要介紹抗體在免疫熒光顯微鏡、質譜、免疫學診斷等領域的應用。 第五部分：抗體生産、儲存與安全 抗體儲存條件： 詳細講解抗體的適宜儲存溫度、緩衝液配製、防止汙染的措施。 抗體稀釋與復融： 提供抗體復融的注意事項和最佳實踐。 實驗室安全： 強調在使用動物、化學試劑、生物材料時的安全操作規程。 本書特色 實操性強： 每個實驗步驟都力求詳細、清晰，配以圖示和錶格，方便讀者理解和操作。 理論紮實： 在介紹實驗技術的同時，深入講解背後的科學原理，幫助讀者知其然更知其所以然。 問題導嚮： 針對實驗中可能遇到的常見問題，提供詳盡的分析和解決方案，提高實驗成功率。 前沿視角： 適當引入現代抗體製備和應用的新技術，拓寬讀者的視野。 適用廣泛： 覆蓋瞭分子生物學、細胞生物學、免疫學、生物化學等多個領域，是生命科學研究者的案頭必備。 本書旨在成為生命科學研究者在抗體製備與應用領域不可或缺的實踐夥伴，幫助他們更高效、更準確地開展科研工作，推動生命科學研究的不斷發展。

評分☆☆☆☆☆

這本書的標題就足夠吸引我瞭——“抗體製備與使用實驗指南”。作為一名在生物技術公司工作的研發人員，我深知抗體在診斷試劑、藥物開發等領域的關鍵作用。然而，要真正掌握抗體的製備和應用，並將其轉化為具有市場競爭力的産品，需要非常紮實的技術功底和豐富的實踐經驗。這本書恰恰填補瞭這一領域的空白。它不僅提供瞭詳細的實驗操作步驟，還深入探討瞭相關的質量控製和法規要求。我尤其對書中關於GMP（藥品生産質量管理規範）環境下抗體製備的考量和方法進行瞭闡述，這對於我們進行商業化生産非常有價值。同時，書中對不同應用場景下抗體的選擇策略，例如在ELISA、Lateral Flow Assay（側嚮層析試驗）中的應用，都進行瞭詳細的分析和比較，這對於我們設計和優化産品至關重要。我感覺這本書不僅僅是一本實驗操作手冊，更是一本涵蓋瞭從研發到生産，再到應用的全方位指南。它讓我對整個抗體産業鏈有瞭更深刻的認識，也為我今後的工作提供瞭寶貴的參考和指導。

評分☆☆☆☆☆

這本《生命科學實驗指南係列：抗體製備與使用實驗指南》以一種令人耳目一新的方式，將抗體這一核心工具的奧秘呈現在我麵前。作為一個在生物醫藥領域摸爬滾打多年的實驗員，我一直對高質量抗體的重要性深有體會，但也深知其製備和優化的挑戰。這本書，恰恰滿足瞭我對“知其然，更知其所以然”的渴望。它不僅僅停留在操作層麵，而是深入剖析瞭抗體與抗原相互作用的分子機製，以及不同純化方法背後的原理。我特彆欣賞書中關於抗體標記技術的部分，無論是酶聯、熒光還是放射性標記，都進行瞭詳細的闡述，並指齣瞭各自的優缺點和適用範圍，這對於我日常的ELISA、Western Blot和免疫組化實驗設計提供瞭極大的幫助。更重要的是，作者對於實驗條件優化給齣的建議，比如如何選擇閤適的緩衝液、孵育時間、封閉液組分等，都來自於實際操作的經驗總結，非常接地氣。我甚至覺得，書中列齣的質控方法，比如抗體效價測定、特異性評估等，是我之前常常忽略但又至關重要的環節。它讓我意識到，一個看似簡單的抗體，背後凝聚瞭多少精密的實驗設計和嚴謹的驗證過程。讀完這本書，我感覺自己對實驗的掌控力又上瞭一個颱階，對於如何獲得更可靠、更靈敏的實驗結果，有瞭更清晰的認識。

評分☆☆☆☆☆

坦白說，我之前對“抗體”的理解，更多地停留在“檢測工具”的層麵，對於它如何被“製造”齣來的過程，一直感到有些模糊。這本《抗體製備與使用實驗指南》的到來，徹底顛覆瞭我的認知。它就像一部精心編排的生物化學戲劇，將抗體從無到有的整個生命周期，用生動而詳實的筆觸展現齣來。我被書中對動物免疫過程的描述深深吸引，從最初的抗原設計，到選擇閤適的免疫佐劑，再到不同動物模型（如兔子、小鼠、大鼠）的選擇，每一步都充滿瞭科學的嚴謹性和巧妙的考量。讓我印象深刻的是，書中還探討瞭如何提高抗體産量和質量的策略，比如重復免疫、不同部位取血等，這些都是我在其他地方很難找到的寶貴經驗。更讓我驚喜的是，書中不僅僅關注瞭多剋隆抗體的製備，還對單剋隆抗體的雜交瘤技術進行瞭深入淺齣的講解，讓我對這種高度特異性的抗體産生瞭濃厚的興趣。總的來說，這本書為我打開瞭一扇新的大門，讓我看到瞭抗體研究背後龐大的體係和無窮的可能性。它讓我從一個單純的使用者，轉變為一個對整個産業鏈有更深理解的“知情者”。

評分☆☆☆☆☆

這本書的齣現，簡直就是我科研生涯中的及時雨！作為一名初涉生命科學領域的研究生，我對“抗體”這個概念既熟悉又陌生。導師經常提及，文獻裏更是隨處可見，但真正讓我從零開始瞭解它的製作過程和實際應用，之前還真沒有一個係統性的指導。翻開這本書，我驚喜地發現它並不是那種枯燥乏味的教科書，而是以一種非常直觀、易懂的方式，層層剝繭地揭示瞭抗體製備的復雜流程。從最初的抗原選擇、免疫策略，到抗體純化、鑒定，再到最後如何在各種實驗技術中巧妙運用，每一步都講解得鞭闢入裏。我尤其喜歡書中穿插的各種實驗案例和操作要點，這些細節讓我在想象中就已經模擬瞭一遍整個過程，大大降低瞭我對未來實驗的恐懼感。而且，書中還對不同類型的抗體（多剋隆、單剋隆）進行瞭深入的比較，並根據不同的應用場景推薦瞭最閤適的選擇，這對我這個新手來說，簡直是福音，避免瞭走彎路。讓我印象深刻的是，作者並沒有迴避實驗中可能齣現的各種“坑”，而是提前預警並提供瞭解決方案，這種“經驗之談”的分享，比單純的理論知識更有價值。我感覺這本書不僅僅是一本實驗指南，更像是一位經驗豐富的導師，在我的耳邊細語著每一個關鍵的步驟和注意事項。

評分☆☆☆☆☆

作為一名長期從事細胞信號傳導研究的博士後，抗體是我在實驗室裏最常打交道的“夥伴”。然而，即便是經驗豐富的我，也常常會在實驗中遇到抗體選擇睏難、信號噪音過大、特異性不足等問題。這本書的齣現，恰好解決瞭我的痛點。它並沒有提供“包治百病”的萬能藥，而是提供瞭一種係統性的思考框架，讓我能夠更深入地理解不同抗體在不同實驗背景下的錶現。書中關於抗體親和力、選擇性以及儲存條件對實驗結果影響的分析，讓我茅塞頓開。我特彆贊賞其中關於如何評估和選擇高質量商品化抗體的部分，作者詳細列舉瞭需要關注的指標，並給齣瞭相應的驗證方法，這對我節省時間和避免無效投入有著巨大的指導意義。此外，書中對一些新興的抗體技術，例如標記抗體、納米抗體等也有所涉獵，這讓我對未來的研究方嚮有瞭更廣闊的視野。我感覺這本書不僅僅是一本技術手冊，更是一份充滿瞭智慧和經驗的“錦囊”，能夠幫助我在抗體應用這條路上走得更穩、更遠。

評分☆☆☆☆☆

好書，縱裏尋他韆百度，超級滿意，好好學起來

評分☆☆☆☆☆

有點興趣，存著慢慢看，書質量很好

評分☆☆☆☆☆

很好的書本，喜歡

評分☆☆☆☆☆

內容詳細，豐富。

評分☆☆☆☆☆

真不錯不錯不錯不錯不錯！

評分☆☆☆☆☆

Good

評分☆☆☆☆☆

很好的書本，喜歡

評分☆☆☆☆☆

給上中農大研究生的外甥買的，他很需要，買來很喜歡，學習助手，助力學業上新水平！

評分☆☆☆☆☆

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