現代蛋白質工程實驗指南 pdf epub mobi txt 電子書 下載 2025

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[德] 阿恩特 等 著，蘇曉東 譯

圖書標籤:

• 蛋白質工程
• 分子生物學
• 生物技術
• 實驗指導
• 基因工程
• 蛋白質錶達
• 蛋白質修飾
• 酶工程
• 生物化學
• 生命科學

齣版社： 科學齣版社

ISBN：9787030301222

版次：1

商品編碼：10502189

包裝：平裝

叢書名： “十一五”國傢重點圖書齣版規劃項目·生命科學實驗指南係列

開本：16開

齣版時間：2011-03-01

用紙：膠版紙

頁數：234

內容簡介

　　現代蛋白質工程是將分子生物學、蛋白質結構與功能分析、理論計算，以及生物化學有機結閤的學科，其目標是快速及高效率地發展和改進實用的或有價值的蛋白質。《現代蛋白質工程實驗指南》分為兩個部分，一部分主要介紹瞭蛋白質理性設計的策略，包括理論計算方法，利用一些很有說服力的例證說明所設計蛋白質的全新特性，闡述瞭如何設計具有目標特性的蛋白質，並選擇瞭很多如蛋白質一蛋白質相互作用、DNA結閤、抗體模擬，以及酶活性設計等具體實例；第二部分蛋白質的定嚮進化技術主要介紹瞭包括進化庫設計的一般方法、進化庫質量的統計評估、核酸混編的新方法，以及不同的選擇篩選策略等。同時也給齣瞭不同特性體外定嚮進化的一些實例，如蛋白質摺疊類型、摺疊熱穩定性以及酶活性等。
　　《現代蛋白質工程實驗指南》適閤蛋白質科學各個層次的科研工作者，特彆是從事相關領域研究的高年級大學生及研究生參考使用。

目錄

譯者序
前言
原作者及其單位
第一部分 蛋白質工程中的設計與計算策略
1 采用計算方法的組閤式蛋白質設計策略
2 大腸杆菌中非天然氨基酸的整體摻人
3 盤繞螺鏇結構的設計和優化技巧
4 基於鈣調素與熒光蛋白融閤的鈣指示劑
5 人造鋅指蛋白的設計和閤成
6 獨體——基於縴連蛋白類型Ⅲ結構域框架的抗體模擬
7 位點特異性核酸內切酶的蛋白質工程

第二部分 蛋白質工程中的進化策略
8 蛋白質庫的設計和篩選——概率計算
9 基於極性與非極性氨基酸的“二元組圖”進行蛋白質設計
10 利用核苷酸交換和剪切技術進行DNA碎裂和定嚮進化
11 簡並寡核苷酸基因混編
12 M13噬菌體衣殼蛋白改造在改良噬菌體展示技術中的應用
13 核糖體失活展示係統
14 分隔式自我復製：聚閤酶和其他酶的定嚮進化的一個新方法
15 Raf蛋白Ras結閤結構域的簡並進化庫閤成以及利用片段互補法快速篩選二氫葉酸還原酶的快速摺疊且穩定的剋隆
16 應用末端截切、進化、再延長技術提高酶穩定性的方法
索引

精彩書摘

　　1.1.3 蛋白質設計的概率性方法
　　在蛋白質涉及的範圍內，我們用定點氨基酸概率而不是特定的序列來描述“概率性蛋白質設計”。相對於定嚮的或決定論方法，概率性方法是常用於對問題隻有部分信息場閤的定量科學。對蛋白質設計，摺疊過程的復雜性和不確定性促成瞭這樣的概率性方法。蛋白質摺疊是一個復雜的動態過程，有無數的相互作用規定摺疊狀態。每一個導緻穩定的非共價鍵相互作用在大小上都是可以相互比較的，似乎沒有哪一個具有壓倒優勢，以緻於在摺疊中起決定作用。定量化這些相互作用的辦法，必定是近似的（見注1）。概率性設計方法也直接提供非常有用的序列信息，特彆是在結構上重要的氨基酸。氨基酸概率可以引導特定序列的設計，也能夠凸顯能容忍突變、對結構隻有微小影響的位點；在幾輪蛋白質設計之後，這樣的位點可以成為用來改變的目標。
　　概率性方法可以以幾種方式應用於蛋白質設計。序列應該以符閤計算齣的概率方式生成。首先，最直接的選擇是一個共用序列，或在每一個位點用最可能的氨基酸組成的.序列。在必要時，可以重復地計算，逐次地增加蛋白質中（已經確定的）的殘基。用這樣的方法，已得到114個殘基的雙核金屬蛋白和一個完整膜蛋白的可溶性變體。其次，計算概率可用於引導對序列的搜索，已提齣基於MonteCarlo的方法。
……

前言/序言

好的，這是一本關於古籍修復與保護技術的圖書簡介： --- 塵封的記憶：古代文獻的修復、保存與傳承 本書聚焦於珍貴曆史文獻的物理與化學保護、科學修復工藝以及可持續的典藏策略。 隨著時間的流逝，紙張、絲帛、皮革等古代載體材料無不可避免地麵臨著環境侵蝕、生物侵害和化學降解的嚴峻挑戰。本書旨在為博物館、檔案館、圖書館的專業人員、古籍修復師，以及對文物保護懷有熱忱的研究者和學生，提供一套全麵、深入且極具操作性的技術指南和理論框架。 本書並非停留在傳統修補技藝的簡單羅列，而是深度融閤瞭現代材料科學、分析化學與文物保護倫理，構建瞭一套“最小乾預、可逆性優先”的修復哲學。 第一部分：文獻載體的劣化機製與診斷 本部分著重於理解“病因”。古代文獻的載體材料復雜多樣，其受損機理也各不相同。 第一章：紙張的化學衰變與物理損傷 詳細剖析瞭古代造紙原料（如麻、桑皮、竹、草）的化學成分，重點闡述瞭酸性殘留物、木質素氧化以及光照對縴維素大分子鏈的斷裂作用。引入紙張老化加速測試（Accelerated Aging Tests）的標準流程，包括熱老化、濕熱老化及光照老化，用於預測文獻的長期穩定性。 酸度評估： 介紹多種無損或微損的pH值測定方法，如錶麵酸度計（pH Pen）和非接觸式光譜分析（如近紅外反射光譜）。 縴維結構分析： 利用偏光顯微鏡（PLM）和掃描電子顯微鏡（SEM）觀察紙張的縴維形態、交織結構以及受損部位的微觀特徵。 第二章：絲帛、皮革及其他非紙質載體的保護學 探討瞭古代紡織品（如唐宋的絹、羅、綾）在蛋白質水解和色素變色方麵的特殊問題。對於皮革裝幀，深入分析瞭鞣製劑（如植鞣劑中的丹寜酸）對膠原縴維的長期腐蝕效應。 黴菌與生物侵害： 係統分類瞭常見於文物環境中的真菌、細菌的種類及其代謝産物，並提齣瞭基於環境控製和生物防治的綜閤管理方案，避免使用強效劇毒殺菌劑。 第三章：早期裝訂結構與題跋的保護挑戰 古代書籍裝幀（如蝶裝、經摺裝、綫裝）本身即是文化遺産的一部分。本章細緻描述瞭如何識彆並記錄原裝訂的結構特徵，以及在修復過程中如何保持其曆史形態的完整性。同時，關注書頁邊緣的題跋、批注等附著物的保護，區分其與主體的材質差異及保護優先級。 第二部分：科學修復技術與材料選擇 本部分是本書的核心操作指南，強調選擇具有長期穩定性和可逆性的修復材料。 第四章：環境控製下的預處理與清潔技術 清潔是修復的第一步，也是最關鍵的非乾預性步驟。 錶麵去汙： 詳細介紹使用定製的清潔凝膠（如高分子水凝膠、高分子吸附劑）進行靶嚮性去汙，用於去除錶麵積塵、油汙或汙染物，精確控製濕度的滲透深度。 水處理： 針對全書浸泡（浸書）操作，提齣精細化的水質控製標準（去離子水、緩衝液的配置），以及浸泡時長、脫酸效率的精確監測技術。 第五章：脫酸與穩定化處理的策略評估 闡述瞭脫酸技術從傳統方法到現代技術的演變。重點介紹瞭無水脫酸技術（如使用氣相或溶劑中的碳酸鈣/鎂懸浮液），適用於對水敏感的文獻。討論瞭添加螯閤劑（如EDTA）在去除金屬離子催化劑方麵的應用與局限性。 第六章：修復用紙張的選擇與製作 修復用紙的選擇標準遠超“顔色相近”。本章強調修復紙張必須匹配原書的物理性能（如抗張強度、伸縮率、密度、透光度）。 手工抄造技術： 詳細指導如何根據不同年代、地域的古籍特徵，使用特定原料（如竹漿、草漿）進行小規模、仿古的手工抄造，確保修復材料的“同源性”。 補洞與接紙： 介紹利用不同薄厚度的手工紙進行針對性襯墊和暈染性接補技術，實現視覺上的“隱形修復”。 第七章：粘閤劑的化學與應用：從傳統到現代 粘閤劑是連接曆史與未來的橋梁。本書對各類粘閤劑進行瞭詳盡的化學分析和性能對比。 天然膠： 詳細解析瞭動物膠（皮膠、魚鰾膠）與澱粉膠（小麥澱粉、葛根澱粉）的提取、精製、儲存條件及其水解穩定性。 閤成高分子粘閤劑的審慎應用： 討論瞭如PVA、甲基縴維素（MC）在特定場景下的優勢與缺陷，特彆是其長期遷移性與可逆性評估標準。 第三部分：典藏環境的優化與未來挑戰 第八章：預防性保護：環境參數的精確控製 詳細闡述瞭影響文獻壽命的關鍵環境因素：溫度、相對濕度（RH）、光照強度與紫外綫輻射。本書提供瞭一套基於“環境檔案”的風險評估模型，指導讀者設定最佳的溫濕度波動範圍，尤其關注不同地區（如高海拔、沿海地區）的特殊氣候應對策略。 第九章：數字化存檔與實體保護的協同 討論瞭高分辨率成像技術在記錄文獻“修復前狀態”中的重要性。同時，探討瞭數字化圖像數據如何反哺修復方案的設計——例如，通過光譜成像技術分析墨色成分，指導修復師選擇對應的溶劑體係。 第十章：倫理考量與國際標準 修復決策是基於科學，但必須服務於文化價值。本章深入探討瞭文物修復的“修舊如舊”與“如新”之間的哲學辯論，強調修復乾預的記錄、透明度及可追溯性。引用國際文物保護組織（如ICCROM、ICOM-CC）的最新準則，指導讀者建立完善的修復檔案和材料使用聲明。 --- 本書的圖錶豐富，涵蓋瞭大量修復流程的“前後對比圖”、微觀結構“對比圖譜”以及操作步驟的“流程圖解”，是一本兼具深度理論基礎和前沿實踐指導的綜閤性工具書。

評分☆☆☆☆☆

這本書的語言風格非常通俗易懂，沒有太多晦澀難懂的專業術語，即便是我這樣的初學者，也能很快理解其中的內容。而且，它不僅僅是在講解技術，更是在傳授一種解決問題的思路和科學思維方式。書中穿插瞭很多作者在實際實驗中遇到的坑和經驗教訓，這些“乾貨”信息對我來說價值連城，讓我少走瞭很多彎路。我非常贊賞書中對於“失敗的實驗”的分析，它教會我如何從錯誤中學習，而不是僅僅看到成功的案例。總而言之，這是一本非常實用且具有啓發性的實驗指南。

評分☆☆☆☆☆

我之前對蛋白質工程一直停留在理論層麵，知道它能改造蛋白質，但具體怎麼做，有哪些技巧，有哪些注意事項，始終是一團迷霧。直到我翻閱瞭這本《現代蛋白質工程實驗指南》，纔算真正踏入瞭實際操作的大門。這本書的講解非常細緻，從最基礎的實驗材料準備，到各種常用工具的使用方法，都進行瞭圖文並茂的介紹。比如，在酶切反應部分，作者詳細列齣瞭不同類型酶切酶的特性、最佳反應條件，以及如何避免副反應的發生。對於新手來說，這些信息簡直是救命稻草，讓我信心倍增。

評分☆☆☆☆☆

我一直對蛋白質工程領域的一些前沿技術感到好奇，但苦於沒有係統的學習資料。《現代蛋白質工程實驗指南》恰恰填補瞭這一空白。書中對諸如定嚮進化、理性設計、高通量篩選等技術都有詳盡的介紹，不僅僅是概念的講解，更重要的是提供瞭相應的實驗方案和案例分析。我特彆喜歡其中關於“如何設計一個有效的定嚮進化庫”的部分，作者從底物多樣性、酶催化機製等角度齣發，給齣瞭非常具體的指導，並輔以多個成功案例，讓我能更清晰地理解這些復雜技術是如何一步步實現的。

評分☆☆☆☆☆

說實話，一開始拿到這本書，我最關心的是它能否解答我在實際實驗中遇到的那些“疑難雜癥”。我是一個比較“動手派”的學習者，理論知識我可以通過其他途徑獲取，但關鍵在於怎麼把這些理論轉化為實際操作，並且能得到可靠的結果。《現代蛋白質工程實驗指南》在這方麵做得相當齣色。它不僅僅是羅列瞭各種實驗步驟，更重要的是，它深入剖析瞭每一步操作背後的原理，以及可能齣現的各種問題和相應的解決方案。例如，在蛋白質錶達和純化章節，作者詳細討論瞭不同錶達係統的優缺點，以及如何根據目標蛋白的特性選擇閤適的純化策略，還提供瞭大量針對常見純化難題的排查思路，這對我來說簡直是醍醐灌頂。

評分☆☆☆☆☆

作為一名需要獨立完成科研項目的學生，我深知實驗的可重復性和結果的可靠性至關重要。《現代蛋白質工程實驗指南》在這方麵給我帶來瞭極大的啓發。書中非常強調實驗設計的嚴謹性和數據分析的規範性，從樣本製備、對照設置，到統計方法的選擇，都有詳細的指導。我尤其欣賞其中關於“如何評估蛋白質功能活性”的章節，作者列舉瞭多種生物化學和生物物理學的測定方法，並對比瞭各自的優缺點和適用範圍，還強調瞭實驗結果的重復性驗證的重要性，這對於保證研究的科學性非常有幫助。

評分☆☆☆☆☆

價格比門麵便宜很多，正品價格比門麵便宜很多，正品價格比門麵便宜很多，正品價格比門麵便宜很多，正品價格比門麵便宜很多，正品

評分☆☆☆☆☆

好，很方便，不用往外跑瞭

評分☆☆☆☆☆

適閤有一定工作經驗的科研人員備用

評分☆☆☆☆☆

例子不錯，相關領域值得一讀

評分☆☆☆☆☆

例子不錯，相關領域值得一讀

評分☆☆☆☆☆

《現代蛋白質工程實驗指南》適閤蛋白質科學各個層次的科研工作者，特彆是從事相關領域研究的高年級大學生及研究生參考使用。

評分☆☆☆☆☆

蛋白質實驗指南圖書，頂。

評分☆☆☆☆☆

現代蛋白質工程是將分子生物學、蛋白質結構與功能分析、理論計算，以及生物化學有機結閤的學科，其目標是快速及高效率地發展和改進實用的或有價值的蛋白質。《現代蛋白質工程實驗指南》分為兩個部分，第一部分主要介紹瞭蛋白質理性設計的策略，包括理論計算方法，利用一些很有說服力的例證說明所設計蛋白質的全新特性，闡述瞭如何設計具有目標特性的蛋白質，並選擇瞭很多如蛋白質一蛋白質相互作用、DNA結閤、抗體模擬，以及酶活性設計等具體實例；第二部分蛋白質的定嚮進化技術主要介紹瞭包括進化庫設計的一般方法、進化庫質量的統計評估、核酸混編的新方法，以及不同的選擇篩選策略等。同時也給齣瞭不同特性體外定嚮進化的一些實例，如蛋白質摺疊類型、摺疊熱穩定性以及酶活性等。

評分☆☆☆☆☆

現代蛋白質工程是將分子生物學、蛋白質結構與功能分析、理論計算，以及生物化學有機結閤的學科，其目標是快速及高效率地發展和改進實用的或有價值的蛋白質。《現代蛋白質工程實驗指南》分為兩個部分，第一部分主要介紹瞭蛋白質理性設計的策略，包括理論計算方法，利用一些很有說服力的例證說明所設計蛋白質的全新特性，闡述瞭如何設計具有目標特性的蛋白質，並選擇瞭很多如蛋白質一蛋白質相互作用、DNA結閤、抗體模擬，以及酶活性設計等具體實例；第二部分蛋白質的定嚮進化技術主要介紹瞭包括進化庫設計的一般方法、進化庫質量的統計評估、核酸混編的新方法，以及不同的選擇篩選策略等。同時也給齣瞭不同特性體外定嚮進化的一些實例，如蛋白質摺疊類型、摺疊熱穩定性以及酶活性等。