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内容简介

　　《细胞生物学实验教程（第二版）》被评为“十二五”普通高等教育本科国家级规划教材，是王金发教授主持编写的《细胞生物学》配套实验教材，是在2004年出版的《细胞生物学实验教程》基础上重新修订的。《细胞生物学实验教程（第二版）》包括12章共71个实验，内容既保留了目前在细胞生物学研究领域中经常用到的经典实验，又新增了不少与现代细胞生物学和分子生物学相关的新技术，包括：线粒体膜电位检测，抗性膜和胆固醇去除，细胞电泳技术，DNA、RNA和蛋白质的原位杂交，差异基因表达，酵母中cDNA的表达，细胞凋亡检测，果蝇胚胎的共聚焦显微技术等。《细胞生物学实验教程（第二版）》可供综合性大学及农林、医学、师范院校本科生和研究生细胞生物学实验课教学使用，也可作为从事相关专业研究人员的参考用书。

目录

第二版前言
第一版前言
第一章 光学显微镜技术
实验1 普通光学显微镜的构造原理及使用方法
实验2 特殊显微镜的原理和使用
实验3 光学显微标本的制作技术

第二章 电子显微镜技术
实验4 透射电子显微镜
实验5 透射电子显微镜样品制备
实验6 扫描电子显微镜
实验7 扫描电子显微镜样品制备

第三章 细胞的形态结构
实验8 细胞形态结构与几种细胞器的观察
实验9 液泡系和线粒体的活体染色
实验10 用荧光脂质进行细胞活体染色
实验11 植物细胞骨架的光学显微镜观察
实验12 细胞骨架的免疫荧光显示
实验13 细胞的超微结构
实验14 细胞的显微测量

第四章 细胞化学
实验15 DNA的细胞化学——Feulgen反应
实验16 RNA的细胞化学——Brachet反应
实验17 细胞中多糖和过氧化物酶的定位
实验18 细胞中酸性磷酸酶的定位
实验19 细胞中碱性磷酸酶的定位

第五章 细胞生理
实验20 小鼠巨噬细胞吞噬的观察
实验21 胞饮作用
实验22 细胞膜的通透性
实验23 核质穿梭测定法
实验24 线粒体膜电位检测
实验25 细胞电泳

第六章 细胞分裂与染色体畸变
实验26 细胞的无丝分裂与有丝分裂
实验27 细胞减数分裂
实验28 环境因素及辐射诱变染色体改组的观察
实验29 细胞毒和细胞生长测定
实验30 彗星测定

第七章 染色体技术与核型分析
实验31 植物染色体标本的制备和观察
实验32 动物骨髓细胞染色体标本的制备
实验33 人体外周血淋巴细胞培养与染色体标本制备
实验34 人类染色体G带技术
实验35 植物染色体分带技术
实验36 人类体细胞染色体组型分析
实验37 染色体核仁组织区（NOR）的显示
实验38 姐妹染色单体色差分析技术

第八章 细胞和组织培养技术
实验39 植物组织培养技术
实验40 原生质体的分离和培养
实验41 细胞计数
实验42 动物细胞原代培养
实验43 果蝇胚胎细胞的原代培养
实验44 传代细胞培养
实验45 细胞的冻存与复苏

第九章 细胞化学成分的分离
实验46 细胞核与线粒体的分级分离
实验47 高尔基体的分离
实验48 核仁的分离
实验49 过氧化物体的分离
实验50 完整叶绿体的分离
实验51 中期染色体的分离纯化
实验52 动物细胞基因组DNA的提取
实验53 植物基因组DNA的提取
实验54 细胞和组织总RNA的提取

第十章 蛋白质、核酸的定位与检测
实验55 琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段
实验56 同步检测DNA、RNA和蛋白质的原位杂交技术
实验57 银染法检测凝胶中的蛋白质——改良硝酸银染法
实验58 染色质免疫共沉淀
实验59 代表性差异分析：研究差异基因表达的方法
实验60 酵母中cDNA表达

第十一章 细胞工程技术
实验61 细胞融合
实验62 植物体细胞杂交——原生质体的融合
实验63 单克隆抗体的制备
实验64 产细胞克隆测定
实验65 去污剂抗性膜和胆固醇去除的应用

第十二章 其他技术
实验66 细胞放射自显影
实验67 流式细胞技术
实验68 荧光标记技术
实验69 细胞凋亡的检测
实验70 共聚焦显微技术及去旋技术
实验71 果蝇胚胎的共聚焦显微技术

参考文献
附录
附录1 一些常用的换算
附录2 常用试剂及溶液的配制和使用
附录3 光学仪器保养与清洁的要点
附录4 常用缩写汇编
附录5 常用细菌培养基的配方

精彩书摘

　　《细胞生物学实验教程（第二版）》：
　　（三）显微镜的使用方法
　　1.用前的准备工作
　　（1）打开镜箱，右手握住镜臂，左手托住镜座，小心地把显微镜从镜箱内取出，轻轻地放在实验桌上。
　　（2）检查显微镜的各部件是否完整和正常，如发现有部件损坏或出现故障，应立即停止使用，待排除故障或修复后，才能继续操作。
　　2.低倍镜的使用
　　（1）准备：将显微镜放于前方略偏左侧，必要时使镜筒倾斜（有的显微镜本身已经倾斜）以便观察。转动粗调节钮，将镜筒略升高（或将载物台下降）使物镜与载物台距离拉开，以免物镜与载物台相碰。然后旋转物镜转换器，将低倍镜对准载物台中央的通光孔（可听到“咔哒”声）。
　　（2）对光：打开光圈，上升聚光器，双眼同时睁开，以左眼向目镜内观察，双手并用，左手调焦，右手移片或绘图记录，同时调节反光镜的方向，使视野内的光线均匀，亮度适中。
　　（3）放标本片：标本片的盖片朝上，将标本片放到载物台前方，然后推到物镜下面，用压片夹压住，若有标本移动器，可用上面的弹簧夹夹住标本片，然后把要观察的部分移到通光孔的正中央。
　　（4）调节焦距：从显微镜侧面注视物镜镜头，同时旋转粗调节钮，使镜筒缓慢下降（或镜台上升），低倍镜的镜头端与标本片间的距离约Smm时，再用左眼从目镜里观察视野，左手慢慢转动粗调节钮，使镜筒缓缓上升，直至视野中出现物像为止。如物像不太清晰，可转动细调节钮，使物像达到最清晰为止。
　　如果按上述操作步骤仍看不到物像时，可能由以下原因造成：①转动调节钮太快，超过焦点，应按上述步骤重新调节焦距；②物镜没有对正，应对正后再观察；③标本没有放到视野内，应移动标本片寻找观察对象；④光线太强，尤其是观察比较透明的标本或没有染色的标本时，易出现这种现象，应将光线调暗一些后，再观察。
　　3.高倍镜的使用（1）依照上述操作步骤，先用低倍镜找到清晰物像。
　　（2）将需要观察的部分移到视野的中央。
　　（3）眼睛从侧面注视物镜，用手移动转换器，换高倍镜。
　　（4）眼睛向目镜内观察，同时微微上下转动细调节钮，直至视野内看到清晰的物像为止。
　　如按上述操作仍看不到物像时，可能由下列原因造成：①观察的部分不在视野内，应在低倍镜下找到后，移到视野中央，再换高倍镜观察；②标本片放反，应把标本片放正后，再按上述步骤操作；③焦距没调好，应仔细调节焦距。
　　有的显微镜高倍镜与低倍镜不配套，从低倍镜转换高倍镜时，往往转不过来或撞坏标本，如遇到这种情况，可把镜筒略升高（或载物台下降），直接用高倍镜调焦的方法是：从侧面注视物镜，调节粗调节钮，使高倍镜头下降至与标本片最短距离，再观察目镜视野，慢慢调节细调节钮，使镜头缓缓上升，直至物像清晰为止。如需要更换标本片，应该先把镜筒升高（或载物台下降），然后把标本片移到载物台前方，再取下。4.油镜的使用方法
　　（1）先按低倍镜到高倍镜的操作步骤找到物像，把要放大观察的部分移到视野中央。
　　（2）把高倍镜移开，在标本片上滴一滴香柏油，眼睛从侧面注视镜头，轻轻转换油镜，使镜面浸在油滴中。在一般情况下，转过油镜即可看到物像，如不清楚，可来回调动细调节钮.即可看清物像。如仍看不清，应按上述步骤重做。
　　（3）找到物像后，再调节聚光器和光圈，选择最适光线。
　　（4）油镜使用完毕后，把镜头上升约10mm，并转到一边，用擦镜纸把镜头擦净。如仍擦不干净，可用擦镜纸蘸少许擦镜水或二甲苯轻擦，然后再用干净的擦镜纸擦一遍。
　　（5）有盖片的标本片，可用擦镜纸蘸少许擦镜水或二甲苯，把油擦净。无盖片的标本片，可用拉纸法擦油。方法是：先把一小张擦镜纸盖在油滴上，再滴上二甲苯，平拉擦镜纸，反复几次即可擦净。也可以在二甲苯中把油洗去晾干。
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前言/序言

　　《细胞生物学实验教程》自2004年出版以来，深受读者厚爱。但由于细胞生物学的迅速发展和技术不断更新，以及各学科之间的相互渗透，原书已不能满足教学的需要。为此，我们对教材的内容进行了调整和修订，以适应教学改革的需要。
　　全书包括12章共71个实验，内容既保留了目前在细胞生物学研究领域中经常用到的经典实验，又新增了不少与现代细胞生物学和分子生物学相关的新技术，包括：线粒体膜电位检测，抗性膜和胆固醇去除，细胞电泳技术，DNA、RNA和蛋白质的原位杂交，差异基因表达，酵母中cDNA的表达，细胞凋亡检测，果蝇胚胎的共聚焦显微技术等。书中新增的实验内容有20个，并对细胞减数分裂的内容作了适当的改动，对细胞电泳、细胞凋亡的内容重新作了全面的修改，也删去了一些与其他学科重复的内容。此外，还对部分内容进行了调整，其中把原第八章中的“植物体细胞杂交——原生质体的融合”调到第十一章，把原第九章中的“琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段”调到第十章中，从而使得全书内容更加紧凑。
　　由于《细胞生物学实验教程》是细胞生物学基础实验，因此在实验项目的设置上，选择细胞结构和功能研究所涉及的基本方法，目的是让学生掌握细胞生物学研究最基本的技术。
　　参与本书编写的人员有王金发、何炎明、戚康标、王宏斌、刘兵、冯冬茹等教师，他们长期从事细胞生物学实验教学和研究工作。刘兵老师对第一版全书进行了文字编辑和校对的工作，何炎明老师对再版全书进行了文字编辑和校对工作。
　　由于编者水平有限，难免有所疏漏，敬请广大读者给予批评指正。
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