生命科学实验指南系列 分子细胞遗传学:技术与应用 [Molecular Cytogenetics:Protocols and Applications]

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[加] 范耀山 著,刘青杰 等 译
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  • 分子细胞遗传学
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出版社: 科学出版社
ISBN:9787030179777
版次:1
商品编码:12165832
包装:平装
丛书名: 生命科学实验指南系列
外文名称:Molecular Cytogenetics:Protocols and Applications
开本:16开
出版时间:2007-04-01
用纸:胶版纸
页数:421
字数:5

具体描述

内容简介

  《生命科学实验指南系列 分子细胞遗传学:技术与应用》是美国Methodsin Molecular Biology系列丛书第204卷的中译本。书中详细介绍了以荧光原位杂交(FISH)为代表的分子细胞遗传学相关技术(如染色体显微切割、引物介导的原位标记、SKY、M-FISH、CGH、彩色显带、纤维FISH、阵列CCH等)的原理、基本技术、实验材料、方法和注意事项,以及这些技术在染色体病诊断和产前诊断、肿瘤学研究中的应用。
  《生命科学实验指南系列 分子细胞遗传学:技术与应用》适于生物医学领域,特别可作为儿科学、医学遗传学、围产医学、生殖医学、发育生物学、病理学、血液学和肿瘤学等领域的医疗、教学、科研人员和相关学科的博士生、硕士生实验或诊疗过程中快速查阅的指导手册,也可作为细胞遗传学、血液学、分子病理学等技术培训和初学者的重要教材。

内页插图

目录

译者序
中译本序
原著序

第一部分 基本概念和技术
第1章 医学分子细胞遗传学概论
第2章 基因组靶序列荧光原位杂交探针的标记
第3章 以RNA为靶目标FISH探针的标记
第4章 FISH基本技术和问题解决

第二部分 FISH相关技术及其应用
第5章 染色体显微切割
第6章 引物介导的原位标记技术
第7章 光谱染色体核型分析
第8章 多色荧光原位杂交
第9章 用比较基因组杂交描述染色体结构异常
第10章 彩色显带
第11章 多色纤维荧光原位杂交
第12章 多重端粒荧光原位杂交
第13章 荧光基因分型筛查微小亚端粒重排
第14章 微阵列CGH

第三部分 在染色体病中的应用
第15章 描述标记染色体的分子途径
第16章 运用间期核荧光原位杂交对常见非整倍体的产前诊断
第17章 用母体血进行染色体异常的产前诊断
第18章 荧光原位杂交在非整倍体植入前诊断中的应用
第19章 微小缺失综合征的特征及其诊断
第20章 单亲二倍体的分子检测
第21章 生殖病理学中的分子细胞遗传学

第四部分 在肿瘤学中的应用
第22章 慢性髓细胞性白血病的间期FISH研究
第23章 病理学中的显色原位杂交和FISH
第24章 FISH检测乳腺癌中HER2扩增
第25章 比较基因组杂交技术在肿瘤研究中的应用
第26章 肿瘤细胞的荧光免疫表型和FISH共分析
第27章 用于分子细胞遗传学的人工细菌染色体资源库

英中文对照
图版

前言/序言

  荧光原位杂交(FISH)技术是在20世纪80年代末期建立起来的。FISH的应用研究证实:该技术成为衔接细胞遗传学和分子遗传学之间的一道桥梁,并开创了一门新的学科——分子细胞遗传学(molecular cytogenetics)。目前FISH技术在国际上广泛应用于基因定位、肿瘤遗传学、辐射生物学、遗传病诊断和产前诊断、试管婴儿植入前诊断等领域。
  我国的分子细胞遗传学开始于20世纪90年代初,由于探针、荧光显微镜及图像分析系统都比较昂贵,仅有几家大型医疗和科研机构能进行FISH实验及结果分析。随着我国经济的发展和科研经费投入的增加,各大医院、科研机构相关实验室以及具有辅助生殖技术的中心开始关注FISH及相关技术,并配备了仪器设备。在十几年闾,分子细胞遗传学相关技术也在全国各地的实验室相继建立。随着对FISH等技术应用需求的增加,对相关技术的培训要求也增加,但目前国内没有一本专著详细介绍分子细胞遗传学相关技术及其应用。许多科技人员和临床医生苦于不知道如何开始在自己的实验室建立FISH相关实验方法,实验中出现问题也不知如何解决。
  在2003年Am·J,Hum.Genet和J.PathoL.的两篇书评中我们了解到Humana Press出版的Molecular Cytogenetics:Protocols and Applications一书是Methodsin MolecuLar Biology系列丛书的第204卷,正好可以满足国内学者按步骤进行分子细胞遗传学技术操作的需求。该书是一部有关分子细胞遗传学相关技术的权威性著作,全面概括了当代分子细胞遗传学相关技术从基本原理、技术方法到实际应用的各个方面,实为关于FISH相关技术原理、操作及应用的代表性著作。我们希望本书的翻译出版,将有助予推动我国分子细胞遗传学技术的发展和普及。
  本书的翻译人员均为医学临床或科研相关专业的一线科技人员、博士、硕士,每位审校专家均在密切相关的研究、临床工作中积累了丰富的经验。在翻译过程中,我们力求保持原书的本意,逐句对应翻译,有些新的名词在中文中还未确定如何翻译,我们尽量将英文保留,使读者在阅读过程中不会因为我们的不确切翻译而引起误解。但是原著中明显的错误我们经过科学查证后尽量给予改正,以求更加合理。
  在本书出版之际,首先要感谢原著主编美国迈阿密大学的范耀山博士为我们提供了原著,审校了部分章节并为中译本作序。中国医学科学院基础医学研究所沈岩院士对本书的翻译给予了热情关心和大力支持,在此表示衷心的感谢!我们还要感谢中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所、国家人类基因组北方研究中心、北京协和医院、南京医科大学江苏省人民医院生殖中心、天津医科大学附属肿瘤医院、首都医科大学朝阳医院遗传中心和军事医学科学院基础医学研究所等单位的支持!
  感谢科学出版社马学海博士和李悦编辑给予的支持,由于他们出色的工作本书才得以翻译和出版。
  由于我们的知识、能力和水平的限制,对于某些技术的细节缺乏感性认识,在本书翻译过程中难免有错误和不妥之处,希望得到国内同道专家和读者的批评指正!
实验技术手册:微生物培养与鉴定实践 本书聚焦于微生物实验领域中基础而核心的技术操作,旨在为初学者和有经验的研究人员提供一套详尽、可靠的实践指导,确保实验过程的标准化与结果的可重复性。 --- 第一部分:微生物通用无菌操作与环境控制 本部分详细阐述了微生物学实验中至关重要的无菌技术,这是所有后续实验成功的基石。 第一章 无菌操作的原理与标准 本章深入探讨了无菌操作的微生物学基础,包括空气、水、设备和操作者本身污染源的识别与控制。内容涵盖了微生物对环境的适应性及其在不同界面(如液体、固体、气体)的传播机制。 1.1 实验室环境的清洁与消毒程序: 区分不同级别的洁净区(如普通通风间、超净工作台)所需达到的微生物控制标准。详细介绍了常用消毒剂(如75%乙醇、次氯酸钠、季铵盐类)的浓度配比、作用机理及接触时间要求。 1.2 酒精灯与本生灯的使用规范: 强调火焰灭菌(热屏障)在接种环、接种针及玻璃器皿口部灭菌中的关键作用。对比了酒精灯与现代热风灭菌器的适用场景。 1.3 安全操作的“三界”划分: 明确区分“污染区”、“清洁区”和“无菌区”的操作边界,指导研究人员如何通过物理隔离和操作流程控制,最大限度地避免交叉污染。 第二章 基础培养基的制备与质量控制 培养基是微生物生长的物质基础。本章侧重于培养基配方的理解、原材料的选用和灭菌过程的精确控制。 2.1 常见基础培养基的配方解析: 详细解析LB、TSB、营养琼脂(NA)等通用培养基中各类组分(如蛋白胨、酵母提取物、NaCl)的作用,并指导如何根据特定微生物的需求进行微调。 2.2 培养基的称量与溶解: 强调精确称量对渗透压和pH值的影响。介绍使用磁力搅拌器和加热装置溶解粉末培养基的最佳实践,尤其关注琼脂溶解的均匀性。 2.3 灭菌技术: 详细介绍高压蒸汽灭菌(压力、温度、时间曲线的设定与验证)在液体和固体培养基上的应用差异。针对对热敏感的成分(如抗生素、维生素),介绍巴氏灭菌法和过滤除菌技术(孔径选择与流速控制)。 2.4 培养基的质量检测: 规定了培养基灭菌后必须进行的“空白培养”步骤,包括培养温度、时间及对照组设定,确保培养基本身无菌污染。 第二部分:微生物的分离、纯化与保藏技术 本部分是微生物学实验的核心操作,涉及如何从复杂样本中获得单一纯菌株,并将其长期稳定保存。 第三章 样本的预处理与接种技术 处理原始样本,确保微生物在接种过程中存活并有效分离。 3.1 液体样本的稀释梯度法: 标准化描述从高浓度到低浓度的系列稀释步骤(如10倍稀释),并计算稀释倍数,为后续的菌落计数提供准确依据。 3.2 固体表面接种技术: 详细图解“涂布法”(Spread Plate)和“倾注法”(Pour Plate)的操作流程,指导如何均匀铺展样本或混合培养基,避免出现重叠菌落。 3.3 划线分离纯化技术: 深入剖析四区划线法(Four-Quadrant Streak)的原理,强调灭菌环的重新灼烧、蘸取菌液的次数和划线间距的调整,以实现从密集接种到分离单个菌落的过渡。 第四章 菌株的鉴定与表型分析 获得纯菌株后,必须进行初步的生物学和生理学鉴定。 4.1 革兰氏染色及其质量控制: 提供详细的革兰氏染色步骤(初染、媒染、脱色、复染),并重点讲解脱色过度和不足的判断标准,以及如何通过染色结果判断菌体形态(球菌、杆菌)和排列方式。 4.2 生理生化基础测试: 概述初步生化鉴定的常用方法,包括糖类发酵试验(配制指示剂培养基)、过氧化氢酶试验(反应时间与观察标准)和氧化酶试验。 4.3 运动性检测: 介绍半固体培养基制作及接种方法,以及如何区分运动性菌株和非运动性菌株在培养基中的扩散模式。 第五章 微生物的长期保存与复苏 确保优势菌株的遗传稳定性和活性是长期研究的关键。 5.1 液体石蜡封存法: 针对不耐冷冻的菌株,介绍如何使用无菌液体石蜡覆盖在斜面培养基表面,以阻隔空气氧化并减少水分蒸发,延长保存时间。 5.2 甘油冷冻保存法: 详细说明不同浓度甘油(如15%、30%)作为冷冻保护剂的配制,以及在-80°C冰箱或液氮罐中冷冻保存的操作规程,强调降温速率对细胞活力的影响。 5.3 菌株的复苏与活性验证: 规定了从冷冻或干燥状态复苏菌株的标准流程,包括解冻速度、首次接种的培养基选择,以及复苏后至少两代培养以确保菌株恢复到最佳生长状态。 第三部分:特殊环境微生物的培养与操作 本部分针对需要特定环境条件才能生长的微生物,提供定制化的实验技术。 第六章 厌氧微生物培养技术 厌氧菌的培养是微生物学中的难点,要求彻底排除氧气。 6.1 产氧气的抑制策略: 介绍化学除氧法(如使用硫代硫酸钠-葡萄糖体系)和物理除氧法(如抽真空-充氮气循环)的原理与应用。 6.2 厌氧培养箱(Anaerobic Chamber)操作: 详述手套箱内气体配比(N₂/CO₂/H₂的比例)、湿度控制及循环系统的维护,确保箱内氧气浓度低于0.5%。 6.3 厌氧试管培养法: 重点介绍火焰封管技术在试管培养中的应用,以及如何通过肉汤培养基颜色变化(氧化还原指示剂)来监测培养环境的厌氧状态。 第七章 嗜酸/嗜碱及高盐环境微生物培养 针对极端pH值和渗透压环境下的微生物研究。 7.1 pH缓冲体系的构建: 阐述了如何使用高浓度缓冲盐(如磷酸盐缓冲液)来稳定极端pH值的培养基,以及如何选择耐受高盐环境的营养源。 7.2 耐盐菌的接种与计数: 专门探讨高渗透压环境对微生物细胞壁和渗透调节机制的影响,并说明在计数或纯化这类菌株时,应选择等渗或略微高渗的稀释液。 --- 本书以图文并茂的形式,详尽展示了从基础的无菌操作到复杂的极端环境微生物培养的完整技术链条,强调了实验过程的规范性、安全性和结果的可靠性,是微生物学实验操作人员必备的实用工具书。

用户评价

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这本书的赠品——一本小巧的常用缩写对照表,简直是我这种记性不好的人的福音!每次看到那些长长的缩写,都会头大,而有了这个小册子,瞬间感觉清晰多了。我最喜欢的部分是关于染色体异常检测的介绍,我一直对遗传疾病的根源很感兴趣,而这本书就像一座宝库,里面详细介绍了各种检测技术,比如G显带、R显带,还有最近流行的比较基因组杂交(CGH)。虽然我还没有亲身操作过这些复杂的实验,但光是阅读那些图片,就能想象出染色体在显微镜下呈现出的各种形态,以及如何通过这些形态来判断是否存在异常。我尤其被那些通过染色体分析来诊断遗传病的案例所吸引,感觉这本书就像一个侦探手册,教你如何在细胞的DNA层面寻找线索,揭示生命的奥秘。它让我意识到,我们身体里隐藏着无数关于健康和疾病的信息,而这些信息,正是通过分子细胞遗传学的方法才得以被我们发现和解读。

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坦白说,我买这本书的初衷,更多的是出于一种“跟风”的心理,周围不少做生命科学研究的朋友都推荐了它。但当我真正翻开它,尤其是看到那些关于基因组学和转录组学前沿技术的章节时,我才意识到,这本书远不止是“技术指南”那么简单。它更像是一本“思想启迪录”。比如,关于CRISPR-Cas9基因编辑技术的介绍,虽然我不太可能亲自去操作,但书中对其原理、应用以及伦理考量的深入探讨,让我对未来的生物技术发展充满了敬畏和期待。我常常会思考,当人类掌握了如此强大的基因编辑能力,我们的世界将发生怎样的变化?这本书并没有直接给出答案,但它提供了一个坚实的基础,让我能够去理解和思考这些重大的科学问题。它就像一个引路人,把我带到了科学探索的最前沿,让我看到了那些充满无限可能性的未来。

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我一直对分子生物学领域充满了好奇,而这本书《生命科学实验指南系列:分子细胞遗传学:技术与应用》无疑是我探索这个领域的一块重要基石。虽然我目前的专业背景并不是直接与此相关,但这本书以其条理清晰的结构和深入浅出的讲解,极大地降低了我的入门门槛。我花了相当长的时间,只是反复阅读了关于DNA提取和PCR扩增的章节,仅仅是理解其背后的原理,就已经让我受益匪浅。我常常会想象,当我在实验室里,通过书中的方法分离出纯净的DNA,然后利用PCR技术将其成千上万倍地复制,这个过程本身就充满了魔力。这本书不仅仅是教会我“怎么做”,更重要的是让我理解“为什么这样做”,以及这样做能达到什么样的目的。我尤其喜欢那些在章节末尾提出的“思考题”,它们总是能引导我去深入思考实验的意义和潜在的应用方向,而不是仅仅停留在操作层面。对我而言,这本书的价值在于它点燃了我对科学研究的热情,并为我提供了一个清晰的认知框架。

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这本书,名为《生命科学实验指南系列:分子细胞遗传学:技术与应用》,我一直觉得它就像一本藏宝图,但直到最近我才真正开始探索其中的每一寸土地。翻开它,首先映入眼帘的是清晰的目录,每个章节都像一个小小的目的地,让我对即将展开的旅程充满期待。虽然我还没有深入研究每一个实验步骤,但单看标题,比如“染色体核型分析的最新进展”或是“FISH技术在疾病诊断中的应用”,就足以激发我无限的想象。我常常在想,当我在实验室里,对着显微镜下闪烁的荧光点,是不是就能解读生命最深层的秘密?这本书不仅仅是一本实验手册,更像是一扇窗,让我窥探到分子细胞遗传学这个宏大世界的广阔景象。我特别感兴趣的是那些关于技术创新的部分,比如新的染色方法或者更灵敏的检测手段,这些都意味着我们能够更精确、更高效地进行研究,也为解决一些棘手的生物学问题提供了新的思路。我能想象,当我真正掌握了书中的方法,那些曾经让我困惑的细胞图谱,在我眼中就会变得生动而富有意义。这本书对我来说,不仅仅是学习知识,更是一种能力的提升,一种解锁未知世界的钥匙。

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这本书的装帧设计很得我心,沉甸甸的质感,每一页纸张的触感都恰到好处,散发出一种学术书籍应有的庄重感。我尤其欣赏其中插图的精美程度,那些复杂的染色体图谱,在印刷商的精心处理下,色彩鲜明,细节清晰,即使是初学者也能从中感受到其内在的逻辑和美感。我至今仍清晰地记得,第一次在书里看到那些用不同颜色标记的染色体片段时,那种震撼感。它让我意识到,在肉眼不可见的微观世界里,存在着如此精巧的组织和编码。虽然我还没有亲手操作过书中所描述的任何一项实验,但光是阅读那些细致的操作流程,就仿佛置身于一个高精度的实验室,耳边回响着实验仪器的低语,手中操控着精密的仪器。我经常会反复琢磨那些图表和流程图,试图在脑海中构建起整个实验的框架,想象每一个步骤可能遇到的问题以及如何去解决。这本书对我而言,更像是一本精神食粮,它不断地在提醒我,科学探索的道路是多么的严谨,而每一个细微的差别都可能带来重大的发现。

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生命科学实验指南系列:生命科学实验设计指南

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很经典的教材指南

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生命科学实验指南系列:生命科学实验设计指南

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