生命科学实验指南系列：抗体制备与使用实验指南 [Making and Using Antibodies] pdf epub mobi txt 电子书 下载 2025

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[美] G.C.霍华德，M.R.凯瑟 著，张权庚，张玉祥，丁卫 等 译

图书标签:

• 抗体
• 免疫学
• 实验指南
• 生命科学
• 生物技术
• 蛋白质
• 实验室技术
• 免疫分析
• 生物化学
• 研究方法

出版社： 科学出版社

ISBN：9787030285560

版次：1

商品编码：11883042

包装：平装

丛书名： 生命科学实验指南系列

外文名称：Making and Using Antibodies

开本：16开

出版时间：2010-08-01

用纸：胶版纸

页数：293

字数：434000

正文语种：中文

内容简介

　　《生命科学实验指南系列：抗体制备与使用实验指南》收集了抗体制备与使用中的基本实验方法及相关的新科研进展，这些方法是开展抗体制备研究的必备知识，包括鼠源性单克隆抗体的制备、纯化、应用以及抗体的修饰等，同时也包括部分基因重组性单克隆抗体，涉及内容具体、全面，反映了国际上的新发展方向。
　　《生命科学实验指南系列：抗体制备与使用实验指南》对从事生物学、免疫学、生物化学与分子生物学、医药卫生科学领域的科研技术人员，以及高等院校师生具有参考价值。

内页插图

目录

译者序
前言
第1章 抗体
1．1 一种多功能分子——抗体
1．2 相关伦理思考
1．3 实验室安全
1．4 手册编排
参考文献

第2章 抗原
2．1 抗原的选择
2．2 多肽抗原
2．2．1 多肽抗原的免疫进度表
2．3 蛋白质抗原
2．3．1 原核蛋白
2．3．2 真核蛋白
2．4 全细胞免疫原
2．4．1 全细胞免疫原的免疫方案
2．5 基因免疫
2．5．1 质粒DNA
2．5．2 腺病毒
参考文献

第3章 佐剂
3．1 引言
3．2 佐剂的使用
3．2．1 总体要求
3．2．2 弗氏佐剂的使用
3．2．3 TiterMax佐剂的使用方案
3．2．4 Ribi佐剂系统（RAS）的应用
3．2．5 Gerbu佐剂的应用
3．2．6 Imject铝盐佐剂的使用
参考文献

第4章 多克隆抗体制备
4．1 概要
4．2 抗原提呈细胞
4．2．1 B细胞的抗原识别
4．2．2 T细胞的抗原识别
4．2．3 B细胞受体和抗体产生
4．2．4 免疫记忆
4．2．5 抗体
4．2．6 佐剂的作用
4．2．7 抗原特点
4．2．8 免疫途径
4．2．9 免疫步骤
4．2．10 物种选择
4．3 结论
参考文献

第5章 单克隆抗体的制备
5．1 引言
5．2 材料
5．2．1 免疫原
5．2．2 免疫用的动物
5．2．3 免疫策略
5．3 免疫程序
5．3．1 培养基和骨髓瘤细胞
5．3．2 免疫B细胞的制备
5．3．3 融合和铺板
5．3．4 筛选
5．3．5 亚克隆和低温冻存
5．3．6 杂交瘤细胞的扩增
5．4 结论
参考文献

第6章 单克隆抗体的定量生产
6．1 引言：方法比较
6．2 抗体制备方法概况
6．2．1 产量
6．2．2 费用和设备
6．2．3 动物福利
6．2．4 免疫活性分子污染
6．2．5 微生物污染
6．2．6 抗体糖基化
6．3 腹水的制备
6．3．1 方法概述
6．3．2 免疫原同种异体反应性或异种抗原反应性的对策
……
第7章 抗体的纯化和鉴定
第8章 细菌中制备抗体
第9章 抗体的化学和蛋白水解修饰
第10章 抗体的应用
第11章 免疫组织化学法
第12章 免疫电子显微镜
第13章 流式细胞术
第14章 酶联免疫吸附试验
第15章 抗体的未来：挑战与机遇
索引
彩图

前言/序言

　　抗体可称为在地球上生命的发展历史中最重要的一群蛋白。这些“魔弹”已经成为生物学和医学研究中不可或缺的工具。在近25年生物学领域所收获的重要知识的浪潮中，抗体起着关键性的作用，而在医学实践方面，各种各样疫苗的研究成功和使用已经使多种传染性疾病得到了控制（至少在发达国家是这样），例如脊髓灰质炎、腮腺炎、麻疹、水痘等，并且已基本使天花绝迹。
　　我们希望本书对生物医学领域的研究人员和学生有所帮助。尽管未来在制备和使用抗体方面一定还会出现新的方法，但目前抗体的使用方法，如酶联免疫试验（ELISAs）、蛋白质印迹方法（We。te，nBlot）、免疫组化、流式细胞术等，其功能是如此强大，以致于在未来相当长的时间内这些技术方法仍将对生物医学科学领域起着关键作用。
　　我们想在此对本书的所有作者表达深切谢意，在他们杰出的专业知识，优秀的写作和对本书的热心支持下，本书的出版才成为可能。我们也想在此深切感谢CRC出版公司负责本书出版工作的编辑JudithSpiegel，感谢她对本书的诸多帮助和极大的耐心。

生命科学实验指南系列：抗体制备与使用实验指南 核心内容概述 本书是“生命科学实验指南系列”中的一本，专注于抗体的制备与使用这一生命科学领域至关重要的核心技术。本书力求为广大生命科学研究人员、研究生及相关技术人员提供一套系统、详实、可操作性强的实验指南，涵盖从基础理论到具体实验操作的方方面面，旨在帮助读者掌握独立完成抗体制备与应用的全过程，并能熟练运用抗体作为强大的研究工具，解决生命科学领域的各种难题。 内容深度与广度 本书内容详尽，结构清晰，理论与实践紧密结合。 第一部分：抗体基础理论与制备原理 抗体概述： 详细介绍抗体的结构、分类（单克隆抗体、多克隆抗体）、免疫球蛋白家族的特征，以及抗体在免疫系统中的重要作用。 免疫应答机制： 深入阐述抗体产生的免疫学基础，包括抗原识别、B细胞活化、浆细胞分化、记忆细胞形成等关键过程。 抗体制备策略： 详细介绍两种主要抗体制备策略——多克隆抗体和单克隆抗体的制备原理、优缺点、适用范围。 抗原设计与选择： 详细讲解如何选择合适的抗原（纯蛋白质、多肽、全细胞等），以及抗原纯化、修饰、佐剂选择等关键环节。 第二部分：多克隆抗体制备实验技术 动物选择与免疫： 详细介绍常用的动物模型（兔、大鼠、小鼠、羊、马等），动物的饲养、健康检查，以及免疫程序的设计，包括初次免疫、加强免疫的剂量、频率、途径等。 采血与血清制备： 详细指导如何安全有效地采集动物血液，以及血清的分离、保存和初步处理。 抗体效价测定： 介绍多种常用的抗体效价测定方法，如ELISA、Western Blot、琼脂扩散法等，并提供详细的操作步骤和数据分析方法。 抗体纯化： 详述多种多克隆抗体纯化技术，包括硫酸铵沉淀法、Protein A/G亲和层析法、离子交换层析法等，提供详细的实验流程、试剂配制及优化建议。 抗体鉴定与质量控制： 介绍如何评估纯化后抗体的特异性、亲和力、特异性结合等关键质量指标。 第三部分：单克隆抗体制备实验技术 杂交瘤技术详解： 详细介绍单克隆抗体制备的核心——杂交瘤技术的每一个步骤。 动物免疫与脾细胞获取： 优化动物免疫方案，高效获取富含B细胞的脾脏。 骨髓瘤细胞株的选择与准备： 介绍常用的骨髓瘤细胞株及其特性，以及细胞培养前的准备工作。 细胞融合： 详细讲解聚乙二醇（PEG）法等经典融合方法的具体操作，包括试剂配制、反应条件控制等。 杂交瘤筛选与克隆培养： 介绍HAT选择性培养基的原理及使用方法，以及有限稀释法等克隆扩增技术。 杂交瘤克隆的鉴定与筛选： 详细介绍如何通过ELISA、Western Blot等方法检测阳性克隆，并进行进一步的特异性筛选。 抗体生产与下游应用： 介绍腹水法、培养法等大规模生产抗体的方法，以及抗体亚型鉴定、DNA测序等。 噬菌体展示技术（作为现代单抗制备的补充）： 简要介绍噬菌体展示技术在抗体库构建、抗体筛选中的应用，为读者提供更广阔的视野。 第四部分：抗体使用与应用实验技术 抗体标记技术： 详细介绍常用的抗体标记方法，包括荧光染料标记（FITC, PE, Cy3等）、酶标记（HRP, AP等）、生物素标记等，以及相应的标记试剂和操作流程。 免疫组化/免疫细胞化学（IHC/ICC）： 样本制备： 详细指导组织切片（石蜡包埋、冰冻）和细胞爬片（贴壁细胞、悬浮细胞）的固定、透化、抗原修复等关键步骤。 抗体孵育与信号检测： 详细介绍一抗、二抗的孵育条件，显色体系（DAB, AEC, 荧光标记等）的选择与应用，以及封片和显微镜观察。 技术优化与故障排除： 提供常见的染色问题分析及解决方案。 Western Blotting（WB）： 样本提取与蛋白质定量： 详细指导不同类型样本的蛋白质提取方法，以及蛋白质浓度测定。 SDS-PAGE电泳： 介绍凝胶配制、电泳条件的选择与优化。 蛋白质转膜： 详细讲解干转、湿转、半干转等方法的原理与操作。 封闭、一抗/二抗孵育： 详细指导封闭液选择、抗体稀释度、孵育时间与温度的优化。 显色与信号检测： 介绍化学发光、酶促显色等方法，以及成像设备的使用。 酶联免疫吸附测定（ELISA）： 不同类型ELISA的设计与操作： 详细讲解间接ELISA、夹心ELISA、竞争ELISA等设计思路和具体操作步骤，包括包被、封闭、样品孵育、酶结合物孵育、显色、结果判读等。 ELISA实验优化： 提供抗体浓度、孵育时间、温度、洗涤条件等优化建议。 流式细胞术（Flow Cytometry）： 细胞悬液制备与染色： 详细指导细胞的获取、过滤、抗体直接/间接染色方法。 仪器设置与数据采集： 介绍流式细胞仪的基本原理、补偿设置、电压调整和数据采集。 数据分析： 介绍门设、单参数/双参数分析、阳性细胞比例计算等。 免疫沉淀（IP）： 裂解液选择与样本准备： 详细指导不同细胞/组织裂解液的配制与使用。 抗体选择与孵育： 介绍合适的IP抗体选择原则，以及抗体与细胞裂解液的孵育条件。 蛋白A/G珠的使用： 详细介绍蛋白A/G珠的活化、抗体偶联、免疫沉淀物的结合与洗脱。 IP产物的鉴定： 介绍后续WB检测。 其他抗体应用： 简要介绍抗体在免疫荧光显微镜、质谱、免疫学诊断等领域的应用。 第五部分：抗体生产、储存与安全 抗体储存条件： 详细讲解抗体的适宜储存温度、缓冲液配制、防止污染的措施。 抗体稀释与复融： 提供抗体复融的注意事项和最佳实践。 实验室安全： 强调在使用动物、化学试剂、生物材料时的安全操作规程。 本书特色 实操性强： 每个实验步骤都力求详细、清晰，配以图示和表格，方便读者理解和操作。 理论扎实： 在介绍实验技术的同时，深入讲解背后的科学原理，帮助读者知其然更知其所以然。 问题导向： 针对实验中可能遇到的常见问题，提供详尽的分析和解决方案，提高实验成功率。 前沿视角： 适当引入现代抗体制备和应用的新技术，拓宽读者的视野。 适用广泛： 覆盖了分子生物学、细胞生物学、免疫学、生物化学等多个领域，是生命科学研究者的案头必备。 本书旨在成为生命科学研究者在抗体制备与应用领域不可或缺的实践伙伴，帮助他们更高效、更准确地开展科研工作，推动生命科学研究的不断发展。

评分☆☆☆☆☆

这本《生命科学实验指南系列：抗体制备与使用实验指南》以一种令人耳目一新的方式，将抗体这一核心工具的奥秘呈现在我面前。作为一个在生物医药领域摸爬滚打多年的实验员，我一直对高质量抗体的重要性深有体会，但也深知其制备和优化的挑战。这本书，恰恰满足了我对“知其然，更知其所以然”的渴望。它不仅仅停留在操作层面，而是深入剖析了抗体与抗原相互作用的分子机制，以及不同纯化方法背后的原理。我特别欣赏书中关于抗体标记技术的部分，无论是酶联、荧光还是放射性标记，都进行了详细的阐述，并指出了各自的优缺点和适用范围，这对于我日常的ELISA、Western Blot和免疫组化实验设计提供了极大的帮助。更重要的是，作者对于实验条件优化给出的建议，比如如何选择合适的缓冲液、孵育时间、封闭液组分等，都来自于实际操作的经验总结，非常接地气。我甚至觉得，书中列出的质控方法，比如抗体效价测定、特异性评估等，是我之前常常忽略但又至关重要的环节。它让我意识到，一个看似简单的抗体，背后凝聚了多少精密的实验设计和严谨的验证过程。读完这本书，我感觉自己对实验的掌控力又上了一个台阶，对于如何获得更可靠、更灵敏的实验结果，有了更清晰的认识。

评分☆☆☆☆☆

坦白说，我之前对“抗体”的理解，更多地停留在“检测工具”的层面，对于它如何被“制造”出来的过程，一直感到有些模糊。这本《抗体制备与使用实验指南》的到来，彻底颠覆了我的认知。它就像一部精心编排的生物化学戏剧，将抗体从无到有的整个生命周期，用生动而详实的笔触展现出来。我被书中对动物免疫过程的描述深深吸引，从最初的抗原设计，到选择合适的免疫佐剂，再到不同动物模型（如兔子、小鼠、大鼠）的选择，每一步都充满了科学的严谨性和巧妙的考量。让我印象深刻的是，书中还探讨了如何提高抗体产量和质量的策略，比如重复免疫、不同部位取血等，这些都是我在其他地方很难找到的宝贵经验。更让我惊喜的是，书中不仅仅关注了多克隆抗体的制备，还对单克隆抗体的杂交瘤技术进行了深入浅出的讲解，让我对这种高度特异性的抗体产生了浓厚的兴趣。总的来说，这本书为我打开了一扇新的大门，让我看到了抗体研究背后庞大的体系和无穷的可能性。它让我从一个单纯的使用者，转变为一个对整个产业链有更深理解的“知情者”。

评分☆☆☆☆☆

作为一名长期从事细胞信号传导研究的博士后，抗体是我在实验室里最常打交道的“伙伴”。然而，即便是经验丰富的我，也常常会在实验中遇到抗体选择困难、信号噪音过大、特异性不足等问题。这本书的出现，恰好解决了我的痛点。它并没有提供“包治百病”的万能药，而是提供了一种系统性的思考框架，让我能够更深入地理解不同抗体在不同实验背景下的表现。书中关于抗体亲和力、选择性以及储存条件对实验结果影响的分析，让我茅塞顿开。我特别赞赏其中关于如何评估和选择高质量商品化抗体的部分，作者详细列举了需要关注的指标，并给出了相应的验证方法，这对我节省时间和避免无效投入有着巨大的指导意义。此外，书中对一些新兴的抗体技术，例如标记抗体、纳米抗体等也有所涉猎，这让我对未来的研究方向有了更广阔的视野。我感觉这本书不仅仅是一本技术手册，更是一份充满了智慧和经验的“锦囊”，能够帮助我在抗体应用这条路上走得更稳、更远。

评分☆☆☆☆☆

这本书的出现，简直就是我科研生涯中的及时雨！作为一名初涉生命科学领域的研究生，我对“抗体”这个概念既熟悉又陌生。导师经常提及，文献里更是随处可见，但真正让我从零开始了解它的制作过程和实际应用，之前还真没有一个系统性的指导。翻开这本书，我惊喜地发现它并不是那种枯燥乏味的教科书，而是以一种非常直观、易懂的方式，层层剥茧地揭示了抗体制备的复杂流程。从最初的抗原选择、免疫策略，到抗体纯化、鉴定，再到最后如何在各种实验技术中巧妙运用，每一步都讲解得鞭辟入里。我尤其喜欢书中穿插的各种实验案例和操作要点，这些细节让我在想象中就已经模拟了一遍整个过程，大大降低了我对未来实验的恐惧感。而且，书中还对不同类型的抗体（多克隆、单克隆）进行了深入的比较，并根据不同的应用场景推荐了最合适的选择，这对我这个新手来说，简直是福音，避免了走弯路。让我印象深刻的是，作者并没有回避实验中可能出现的各种“坑”，而是提前预警并提供了解决方案，这种“经验之谈”的分享，比单纯的理论知识更有价值。我感觉这本书不仅仅是一本实验指南，更像是一位经验丰富的导师，在我的耳边细语着每一个关键的步骤和注意事项。

评分☆☆☆☆☆

这本书的标题就足够吸引我了——“抗体制备与使用实验指南”。作为一名在生物技术公司工作的研发人员，我深知抗体在诊断试剂、药物开发等领域的关键作用。然而，要真正掌握抗体的制备和应用，并将其转化为具有市场竞争力的产品，需要非常扎实的技术功底和丰富的实践经验。这本书恰恰填补了这一领域的空白。它不仅提供了详细的实验操作步骤，还深入探讨了相关的质量控制和法规要求。我尤其对书中关于GMP（药品生产质量管理规范）环境下抗体制备的考量和方法进行了阐述，这对于我们进行商业化生产非常有价值。同时，书中对不同应用场景下抗体的选择策略，例如在ELISA、Lateral Flow Assay（侧向层析试验）中的应用，都进行了详细的分析和比较，这对于我们设计和优化产品至关重要。我感觉这本书不仅仅是一本实验操作手册，更是一本涵盖了从研发到生产，再到应用的全方位指南。它让我对整个抗体产业链有了更深刻的认识，也为我今后的工作提供了宝贵的参考和指导。

评分☆☆☆☆☆

印刷清楚，送货快，物有所值。

评分☆☆☆☆☆

内容详细，丰富。

评分☆☆☆☆☆

书还不错，发货快

评分☆☆☆☆☆

够的看了，内容丰富啊

评分☆☆☆☆☆

不错

评分☆☆☆☆☆

生物技术的教科书

评分☆☆☆☆☆

好书，纵里寻他千百度，超级满意，好好学起来

评分☆☆☆☆☆

还不错，包装不是很好

评分☆☆☆☆☆

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