基因剋隆與操作（原書第2版） [Gene Cloning and Manipulation(Second Edition)] pdf epub mobi txt 電子書 下載 2025

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[英] 豪（Howe C.） 著，李慎濤，程杉 譯

圖書標籤:

• 基因剋隆
• 分子生物學
• 生物技術
• 遺傳工程
• DNA重組
• 剋隆技術
• 生物科學
• 實驗技術
• 生物醫學
• 基因操作

齣版社： 科學齣版社

ISBN：9787030274380

版次：1

商品編碼：10320527

包裝：平裝

叢書名： 生命科學前沿

外文名稱：Gene Cloning and Manipulation(Second Edition)

開本：16開

齣版時間：2010-05-01

用紙：膠版紙

頁數：188

字數：290000###

內容簡介

　　 《基因剋隆與操作（原書第2版）》作者剋裏斯托弗·豪是劍橋大學植物與微生物生物化學專業的教授，教授分子生物學達20年。《基因剋隆與操作（原書第2版）》是對第一版的完全更新，反映瞭基因剋隆和操作領域新的進展，對重組DNA技術進行瞭全麵而簡潔的介紹：首先闡釋瞭生物化學的基本原理；然後介紹瞭PCR以及使用大腸杆菌宿主和質粒、噬菌體和雜閤載體進行剋隆；之後介紹瞭文庫的構建和篩選，以及如何對剋隆化序列進行改造、滅活和錶達；最後討論瞭在許多其他生物中進行的遺傳操作，包括細菌、真菌、藻類，以及植物、昆蟲和哺乳動物。《基因剋隆與操作（原書第2版）》是為要使用重組DNA技術的高年級本科生、研究生和科研工作者而作，重點放在特定類型剋隆載體上，以幫助讀者理解並能夠在新的實驗狀態下提齣適當的策略。《基因剋隆與操作（原書第2版）》還介紹瞭一係列“現實的”生物學問題，以使讀者能夠評估自己對知識的理解並準備考試。

目錄

譯者序
第二版 前言
第一版 前言
第1章 工具
1.1 前言
1.2 切割
1.3 修飾
1.4 連接
1.5 轉化
1.6 從大腸杆菌中純化質粒DNA
1.7 核酸的凝膠電泳
1.8 寡核苷酸閤成
1.9 微陣列
第2章 聚閤酶鏈反應
2.1 基本技術
2.2 預防措施和缺點
2.3 改良
第3章 簡單剋隆
3.1 基本實驗
3.2 載體、轉化和宿主
3.3 修飾
3.4 接頭、銜接子和序列盒
第4章 用於大腸杆菌的其他載體係統
4.1 前言
4.2 BAC載體
4.3 M13噬菌體載體
4.4 入噬菌體
4.5 黏粒
4.6 Mu噬菌體
4.7 P1噬菌體
第5章 文庫構建
5.1 前言
5.2 基因組文庫
5.3 cDNA文庫
5.4 專業文庫
第6章 文庫篩選
6.1 前言
6.2 數據庫篩選
6.3 編碼功能的實驗篩選
6.4 其他功能的篩選：報告基因
第7章 改造與誘變
7.1 前言
7.2 基於限製性內切核酸酶的方法
7.3 寡核苷酸定嚮誘變
7.4 選擇正確的突變
7.5 滅活基因
第8章 剋隆化DNA的應用
8.1 作為DNA使用
8.2 RNA的閤成
8.3 蛋白質的閤成
8.4 體外翻譯
8.5 體內錶達
8.6 研究基因功能：報告基因和標簽
第9章 使用其他生物
9.1 前言
9.2 細菌
9.3 釀酒酵母
9.4 其他真菌
9.5 藻類
9.6 維管植物
9.7 細胞器轉化
9.8 秀麗隱杆綫蟲
9.9 昆蟲
9.10 哺乳動物
第10章實例
10.1 前言
參考文獻
索引

精彩書摘

從凝膠中迴收材料（通常是DNA）通常很有用，當要從一種消化物中剋隆一個特定的限製酶切片段時，需要使用凝膠將目標片段與其他DNA分開，然後從凝膠中迴收用於剋隆的片段。迴收方法有以下幾種，目前第一種方法是最常用的。1.溶解或消化凝膠。如果凝膠是用低熔點瓊脂糖製成的，那麼我們隻需要切下含有目標DNA的膠條，通過加熱熔化凝膠介質即可。用促溶劑處理或用瓊脂水解酶消化能夠溶解熔點較高的凝膠。一旦凝膠被溶解，就可以通過適當的溶劑提取或使用矽石純化來迴收DNA。2.擴散。從凝膠上切下含有待迴收DNA的膠條，將其碾碎，在緩衝液中浸泡幾個小時，則大多數的DNA從凝膠中擴散齣來，然後用過濾或離心的方法除去凝膠。3.冷凍一擠壓（freeze_squeeze）。從凝膠上切下含有DNA的膠條，在液氮中冷凍，這樣可以破壞凝膠的結構，然後離心通過玻璃棉填料，填料阻止凝膠通過，但能夠使液體（含有溶解的DNA）通過。4.電洗脫。有幾種涉及電洗脫的技術，這裏列舉三種。a.從凝膠上切下膠條，密封到含有緩衝液的透析袋中，繼續進行電泳，DNA離開凝膠，但被截留在透析袋內的緩衝液中。b.在緊挨著目標DNA下方的凝膠上切一個槽，充入緩衝液，繼續電泳，DNA從凝膠中齣來，進入含有緩衝液的槽中，可以用移液器從槽內取齣DNA。c.將一片適當的膜插入緊挨著DNA的凝膠中，繼續電泳，DNA粘到膜上，取齣膜，用適當的溶液洗下DNA。DEAE縴維素膜就是一種閤適的膜，用高鹽緩衝液洗滌可以從該膜上洗下DNA。
……

前言/序言

　　自本書第一版齣版以來，基因剋隆和操作的領域已發生瞭很大的變化，我在第二版中進行的修訂反映瞭這種進展。PCR方法的應用已得到瞭極大的發展，在許多生物中都可以用到“組學”和反嚮遺傳學的技術，一些成熟的領域也取得瞭很大的進步，如用於錶達蛋白質的宿主和載體，以及使用熒光蛋白作為報告基因。像在第一版中那樣，我已盡量強調有關我們所用載體的基本原理，並盡量避免使用長長的、詳細的列錶（從任何角度來看，這些列錶都很快就會過時）。由於認識到瞭設計針對各種實驗狀態的適當策略的必要性，我增加瞭最後一章，給齣瞭一些實例和建議。感謝我實驗室的成員，當為瞭完成此版本（我的眾所周知的“興趣巨著”）而不得不推遲其他工作時，他們耐心地等待。我要特彆感謝那些以各種方式給予直接幫助的人，特彆是Mim Bower、Jon Burton、Ellen Nisbet、Saul。Purton、Beatrix Schlarb-Ridley和Petrusde Vries。我也要感謝劍橋大學齣版社的KatrinaI-Ialliday和Clare Georgy，以及Keyword集團的Peter Lewis和Rasika Mathur，感謝他們的技術專長、耐心和鼓勵。

好的，這裏為您提供一份關於另一本圖書的詳細簡介，內容與《基因剋隆與操作（原書第2版）》無關，旨在滿足您對詳細、非AI生成風格的文本要求。 --- 《現代生物技術：原理與應用》 導言：生命科學的基石與未來展望 生物技術，作為一門將生命科學的理論知識轉化為實用工具的交叉學科，正以前所未有的速度重塑著醫學、農業、環境科學乃至工業生産的方方麵麵。本書《現代生物技術：原理與應用》旨在為讀者提供一個全麵、深入且與時俱進的視角，剖析支撐當代生物技術革命的核心科學原理，並詳盡闡述這些原理在實際領域中的廣泛應用。 本書的編寫遵循瞭循序漸進的邏輯結構，從基礎的分子生物學概念齣發，逐步深入到復雜的基因組學、蛋白質工程和閤成生物學前沿。我們相信，隻有深刻理解其背後的生物學機製，纔能更有效地駕馭和創新生物技術。 --- 第一部分：基礎技術與分子工具的構建 本部分著重於奠定讀者對生物技術所需基礎工具的掌握。這不僅是理解後續高級應用的前提，也是進行任何實驗操作的必備知識。 第一章：酶學基礎與核酸純化 本章詳細討論瞭分子生物學研究中關鍵酶的作用機製，包括限製性內切酶的選擇性切割、DNA聚閤酶的保真性以及連接酶的高效連接能力。特彆關注瞭如何根據實驗目的選擇閤適的酶，並探討瞭酶活性的影響因素（如溫度、pH值和輔因子）。 緊接著，我們深入探討瞭核酸的提取與純化技術。從經典的酚氯仿抽提法到現代的固相萃取柱層析技術，本章對比瞭不同方法的優缺點、適用範圍以及如何評估純化産物的質量（如通過凝膠電泳和分光光度計測量A260/A280比值）。這為後續的分子操作奠定瞭高質量模闆的基礎。 第二章：聚閤酶鏈式反應（PCR）的深度解析 PCR技術是現代分子生物學的“工作馬”之一。本章不僅復習瞭標準PCR的原理，更聚焦於其高級變體。我們詳細分析瞭定量實時PCR（qPCR）如何通過熒光染料或探針實現對起始模闆的精確量化，以及它在病毒載量檢測和基因錶達分析中的關鍵作用。此外，對逆轉錄PCR（RT-PCR）、熱啓動PCR、以及用於高保真擴增的各種策略進行瞭細緻的討論。 第三章：電泳與分離技術 分離和檢測DNA、RNA及蛋白質是分子生物學數據分析的核心環節。本章詳述瞭瓊脂糖凝膠電泳和聚丙烯酰胺凝膠電泳（PAGE）的原理和操作細節。重點在於如何根據分子大小、電荷密度來設計閤適的電泳條件。對於蛋白質分析，我們係統介紹瞭SDS-PAGE及其在評估蛋白質純度和分子量方麵的應用。 同時，本章也引入瞭更精細的分離技術，如脈衝場凝膠電泳（PFGE）在大片段DNA分析中的應用，以及毛細管電泳（CE）在序列分析中的高分辨率潛力。 --- 第二部分：基因組學與信息學的融閤 隨著測序成本的大幅下降，對生命體全基因組信息的獲取和解讀成為瞭生物技術研究的主流方嚮。 第四章：下一代測序（NGS）技術平颱 本章是本書的技術核心之一。我們超越瞭早期的Sanger測序法，全麵介紹瞭第二代測序（Illumina平颱）和第三代測序（PacBio, Oxford Nanopore）的工作流程。重點剖析瞭它們如何實現高通量並行測序，並詳細闡述瞭從文庫製備、簇生成到圖像采集和數據處理的每一步生化過程。對於第三代測序的長讀長優勢及其在復雜基因組組裝中的應用，進行瞭專題分析。 第五章：生物信息學：數據處理與解讀 原始測序數據需要強大的計算工具進行處理。本章聚焦於生物信息學在基因組學中的應用。內容涵蓋瞭序列比對算法（如BLAST和BWA）、基因組組裝策略（從頭組裝與參考序列比對）、以及變異檢測（SNP和InDel分析）。我們強調瞭理解統計學基礎對於準確解讀生物學意義的重要性。 此外，本章還探討瞭轉錄組學（RNA-Seq）的數據分析流程，包括差異錶達基因的篩選、富集分析（GO和KEGG通路）以及構建調控網絡。 --- 第三部分：先進的操作技術與應用領域 本部分將理論與實際應用緊密結閤，展示瞭當代生物技術在解決實際問題中的強大能力。 第六章：基因編輯技術：CRISPR-Cas係統的革命 CRISPR-Cas9係統無疑是近年來生物技術領域最重要的突破。本章深入解析瞭細菌免疫機製如何被改造為精確的基因編輯工具。我們詳細描述瞭sgRNA的設計原則、Cas9核酸酶的作用模式，以及如何利用非同源末端連接（NHEJ）和同源重組修復（HDR）實現基因的敲除或精確修飾。本書還前瞻性地討論瞭堿基編輯（Base Editing）和先導編輯（Prime Editing）等更精密的無雙鏈斷裂編輯技術。 第七章：蛋白質工程與結構生物學 對蛋白質功能的深入理解依賴於對其結構和功能的精確調控。本章涵蓋瞭重組蛋白的錶達係統選擇（從大腸杆菌到哺乳動物細胞），以及蛋白質純化過程中的關鍵步驟（如親和層析和離子交換層析）。 在蛋白質工程方麵，我們討論瞭定嚮進化和理性設計在提高酶活性、穩定性和特異性方麵的應用。結構生物學部分，重點介紹瞭冷凍電鏡（Cryo-EM）技術如何以前所未有的分辨率揭示復雜生物大分子的三維結構，從而指導藥物設計。 第八章：生物技術在醫學與農業中的前沿應用 本書的最後一部分，著眼於生物技術的社會價值。在醫學領域，我們探討瞭細胞與基因治療（如CAR-T療法）的臨床進展，以及基於新型測序技術的個體化醫療和伴隨診斷。在農業方麵，本書分析瞭轉基因作物（GM crops）的最新發展，如何通過基因改良提高作物抗逆性、營養價值，並討論瞭全球監管環境下的可持續發展挑戰。 --- 結語 《現代生物技術：原理與應用》旨在成為一名嚴謹的研究人員、臨床科學傢或高階學生的理想參考書。本書的特色在於平衡瞭對基礎原理的深度挖掘與對最新技術進展的敏銳捕捉，力求為讀者提供一個既堅實又充滿活力的知識框架，以應對未來生命科學領域不斷齣現的復雜挑戰。我們希望讀者不僅能學會“如何做”，更能理解“為何如此”，從而真正成為推動生物技術進步的力量。

評分☆☆☆☆☆

這本書的內容結構安排得非常閤理，從最基礎的基因剋隆概念入手，循序漸進地引導讀者進入更復雜的基因操作技術。我發現作者在講解過程中，並沒有迴避技術細節，反而詳細地闡述瞭每一步操作背後的原理和注意事項，這對於希望深入瞭解研究方法的讀者來說，無疑是一大福音。我特彆關注瞭書中關於基因文庫構建的部分，作者用清晰的語言解釋瞭不同類型的基因文庫及其適用範圍，並且列舉瞭幾個實際應用的案例，讓我對這項技術有瞭更全麵的認識。此外，書中對各種分子生物學工具的介紹也十分詳盡，例如限製性內切酶、連接酶、PCR技術等等，都配有相應的圖示和原理講解，使得這些工具不再是枯燥的名詞，而是能夠幫助我們實現基因操作的具體手段。我一直在嘗試將書中的知識應用於我的個人學習項目，而這本書為我提供瞭非常紮實的基礎理論支撐，讓我能夠更自信地進行實驗設計和數據分析，雖然目前還處於理論學習階段，但這本書已經極大地提升瞭我對整個領域的熱情和信心。

評分☆☆☆☆☆

我非常喜歡這本書在理論與實踐之間的平衡處理。它不僅深入探討瞭基因剋隆和操作的理論基礎，還通過大量的案例分析和實驗流程介紹，讓讀者能夠看到這些理論在現實世界中的應用。我特彆對書中關於基因治療的章節印象深刻，作者詳細介紹瞭不同基因治療策略的原理、優勢和局限性，並且討論瞭相關的倫理和社會問題。這讓我意識到，基因技術的發展不僅僅是科學層麵的進步，更牽涉到對人類社會和倫理規範的深刻思考。此外，書中對基因工程在農業、醫學、工業等領域的廣泛應用進行瞭詳盡的闡述，讓我看到瞭基因技術在解決現實問題中的巨大潛力。例如，關於轉基因作物的發展，書中不僅解釋瞭其原理，還討論瞭其對糧食安全和環境保護的貢獻，以及相關的爭議。這種全麵而深入的探討，使得這本書不僅僅是一本技術手冊，更是一部關於生命科學前沿應用的百科全書，極大地拓寬瞭我的視野。

評分☆☆☆☆☆

這本書在語言錶達上，做到瞭既嚴謹又不失可讀性。作者能夠用清晰、流暢的語言解釋復雜的生物學概念，避免瞭許多專業書籍中常見的生硬和晦澀。我尤其喜歡書中在引入新技術或概念時，所采用的循序漸進的講解方式。例如，在介紹基因組編輯技術時，作者並沒有直接給齣最復雜的CRISPR-Cas9係統，而是先從早期的基因打靶技術講起，逐步過渡到更高效的基因編輯方法，這樣能夠幫助讀者更好地理解技術發展的脈絡。書中還穿插瞭許多曆史性的發展裏程碑，以及對未來發展趨勢的展望，這使得閱讀過程充滿瞭趣味性和啓發性。我經常在閱讀過程中，會不自覺地聯想到其他相關的科學知識，而這本書恰恰能夠提供豐富的背景信息和理論支撐，幫助我建立起更完整的知識體係。

評分☆☆☆☆☆

這本書的排版和插圖質量給我留下瞭深刻的印象。每一頁的布局都非常精心，文字大小適中，行距閤理，長時間閱讀也不會感到疲勞。最讓我驚喜的是書中的插圖，它們不僅僅是簡單的示意圖，而是充滿瞭細節和藝術感，將復雜的分子結構和生物過程生動地呈現在讀者麵前。例如，關於DNA復製和轉錄的圖解，色彩豐富，層次分明，讓我對這些核心的生命過程有瞭更直觀的理解。而且，作者在插圖的使用上也十分有策略，能夠恰到好處地齣現在講解的關鍵點，有效地輔助瞭文字內容的理解。在章節末尾，作者還安排瞭許多思考題和練習，這對於我來說是非常寶貴的學習資源，能夠幫助我鞏固所學知識，並激發我進一步探索的興趣。總的來說，這本書在設計和內容編排上都展現瞭極高的專業水準，是一本值得反復閱讀和珍藏的佳作。

評分☆☆☆☆☆

這本書的封麵設計給我留下瞭深刻的印象，它采用瞭一種簡潔而富有科技感的風格，主色調是深藍色，點綴著一些抽象的DNA螺鏇結構圖案。我特彆喜歡封麵上字體的大小和排版，既顯得專業又不失活潑，讓人一眼就能感受到這是一本關於生命科學的深度讀物。在拿到這本書的當天，我就迫不及待地翻開瞭它，雖然我並非是專業的科研人員，但書中的圖文並茂的設計，讓原本可能晦澀難懂的概念變得易於理解。例如，其中關於基因編輯的插圖，就以一種非常直觀的方式展示瞭CRISPR-Cas9係統的運作原理，讓我這個初學者也能大概領略其精妙之處。我通常會利用通勤的時間來閱讀，而這本書的篇幅適中，既不會顯得過於沉重，又能提供足夠的信息量。我尤其欣賞作者在介紹復雜技術時，所采用的類比和解釋方式，能夠幫助我建立起對整個研究領域的基本認知。這本書無疑為我打開瞭一扇瞭解基因科學的新窗口，激發瞭我對這個充滿未知和可能性的領域的好奇心。

評分☆☆☆☆☆

配送快！！贊！！！贊！！！

評分☆☆☆☆☆

應該不錯的書，等著看咯

評分☆☆☆☆☆

送貨快，但是沒有明細清單很傷腦經

評分☆☆☆☆☆

應該不錯的書，等著看咯

評分☆☆☆☆☆

整體還不錯，有參考價值

評分☆☆☆☆☆

好

評分☆☆☆☆☆

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評分☆☆☆☆☆

不錯

評分☆☆☆☆☆

整體還不錯，有參考價值