分子生物学实验技术——基础与拓展 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2025

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黄立华 等 著

图书标签:

• 分子生物学
• 实验技术
• 生物技术
• 生命科学
• 实验指导
• 高等教育
• 科研
• 生物化学
• 基因工程
• 医学

出版社： 科学出版社

ISBN：9787030550583

版次：31

商品编码：12252729

包装：平装

丛书名： 生命科学实验指南系列

开本：32开

出版时间：2017-12-01

页数：128

正文语种：中文

内容简介

　　本书由两部分组成。第一部分“基础篇”精选了10个*基础的分子生物学实验和一个综合实验，包括PCR、DNA提取、酶切、连接、转化、蛋白质电泳等。在每一个实验的*后，都增加了相关的拓展环节，用于拓宽学生对该知识点的理解。第二部分“拓展篇”主要适用于具有一定基础的科研工作者（研究生或研发人员）进一步深入开展研究，内容包括总RNA提取、实时定量PCR、基因定点突变、热不对称交错PCR、蛋白质原核表达、蛋白质印迹、凝胶迁移实验、多克隆抗体制备、植物转基因操作和昆虫转基因操作等。

目录

第一部分 基础篇
实验1 移液器的使用
实验2 聚合酶链反应
实验3 PCR产物的回收与纯化
实验4 基因组DNA的提取
实验5 琼脂糖凝胶电泳
实验6 质粒DNA的提取
实验7 DNA酶切与连接反应
实验8 大肠杆菌感受态细胞的制备与转化
实验9 SDS-PAGE
实验10 表达蛋白的分离与纯化
实验11 综合实验——基因克隆
案例分析

第二部分 拓展篇
实验1 总RNA提取
实验2 实时定量PCR
实验3 基因定点突变——overlapPCR
实验4 热不对称交错PCR
实验5 蛋白质原核表达
实验6 蛋白质印迹
实验7 凝胶迁移实验
实验8 多克隆抗体制备
实验9 植物转基因操作
实验10 昆虫转基因操作
附录
附录1 常用培养基和抗生素
附录2 常用试剂的配制
附录3 引物设计
附录4 推荐阅读书目

现代分子生物学研究前沿进展与应用 一本深入探讨当代分子生物学核心技术、最新研究动态及其在生命科学、生物医学领域广泛应用的权威参考书。 本书旨在为生命科学领域的科研工作者、高等院校师生以及生物技术行业专业人士提供一个全面、深入且与时俱进的知识框架，聚焦于当前最尖端、最具革命性的分子生物学技术及其在解决复杂生命现象和疾病机制中的实际应用。我们避开了基础实验操作的重复性叙述，转而聚焦于那些推动学科边界拓展的关键性技术平台、创新的数据解析方法以及学科交叉的前沿课题。 第一部分：基因组学与表观遗传学的深度解析 本部分着眼于超越传统基因测序范畴的复杂基因组学研究。 1. 单细胞多组学整合分析 (Single-Cell Multi-Omics Integration): 我们详细阐述了单细胞RNA测序（scRNA-seq）、单细胞ATAC测序（scATAC-seq）和单细胞ChIP测序（scChIP-seq）等技术的最新迭代。重点讨论了如何有效地整合来自同一细胞的不同组学数据，例如，如何通过计算方法将基因表达谱与染色质可及性数据进行配对分析，以揭示细胞异质性背后隐藏的转录调控机制。内容涵盖先进的配对技术（如10x Genomics V(D)J/Feature Barcoding系统）的优化策略，以及处理高维度、稀疏数据的生物信息学流程，例如基于深度学习的细胞类型鉴定和轨迹推断算法（如Monocle 3, PAGA的最新进展）。 2. 空间转录组学与活细胞成像 (Spatial Transcriptomics and Live-Cell Imaging): 本章深入剖析了将基因表达信息与组织微环境精确关联的空间转录组技术（如Visium, MERFISH, seqFISH+）。讨论了空间解析度的突破，从组织级别到亚细胞级别的精确定位策略，及其在肿瘤微环境异质性分析和胚胎发育空间布局研究中的决定性作用。此外，我们探讨了高分辨率、低光毒性的活细胞成像技术（如STORM/PALM的改进，和光片显微镜在三维组织中的应用），着重于如何通过荧光探针设计实时追踪蛋白质的动态相互作用和核酸的结构变化。 3. 全基因组关联与功能性验证 (Genome-Wide Association and Functional Validation): 超越传统的GWAS结果罗列，本部分聚焦于如何将关联信号转化为功能性理解。详细介绍了利用CRISPR/Cas9系统进行大规模非编码区突变的功能筛选，特别是利用CRISPRi/a系统进行基因调控元件的精细激活与抑制。讨论了新型碱基编辑（Base Editing）和先导编辑（Prime Editing）技术在修正致病性点突变方面的精确性和脱靶控制策略，以及它们在疾病模型建立中的应用。 第二部分：蛋白质组学、代谢组学与结构生物学的交汇 本部分关注生命活动核心执行者——蛋白质及其相互作用网络的解析。 4. 高级蛋白质组学与翻译后修饰 (Advanced Proteomics and Post-Translational Modifications, PTMs): 本书详细介绍了基于高分辨质谱（HRMS）的蛋白质组学技术在深入解析PTMs方面的最新进展，特别是针对泛素化、磷酸化和糖基化的高灵敏度识别方法。重点讨论了基于化学标签（如TMT, iTRAQ）的定量策略在复杂样品（如临床样本）中的应用优化，以及蛋白质-蛋白质相互作用组（PPI）研究中亲和纯化-质谱联用（AP-MS）技术的流程标准化和数据可靠性评估。 5. 结构生物学的革命：冷冻电镜 (Cryo-Electron Microscopy, Cryo-EM): 冷冻电镜技术已经成为解析大分子复合物结构的主流手段。本章深入探讨了亚纳米分辨率下获取高精度三维结构的流程优化，包括高速数据采集、图像处理中的增强数据分类算法（如Huber的分类方法），以及如何利用混合模型来解析具有高动态或多构象态的分子机器。我们还将结构生物学与功能生物学相结合，讨论如何利用结构信息指导药物靶点设计。 6. 细胞内生物传感与蛋白质追踪 (Intracellular Biosensors and Protein Tracking): 介绍新一代基于荧光共振能量转移（FRET）或分子感应器（Biosensors）的工具，它们能够在活细胞内实时监测特定信号分子（如第二信使、离子浓度）的动态变化，以及蛋白质的亚细胞定位和浓度波动。重点阐述了设计高特异性、高灵敏度感应器的化学合成策略，以及如何利用这些工具来剖析信号转导通路中的时空调控。 第三部分：生物信息学、人工智能与系统生物学 生命科学数据爆炸式增长要求更强大的计算和模型化能力。 7. 深度学习在生物学中的应用前沿 (Frontier Applications of Deep Learning in Biology): 本章超越基础的机器学习分类器，聚焦于深度学习在解决复杂生物学问题中的突破。涵盖利用卷积神经网络（CNNs）和循环神经网络（RNNs）进行蛋白质结构预测（如AlphaFold的后续优化与局限性分析）、基因调控网络建模、以及从医学影像中自动提取生物标志物的能力。讨论了可解释性AI（Explainable AI, XAI）在生物学模型中的必要性。 8. 系统生物学与定量代谢流分析 (Systems Biology and Quantitative Flux Analysis): 探讨如何利用代谢组学数据结合同位素示踪技术，对细胞或组织水平的代谢网络进行量化分析。详细介绍了约束代谢模型（Constraint-Based Reconstruction and Analysis, COBRA）的构建与应用，特别是如何将基因表达数据和代谢网络拓扑结构相结合，以预测细胞对环境变化的生理响应，这在合成生物学和代谢工程中具有核心价值。 9. 高通量表型组学与药物发现 (High-Throughput Phenomics and Drug Discovery): 本书介绍了利用自动化高内涵筛选（High-Content Screening, HCS）平台，结合图像分析和生物信息学，实现对细胞表型进行高维度、无偏倚描述的方法。重点讨论了利用CRISPR文库筛选发现新的药物靶点和作用机制的策略，以及如何利用这些大规模表型数据来识别具有特定生物学特征的化合物。 本书强调跨学科整合和解决实际科学问题的能力培养，内容面向当前正在积极开发和应用中的尖端技术，而非对已成熟技术的重复描述。其深度和广度旨在推动读者从技术操作者提升为创新研究的设计者。

评分☆☆☆☆☆

这本书的书名听起来就很吸引人，"分子生物学实验技术——基础与拓展"，这两个词“基础”和“拓展”就暗示了它可能不仅仅是停留在最入门的层面，而是能带领读者深入到更广阔的领域。我一直对分子生物学中的一些前沿技术，比如CRISPR-Cas9基因编辑技术，或者单细胞测序技术，充满了好奇。这些技术是如何实现的？它们在解决生物学问题上又有哪些突破性的应用？我希望这本书不仅仅停留在讲述DNA提取、PCR扩增这些基础操作，而是能够触及到更现代、更复杂的实验体系，比如基因功能研究的各种方法，蛋白质相互作用的检测技术，或者在细胞成像方面的进展。如果书中能介绍一些最新的研究案例，通过这些案例来讲解技术如何应用于解决实际的科学问题，那将极大地激发我的学习兴趣。同时，"拓展"也意味着它可能包含了对一些交叉学科技术的介绍，比如生物信息学在分子生物学研究中的应用，或者一些工程学在分子生物学工具开发中的作用。这种跨领域的视角，往往能带来全新的思考和启发。

评分☆☆☆☆☆

我正在寻找一本能够系统性地梳理分子生物学实验技术脉络的书籍，我的期待是它能够像一本详尽的操作手册，又具备一定的理论深度。我希望它能够详细介绍从样本采集、处理，到各种分子操作，再到结果分析的全过程。比如，在提取DNA或RNA时，如何选择合适的裂解液和纯化方法？在进行DNA琼脂糖凝胶电泳时，如何根据DNA片段大小选择合适的凝胶浓度和电泳缓冲液？Western Blot实验中，如何选择特异性好的抗体，以及如何优化显影条件？我对于这些细节的讲解非常看重，因为在实际操作中，很多问题都出在这些看似不起眼的环节。另外，我也希望书中能提供一些常用的实验方案，并且对这些方案进行详细的解释，说明每一步的原理和目的，以及可能遇到的问题和解决方案。这种“手把手”的教学模式，对我这种希望快速上手实践的读者来说，是极具价值的。

评分☆☆☆☆☆

我对分子生物学实验技术的学习，更多的是出于对生命奥秘的好奇心，以及希望能够掌握一些能够“动手”去探索这些奥秘的工具。我希望这本书能提供一种循序渐进的学习路径，从最基础的概念讲起，逐步深入到更复杂的实验技术。比如，它会不会介绍如何设计一个合理的实验？如何从研究问题出发，选择最适合的技术手段？在实验过程中，如何进行对照组的设置，以及如何确保实验的可重复性？我对于数据分析和结果解读的部分也格外感兴趣。在获得了一系列实验数据后，如何对其进行科学的分析和判断？如何避免过度解读或者误读数据？如果书中能提供一些关于数据统计分析的基本方法，或者介绍一些常用的生物信息学分析工具，那将是非常有益的。总而言之，我期待的不仅仅是技术的罗列，而是对整个科学研究过程的理解和实践能力的提升。

评分☆☆☆☆☆

一本关于分子生物学实验技术的书，听起来就很实用！我一直觉得分子生物学是个非常迷人的领域，那些精密的DNA、RNA、蛋白质相互作用，构建出生命最基本的运行机制，简直就是微观世界的奇迹。想象一下，我们能够通过各种精巧的实验手段，去“看到”这些看不见的分子在细胞里忙碌，去理解它们的语言，甚至去干预它们的行为，这本身就充满了探索的乐趣。我特别好奇书中会如何介绍那些经典的分子生物学实验，比如PCR、凝胶电泳、Western Blot，这些词汇听起来就充满了科技感，它们是如何一步步发展起来的，又是如何成为现代生物学研究的基石呢？我希望书中不仅会讲解原理，更能深入剖析每一个步骤的操作要领，甚至是实验中可能遇到的各种“坑”以及如何规避，这样对于初学者来说，无疑是宝贵的经验总结。毕竟，理论知识再扎实，动手能力才是关键，而实验的成功与否，往往就取决于那些看似微不足道的细节。如果书中能配上清晰的流程图或者示意图，那就更好了，这样可以帮助我们更直观地理解复杂的实验过程，减少走弯路的可能性。

评分☆☆☆☆☆

一本关于分子生物学实验技术的书籍，自然少不了对各种关键仪器的介绍。我个人对那些在实验室里闪烁着各种指示灯、发出复杂声音的精密仪器感到着迷。比如，离心机是如何工作的？不同转速和时间的设置会带来什么影响？PCR仪又是如何精准地控制温度循环的？还有那些用于检测的荧光显微镜，它们又是如何捕捉到微观世界的色彩呢？我特别希望书中能够详细介绍这些常用仪器的操作规范、维护保养以及常见故障排除。毕竟，仪器的正确使用和维护，直接关系到实验的稳定性和数据的可靠性。此外，我还在思考，这本书会不会涉及到一些特殊的实验环境或者条件的要求？比如，无菌操作的重要性，或者在进行某些敏感实验时需要注意的温度、湿度等环境因素。如果能有一些关于实验室安全规范的提及，那就更加全面了。毕竟，在进行实验操作时，安全永远是第一位的。