实验室解决方案：基因敲除实验指南（原著第2版）（导读版） pdf epub mobi txt 电子书 下载 2025

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[德] 屈恩 著

图书标签:

• 基因敲除
• 基因编辑
• 实验指南
• 生物技术
• 分子生物学
• 实验室技术
• 科研方法
• 基因工程
• 小鼠模型
• CRISPR

出版社： 科学出版社

ISBN：9787030343109

版次：2

商品编码：11051622

包装：精装

开本：16开

出版时间：2012-05-01

页数：516

正文语种：中文

编辑推荐

　　 《实验室解决方案：基因敲除实验指南（原著第2版）（导读版）》整合了基因打靶和小鼠遗传学领域研究的突出贡献以及延伸而来的众多经验教训。本书沿袭了《分子生物学方法》系列丛书的成功模式，提供了完整、详细、既适用于初学者又适用于资深专家的实验操作指南。新版不止强调了过去七年里新的基因突变技术的发展，也囊括了经典基因打靶技术的基本方法。本书共25章分为四个部分，分别介绍了胚胎干细胞基因诱变、干细胞操作、基因工程小鼠的制备和突变体表型分析。

内容简介

　　 小鼠和人类基因组测序完成后，哺乳动物基因的功能鉴定及其分子互作网络的阐明成为生命科学研究的下一个主要任务，小鼠基因组为这些研究提供了方便且重要的模型。《实验室解决方案：基因敲除实验指南（原著第2版）（导读版）》的多位撰稿人在基因打靶和小鼠遗传学领域有着丰富的研究经验，他们全面介绍了分步骤的实验方案。除了着重阐述近几年发展起来的多种基因突变技术，还涉及胚胎干细胞的基因修饰、干细胞操作、基因工程小鼠的制备和突变型分析等。《实验室解决方案：基因敲除实验指南（原著第2版）（导读版）》秉承Sprjnger《分子生物学方法》系列丛书的一贯风格，阐述明晰、便于使用，各章包括内容简介，必备材料与试剂的清单，易于操作的实验室方案、疑难问题的注意事项和易犯失误的避免。本书第二版全面更新、专业，由经验丰富的研究者提供了切实可行的实验方案，对本领域的初涉者和遗传学领域的研究人员而言是一本极具价值的参考书。

内页插图

目录

前言
撰稿人
1．突变小鼠综述
第一部分：胚胎干细胞中的基因修饰
2．利用同源重组进行基因打靶载体的构建
3．基因捕获载体和诱变作用
4．在胚胎干细胞中的染色体工程技术
5．通过寡核苷酸单链DNA在胚胎干细胞的基因修饰
6．shRNA转基因小鼠的制备
7．利用甲基磺酸乙酯对小鼠胚胎干细胞的诱变

第二部分：干细胞操作
8．小鼠胚胎干细胞的基因打靶
9．小鼠胚胎干细胞的操作
10．胚胎干细胞流程的建立
11．双基因敲除胚胎干细胞的制备
12．体外小鼠胚胎干细胞全能性差异分析
13．胚胎干细胞克隆及小鼠核移植

第三部分：小鼠遗传工程
14．小鼠囊胚的分离，显微注射及移植
15．嵌合体的聚集：包括胚胎干细胞，二倍体，四倍体胚胎
16．利用八细胞胚胎干细胞显微注射获得全能胚胎干细胞F0代小鼠
17．利用细菌人工染色体进行Cre重组表达转基因小鼠的制备
18．诱导小鼠
19．建立和应用Cre重组酶转基因数据库
20．在小鼠中进行转座子诱变
21．慢病毒转基因技术
22．精子冷冻保存和体外受精

第四部分：表型分析
23．在转基因小鼠的表型中遗传背景的影响
24．突变小鼠的病理表型
25．首要系统表型
索引

前言/序言

好的，这是一份为您准备的图书简介，内容专注于《实验室解决方案：基因敲除实验指南（原著第2版）（导读版）》之外的科学主题，力求详实且具有专业性。 --- 图书简介：《细胞信号传导：调控网络与疾病机制》 导言：生命活动的精细调控 生命体是一个由无数分子机器精密协调运作的复杂系统。在这些过程中，细胞信号传导构成了生物信息传递的“高速公路”。它决定了细胞如何感知外界环境变化，如何对刺激作出反应，并最终调控生长、分化、代谢乃至凋亡等关键生命活动。任何信号通路上的微小失调，都可能引发严重的生理或病理后果，例如癌症、神经退行性疾病和自身免疫性疾病。 本书《细胞信号传导：调控网络与疾病机制》旨在提供一个全面、深入且与时俱进的视角，剖析当前细胞信号研究的前沿进展，重点聚焦于信号通路的复杂性、交谈（crosstalk）以及它们在维持稳态和引发疾病中的核心作用。本书内容摒弃了对基础分子生物学工具的详尽介绍，而是将核心篇幅聚焦于信号网络本身的结构、动态学以及临床转化潜力。 第一部分：核心信号通路与分子机器 本部分系统梳理了被认为构成现代细胞通讯基石的几大经典信号通路，但我们侧重于探讨其在动态环境下的调控细节而非基础机制的描述。 1. 膜受体与G蛋白偶联受体（GPCRs）的动态激活： 我们将深入探讨GPCRs如何通过构象变化捕获信号，并激活下游的G蛋白异源三聚体。重点分析G蛋白亚基的特异性激活机制，以及受体后修饰（如磷酸化和泛素化）对信号振幅和持续性的实时调控。研究视角将侧重于受体偏性激动剂（biased agonism）的分子基础及其在药物设计中的应用前景，而非单纯的信号开启步骤。 2. 酪氨酸激酶受体（RTKs）的网络架构： RTKs是细胞生长和增殖信号的核心节点。本书详细分析了PDGF、EGF、VEGF等关键受体家族的配体结合、二聚化与自磷酸化事件。区别于基础教材的静态描述，我们着重探讨了受体胞内结构域的“对接蛋白库”——即各种SH2/PTB结构域蛋白如何根据磷酸化位点的精确组合，选择性地组装信号复合物，从而实现信号的分支（branching）。 3. 细胞因子与JAK/STAT通路的高级解析： JAK/STAT系统是免疫应答和造血过程的关键调控者。本章聚焦于信号的“放大效应”：单个细胞因子结合如何通过JAK的循环催化激活多个STAT分子，以及STAT的核转运、DNA结合特异性与其转录调控目标基因的差异性。尤其关注STAT蛋白之间的异源二聚体形成及其对细胞命运决定的影响。 第二部分：信号网络中的关键节点与调控机制 本部分将焦点从单一通路转移到连接不同通路的复杂网络结构，探讨信号的整合与决策机制。 4. MAP激酶级联反应（MAPK Cascades）的振荡与模式形成： MAPK通路（如ERK, JNK, p38）是细胞对环境压力做出反应的通用系统。我们不再简单列举三级激酶，而是深入分析其动力学特性——包括信号振荡（oscillation）的生成机制（如负反馈回路的引入）以及这些时间模式如何被细胞精确读取，以指导不同的细胞命运（如暂时激活vs.永久激活）。 5. 磷脂信号分子（Phosphoinositides）的膜锚定与定位作用： 磷脂酰肌醇激酶（PI3K）及其下游的AKT/PKB通路是生存和代谢的核心。本章重点阐述磷脂信号分子（如PIP3）如何在不同的细胞区室（膜、细胞质、核）精确生成和降解，以及它们如何作为“分子码”来招募和定位特定信号蛋白，实现信号在膜表面的空间限制和时序控制。 6. 表观遗传与信号传导的深度耦合： 信号通路并非孤立地作用于基因转录的“开关”，它们直接影响染色质的可及性。本部分详细探讨了信号分子（如激酶或特定的转录因子）如何直接修饰组蛋白修饰酶（如HATs或HDACs）或染色质重塑因子，从而实现信号对基因表达的长期、记忆性调控。 第三部分：信号失调与疾病建模 本部分着眼于信号传导的病理生理学意义，探讨信号网络的失控如何驱动重大疾病的发生与发展。 7. 肿瘤发生中的信号重塑与通路冗余： 癌细胞的标志性特征之一是信号传导的持续激活。本书分析了不同类型的基因突变（如受体过表达、磷酸酶失活、GAP失活）如何导致信号通路“卡死”在开启状态。重点讨论细胞如何利用信号通路间的“冗余性”和“补偿机制”来绕过单一靶向治疗的抑制，以及设计多靶点策略的必要性。 8. 神经退行性疾病中的信号失稳： 在阿尔茨海默病、帕金森病等神经退行性疾病中，信号传导异常扮演了重要角色。我们关注内质网应激信号（UPR）、线粒体信号以及tau蛋白过度磷酸化的信号级联反应，探讨这些失调的信号如何导致神经元凋亡和功能丧失，以及靶向这些异常信号网络的治疗潜力。 9. 免疫逃逸与慢性炎症中的信号错位： 免疫细胞的激活与抑制依赖于复杂的信号平衡。本章分析了肿瘤微环境如何通过异常的细胞因子信号（如TGF-β, IL-10）来抑制免疫反应。同时，探讨在类风湿性关节炎等自身免疫病中，Toll样受体（TLRs）信号通路或共刺激分子信号的过度激活如何导致长期的组织损伤。 结语：未来方向——时空精度与系统生物学整合 本书的终极目标是引导读者超越对单个分子功能的认知，进入到理解信号网络作为一个整体的动态系统行为。未来的研究将需要更精细的成像技术和单细胞分析来解析信号在时间和空间上的精确编码，并将其结果整合到计算模型中，以期开发出真正能够“重编程”病理信号网络的革命性疗法。本书为致力于信号转导研究的学者和高阶研究生提供了必要的高级理论框架和前沿视野。

评分☆☆☆☆☆

《实验室解决方案：基因敲除实验指南（原著第2版）（导读版）》给我的感觉，就像是在实验室里的一位老朋友，它不会给你灌输生硬的理论，而是用一种近乎交谈的方式，与你分享多年的经验和心得。这本书最大的亮点在于，它不仅仅是一本技术手册，更是一本“思考指南”。它鼓励读者在理解实验原理的基础上，去思考实验设计的逻辑，去预判可能出现的困难，并提供相应的解决方案。我个人特别喜欢它在讨论实验伦理和数据解读的部分，这些往往是被其他技术指南所忽略但却至关重要的内容。作者用一种非常审慎和负责任的态度，引导读者思考基因敲除技术在科学研究和社会应用中的深远影响。这让我感觉，这本书不仅仅是在教我如何操作，更是在培养我作为一个严谨的科学工作者的素养。它让我意识到，科学研究的价值，不仅仅在于技术的掌握，更在于对科学伦理的尊重和对社会责任的担当。

评分☆☆☆☆☆

刚拿到这本《实验室解决方案：基因敲除实验指南（原著第2版）（导读版）》，我激动的心情简直无法平复！作为一名刚入门的生物医学研究助理，基因敲除这个概念对我来说既熟悉又陌生，总是觉得像是隔着一层薄纱，窥探着一个神秘而强大的技术。这本书的名字就如同黑暗中的灯塔，指引着我前进的方向。翻开扉页，厚实的纸张和精美的排版立刻给人一种专业且值得信赖的感觉。我对这本书的期待值实在是太高了，希望它能像一位经验丰富的导师，循循善诱地将基因敲除的奥秘一一揭示。我尤其关注那些关于实验设计、操作流程和数据分析的章节，因为我知道，一个成功的基因敲除实验，细节决定成败。我脑海中已经勾勒出无数个在实验室里，对照着书本上的图解，小心翼翼地进行每一步操作的画面。这本书不仅仅是一本教材，更像是我通往基因编辑世界的一把金钥匙，我迫不及待地想要解锁它的力量，并将其应用到我的研究课题中，期待能够在这个领域有所突破。

评分☆☆☆☆☆

读完《实验室解决方案：基因敲除实验指南（原著第2版）（导读版）》的部分内容，我最大的感受就是它的“接地气”！很多时候，我们在课堂上学到的知识，到了实际操作层面总会遇到各种意想不到的困难。这本书就像一位身经百战的实验者，将那些教科书上“轻描淡写”的环节，例如试剂的准备、仪器的校准、甚至实验过程中的一些“潜规则”，都用极其生动且富有条理的方式呈现出来。我特别喜欢它在介绍各种基因敲除技术时，不仅仅是罗列出理论，更穿插了大量的案例分析和“避坑指南”。例如，关于CRISPR-Cas9技术，它不仅仅讲解了原理，还详细分析了不同sgRNA设计软件的优缺点，以及如何针对特定的基因位点进行优化。这对于我这样希望尽快上手并解决实际问题的研究人员来说，简直是如获至宝。我感觉自己不再是孤军奋战，而是有了一个经验丰富的“战友”在背后提供支持，让我在面对复杂的实验挑战时，能够更加从容和自信。

评分☆☆☆☆☆

坦白说，初次接触《实验室解决方案：基因敲除实验指南（原著第2版）（导读版）》时，我有些担心它会过于晦涩难懂，毕竟基因敲除涉及的分子生物学知识非常深入。然而，这本书的“导读版”定位果然名不虚传，它在保持科学严谨性的同时，采用了非常易于理解的语言和逻辑结构。作者仿佛站在读者的角度，将复杂的概念层层剥开，辅以清晰的图示和流程图，让即使是背景知识相对薄弱的研究人员，也能迅速掌握核心要点。我尤其欣赏它对于不同基因敲除策略的比较分析，清晰地列出了各自的优势、劣势以及适用范围，这使得我在选择最适合自己研究的实验方案时，能够有据可循，避免走弯路。对于那些希望在基因编辑领域快速入门，但又缺乏足够指导的研究者而言，这本书无疑是一本不可多得的“敲门砖”。它不仅教授了“做什么”，更重要的是教会了“为什么这么做”，这种深入的理解，对于培养独立科研能力至关重要。

评分☆☆☆☆☆

我一直对基因敲除技术在疾病治疗和基础研究中的潜力感到着迷，而《实验室解决方案：基因敲除实验指南（原著第2版）（导读版）》这本书，则将这种着迷转化为了实际行动的信心。这本书最让我印象深刻的是它的“全流程”覆盖，从最基础的细胞培养和质粒构建，到复杂的基因递送和阳性克隆筛选，每一个环节都进行了详尽的阐述。并且，它还针对不同的模型系统，例如哺乳动物细胞、模式生物等，提供了不同的实验策略和注意事项。这让我觉得，无论我未来的研究方向如何，这本书都能提供宝贵的指导。我尤其关注书中关于实验结果的验证和数据分析的部分，它清晰地讲解了如何利用Western Blot、qPCR、测序等多种方法来确认基因敲除的效率和特异性，这对于确保实验结果的可靠性至关重要。这本书就像一位经验丰富的“向导”，带领我在基因敲除的复杂世界里，找到清晰的路径，并自信地前行。

评分☆☆☆☆☆

如果能有第三版就好了.

评分☆☆☆☆☆

对10元以上商品发表大于500字心得的评价才可获得奖励。这个规则也太BT了吧，不想给评价积分就算啦，搞到买本书还要写一篇读后感才可以给评价积分。我容易吗我。不就是摆明要我剪切粘贴一大堆废话吗，多浪费网络空间啊。好吧，我要开始写评价了。独家的套装，比一本一本买要便宜很多。总得来说还是很不错的，纸张的质量也挺好的，就是每本书开始的前几页看不清楚，但正文很好，不知道原因。切割也有一点失误，有几页是连在一起的。还有就是说的那个充值的标识怎么书上没有找到？还是说网上买的就没有那个服务了？这些都是无所谓的小事了，只要内容看的清，是正确的就行了。毕竟买书就是买内容。特别是这种书，就是为了考试过关，又不是用来收藏的。万国的书的内容还是很不错的，希望这次可以过。还有一个建议，京东的打包员能不能仔细一点，包装的很好，就是书是个皱的，一压后说到我手里就是个皱皱的，虽然说压一下就可以了，但看到了还是不爽的，毕竟这也是一本新书，怎么皱的和旧书一样了。对10元以上商品发表大于500字心得的评价才可获得奖励。这个规则也太BT了吧，不想给评价积分就算啦，搞到买本书还要写一篇读后感才可以给评价积分。我容易吗我。不就是摆明要我剪切粘贴一大堆废话吗，多浪费网络空间啊。

评分☆☆☆☆☆

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