PCR最新技术原理、方法及应用

PCR最新技术原理、方法及应用 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2025

黄留玉 编
图书标签:
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  • 应用
  • 核酸检测
  • 聚合酶链式反应
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出版社: 化学工业出版社
ISBN:9787122094827
版次:2
商品编码:10346622
包装:平装
丛书名: 生物实验室系列
开本:16开
出版时间:2011-01-01
页数:386
正文语种:中文

具体描述

内容简介

   本书第一版出版以来,受到读者的欢迎。在第一版面世的五年多时间里,随着生命科学研究的深入,又衍生出了一些新的方法。第二版旨在及时地把这些方法介绍给读者。本版新增的内容较多,主要包括: 详细地介绍了芯片PCR、电子PCR和数字PCR及其应用; 增加和丰富了PCR在各领域中的应用; 对一些重要的PCR方法,诸如致突变PCR、免疫PCR、实时荧光定量PCR和PCR在法医学中的应用等章节进行补充更新。
《PCR新技术原理、方法及应用》是一本关于PCR技术的实验手册,适用与所有从事生命科学研究的科技工作者、教师和研究生阅读参考。

目录

第一章 绪论
第一节 PCR发展简史
第二节 PCR技术的基本原理和操作
第三节 PCR的主要应用
第二章 扩增已知序列两侧DNA的PCR
第一节 反向PCR
第二节 锚定PCR
第三节 RACE?cDNA末端的快速扩增
第四节 连接介导的PCR
第五节 Bubble?PCR
第三章 巢式PCR
第一节 常规巢式PCR
第二节 半巢式PCR
第三节 反转录巢式PCR
第四节 共有序列巢式PCR
第五节 种特异巢式PCR
第六节 巢式PCR?变性梯度凝胶电泳
第七节 巢式PCR?限制性片段长度多态性
第四章 实时荧光定量PCR
第一节 实时荧光定量PCR原理
第二节 实时荧光定量PCR中的荧光化学物质
第三节 实时荧光定量PCR的定量方法
第四节 实时荧光定量PCR的实验方法
第五节 实时荧光定量PCR技术的应用
本章小结
本章参考文献
第五章 致突变PCR
第一节 随机错误掺入PCR构建突变体库
第二节 PCR构建定点突变序列或重组序列
第六章 测序和DNA合成PCR
第七章 免疫PCR
第八章 PCR芯片
第九章 电子PCR和数字化PCR
第十章 其它PCR方法
第十一章 PCR在基因分型中的应用
第十二章 PCR在临床诊断及流行病调查中的应用
第十三章 PCR在法医学中的应用
第十四章 PCR在遗传病诊断中的应用
第十五章 PCR在癌症诊断中的应用
第十六章 PCR在动物学中的应用
参考文献
索引
好的,这是一本涵盖了生物化学、分子生物学前沿技术以及其在生命科学研究和临床诊断中应用的综合性著作的简介。 --- 《前沿生物化学分析技术:从蛋白质组学到基因编辑的跨界探索》 图书简介 本书深入剖析了当代生物化学分析领域的关键技术体系,旨在为生命科学研究人员、生物技术开发人员以及高等院校师生提供一套全面、前沿且具有实践指导意义的工具书。全书的叙事逻辑围绕着如何高效、精准地解析生命系统的复杂性展开,重点关注那些推动现代生物学研究范式转变的核心技术平台。 第一部分:高通量蛋白质组学与结构解析 本部分聚焦于蛋白质功能与结构分析的最新进展。我们首先探讨了质谱驱动的蛋白质组学如何实现对细胞、组织乃至生物体水平上数千种蛋白质的全面鉴定与定量。内容涵盖了从样本制备、液相色谱分离优化(如二维液相色谱、亲和层析柱的最新应用)到高分辨率串联质谱(MS/MS)数据采集与生物信息学处理的全流程。特别地,书中详述了定性与定量的整合策略,包括靶向定量(如 SRM/PRM)和非靶向深度覆盖技术在代谢紊乱和疾病生物标志物发现中的应用案例。 随后,我们转向冷冻电子显微镜(Cryo-EM)在解析复杂生物大分子结构中的革命性作用。书籍详细介绍了从样品玻璃化到三维重建的每一步关键技术控制点,重点阐述了如何克服低信噪比、颗粒取向性偏差等技术瓶颈,以达到接近原子分辨率的结构解析水平。这部分内容对理解膜蛋白、核糖体等超大分子机器的工作机制具有决定性意义。此外,书中还涵盖了X射线晶体学在小分子与蛋白质相互作用界面研究中的最新进展,包括同步辐射光源的应用以及时间分辨晶体学在捕捉酶促反应瞬时状态中的潜力。 第二部分:高精度核酸功能与调控机制研究 本部分侧重于核酸分子层面的深度挖掘,特别关注基因表达调控的动态过程和表观遗传修饰的解析。 我们对新一代测序(NGS)技术进行了系统性的梳理和比较分析。内容不仅限于标准的全基因组测序(WGS)和外显子组测序(WES),更深入地介绍了单细胞多组学技术(如scRNA-seq, scATAC-seq, Multiome)在解析细胞异质性方面的突破。书中详细讨论了如何处理单细胞数据中常见的稀疏性问题,以及如何利用先进的统计模型揭示细胞命运决定通路。 在表观遗传学领域,本书详细阐述了基于高通量测序的DNA甲基化(如WGBS、TAB-seq)和组蛋白修饰(ChIP-seq、CUT&Tag)的最新方法学改进。特别是对CRISPR/dCas9激活/抑制系统(CRISPRa/i)在非编码区调控元件功能验证中的应用进行了深入探讨,展示了如何精确“敲击”基因组的特定区域,以研究其对下游基因表达的远端效应。 第三部分:生物物理工具与活细胞成像 为了将分子信息与细胞行为联系起来,第三部分着重介绍了生物物理学工具在活细胞研究中的应用。 荧光成像技术是本部分的核心。我们全面介绍了超分辨显微技术(如STED、PALM/STORM),并分析了它们如何突破光学衍射极限,实现对细胞内纳米级结构(如突触后密度、线粒体内嵴)的精细描绘。书中特别强调了荧光蛋白工程的最新进展,包括开发具有更优光稳定性和更小光毒性的新一代报告基因,以及利用FRET/BRET技术实时监测活细胞内分子间相互作用和信号转导的动态过程。 此外,单分子生物学技术被详细介绍,包括使用光镊(Optical Tweezers)和原子力显微镜(AFM)来直接拉伸、探测单个DNA、RNA或蛋白质分子的机械性质和动力学行为。这些技术为理解分子机器(如聚合酶、解旋酶)在工作时的物理力学提供了第一手的实验证据。 第四部分:生物信息学与数据整合策略 现代生物学实验的特点在于数据量庞大且复杂。本书的最后部分聚焦于如何有效地管理、分析和解释这些海量数据。 内容涵盖了多组学数据的整合分析框架,包括如何使用矩阵分解、深度学习模型(如变分自编码器VAE)来发掘隐藏在表型与多层次分子数据之间的关联。书中提供了大量关于标准化的数据处理流程(Pipelines)的实例,从原始测序文件的质量控制(QC)到差异表达分析、通路富集分析,直至构建预测模型。特别强调了可重复性研究的重要性,并讨论了利用容器化技术(如Docker/Singularity)来标准化分析环境的实践经验。 总结 《前沿生物化学分析技术:从蛋白质组学到基因编辑的跨界探索》不仅仅是一本技术手册,更是一份连接基础研究与转化医学的桥梁。它为读者提供了一个从分子层面到系统层面的完整技术图景,强调了跨学科知识整合在解决复杂生命科学问题中的关键作用。本书的编写风格严谨、数据翔实,力求在理论深度与实验操作指导之间取得完美平衡,是当代生命科学研究不可或缺的参考资源。

用户评价

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这本《PCR最新技术原理、方法及应用》我刚拿到手,还没来得及深入研读,但仅仅是翻阅了一下目录和前言,就让我对它充满了期待。我本身是一名临床检验技师,日常工作中接触PCR技术已经有几年了,但总觉得理论基础不够扎实,对于一些新兴的、更精细的操作总有些模棱两可的地方。这本书的出现,恰逢其时。我注意到它在“原理”部分,似乎不仅仅是简单罗列PCR反应的几个关键步骤,而是更深入地探讨了DNA聚合酶的活性机制、dNTPs的选择和浓度对反应效率的影响,以及引物设计的理论依据和实践考量。这一点尤其吸引我,因为在实际操作中,很多疑难杂症的出现,往往追根溯源都能在原理上找到线索。而“方法”部分,我看到有提到不同类型的PCR,比如qPCR、RT-PCR、巢式PCR等等,这些都是我们在日常工作中会遇到甚至需要优化和掌握的。特别是qPCR,随着高通量检测的需求日益增长,它的应用范围越来越广,掌握其精髓对提升工作效率和准确性至关重要。书中关于不同荧光染料和探针方法的介绍,以及如何选择合适的仪器和优化反应体系,这些细节性的内容,正是我们一线工作者最需要学习和借鉴的。我对它能为我解答“为什么”以及“如何做更好”充满了信心。

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作为一个刚刚进入分子生物学领域的博士生,我对PCR技术的学习就像一张白纸,而《PCR最新技术原理、方法及应用》这本书,无疑为我打开了一扇通往未知世界的大门。在此之前,我接触到的PCR知识大多零散且片段化,主要通过网络搜索和零星的教科书章节来学习。这本书的结构清晰,从最基本的原理讲起,循序渐进地深入到各种高级应用。尤其让我印象深刻的是,它不仅仅关注“是什么”,更强调“为什么”,对每一个步骤背后的生化反应和分子机制都有详尽的解释,这对于我理解PCR的根本规律、避免走弯路至关重要。例如,书中对热循环过程中温度和时间设定的逻辑分析,对影响PCR效率的各种因素(包括模板的质量、引物的特异性、缓冲液的组成等)的详细阐述,都让我茅塞顿开。我还注意到,书中对一些前沿的PCR技术,如数字PCR和微流控PCR,都有专门的章节介绍。虽然我目前的研究方向可能还不需要直接接触这些技术,但了解这些前沿发展,对我把握整个领域的发展趋势,以及未来可能的研究方向,有着重要的指导意义。这本书的图文并茂,对复杂概念的解释也十分到位,我觉得它非常适合像我这样的初学者,能够帮助我快速建立起对PCR技术的全面认识。

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我对《PCR最新技术原理、方法及应用》这本书的初印象,可以用“全面而深入”来概括。我是一名高校的生物学老师,在给本科生讲授分子生物学实验课程时,PCR是必不可少的重要内容。长久以来,我一直在寻找一本能够系统性地介绍PCR技术,并且能够涵盖最新发展趋势的书籍,以更新我的教学内容和提升教学质量。这本书恰好满足了我的需求。我注意到它在“应用”部分,列举了非常广泛的领域,从疾病诊断、法医鉴定,到基因工程、环境监测,甚至食品安全等,这些具体的应用案例,能够帮助我的学生更好地理解PCR技术在现实世界中的价值和意义,激发他们的学习兴趣。而且,书的作者团队看起来非常专业,涵盖了理论研究和实际应用的不同专家,这保证了内容的权威性和前沿性。我特别期待书中关于PCR在基因组学、转录组学等大数据研究中的应用,以及与二代测序技术结合的最新进展,这些都是当前生物学研究的热点,也是我希望在教学中重点强调的部分。这本书无疑将成为我备课和指导学生进行PCR相关实验的重要参考资料。

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作为一名在制药公司从事药物研发的研究员,对分子检测技术的要求非常高,特别是PCR在药物靶点的发现、药物疗效的评估以及生物标志物的筛选等方面,扮演着至关重要的角色。在阅读《PCR最新技术原理、方法及应用》之前,我接触过不少PCR相关的文献和技术手册,但总觉得缺乏系统性和深入性。《PCR最新技术原理、方法及应用》这本书,从“原理”到“方法”再到“应用”的编排逻辑,非常符合我的科研思维。我特别欣赏书中对不同PCR方法的优缺点对比分析,以及在不同应用场景下如何选择最合适的技术,这对于我们选择最优的实验方案、规避潜在的风险至关重要。书中关于定量PCR(qPCR)的详细介绍,包括其灵敏度、特异性以及各种定量策略的比较,对我们进行药物疗效的精确评估非常有帮助。另外,书中对PCR在基因编辑技术(如CRISPR-Cas9)中的应用,以及在单细胞水平进行PCR分析的最新进展的提及,都让我看到了该技术在药物研发领域更广阔的应用前景。我相信这本书能为我提供更扎实的理论支撑和更具启发性的思路。

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我是一名对生物技术充满好奇心的普通读者,虽然没有专业的背景,但一直对改变世界的科学技术很感兴趣。偶然的机会,我在书店看到了《PCR最新技术原理、方法及应用》这本书,被它厚实的内容和精美的封面所吸引。虽然我可能无法完全理解书中的所有专业术语和复杂的公式,但我依然被其所展示的强大力量所折服。我了解到PCR技术能够“复制”DNA,这就像给DNA插上翅膀,让科学家们能够以前所未有的方式研究生命。书中提到PCR在“应用”部分,提到了很多我曾经在新闻里听说过的事情,比如在刑事案件中通过DNA找到真凶,或者在疫情期间快速检测病毒。这些联系让我觉得PCR技术离我的生活并不遥远,它在解决现实问题中发挥着巨大的作用。我对书中关于“原理”和“方法”的部分虽然感到有些吃力,但通过书中大量的图示和通俗的语言(我希望能有这样的表述),我依然能够感受到这项技术的神奇之处。这本书的出现,让我对生命科学的认识又深入了一层,也让我对未来科技的发展有了更多的遐想。

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很好,对我帮助很大,满意

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很实用

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很好的工具书,老师很满意。

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做PCR实验可以参考,讲的比较到位。

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好用,不贵,方便

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要学,没办法 ,还是要看,虽然贵了

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好不好我我不知道,别人告诉我买的

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今天刚刚拿到书,这本:..冯唐1.冯唐写的活着活着就老了很不错,用文字打败时间。冯唐最畅销作品。冯唐自认写诗第一,小说第二,杂文第三。但,杂文才是其销量最好、最受欢迎的作品。一本情色当空,自由前卫的思想随笔。只对文章执著如怨鬼,其他随他大小便。活着活着就老了收录的随笔,全部是冯唐近年来的代表作。这些随感而发的文字,表达了作者自由、时尚、前卫的思想、文笔犀利幽默,既调侃又老道深髓,极富哲理,常有惊人之语,既能让读者忍俊不禁,又能给读者的新的启迪。猪和蝴蝶是我最喜欢的两种动物。我喜欢猪早于我喜欢姑娘,我喜欢蝴蝶晚于我喜欢姑娘。猪比姑娘有容易理解的好处穿了哥哥淘汰下来的大旧衣服,站在猪面前,也不会自卑。猪手可以看,可以摸,还可以啃,啃了之后,几个小时不饿。猪直来直去,饿了吃,困了睡,激素高了就拱墙壁,不用你猜它的心思。猪比较胖,冬暖夏凉,夏天把手放到它的肉上,手很快就凉爽了。猪有两排乳房,而不是两个。等等这些好处,姑娘都没有。发行第一套生肖猴票(46,庚申猴)的时候,由于只发行了三百万张,半年就从八分钱的面值升到两块。那时我上小学,才学了算术。我和我老妈算全国十亿人,三百多人才轮上一张猴票,这三百多人里就有三十来个属猴的,猴票的价格还得涨。我老妈给了我两块钱,放在贴肉的兜里,叫我去黑市买猴票。我在崇文门邮市买到猴之后,在王府井附近一个工艺品商店的橱窗里看见了一个猪造型的存钱罐。造型独特,我从没见过。青底青花,母子猪,大猪在下面驮着上面的小猪,两头猪都咧嘴乐着,小猪背上开了一个口子,钢儿就从那里进去,标价两块。我立刻觉得,同是两块钱,比猴票值。一,两个猪比一个猴,多二、培养攒钱的好习惯三,那个大猪身材像我老妈,大腿粗,小腿极细。我跑到东单邮电局邮市,两块两毛卖了那张猴票,买了母子猪存钱罐子,又买了一根奶油双棒冰棍。我告诉我老妈,我老妈夸我算术学得好,日回报百分之十,这一天过得有意义。又过了两年,庚申猴票涨到十块一张了,母子猪存钱罐满大街都看得到了,我遇到邮电局就绕着走,把母子猪塞进床底下。我老妈把钱罐翻出来,摆在我的小书桌上,她说了一句话,这句话二十年后,我在书里听麦兜老妈麦太说起。麦太因为盲目信任麦兜的童子手气而没中六合大彩,麦兜羞愧地低下了头。我老妈当时和麦太说的一样我们现在很好。麦兜不仅是一只猪,而且是一只生活在低处的猪,一只饱含简单而低级趣味的猪,一只得大道的猪。麦兜生活在低处,麦兜们天资平常,出身草根,单亲家庭,抠钱买火鸡,没钱去马尔代夫,很大的奢望是有一块橡皮。我在香港住的地方是老区,统称西营盘,英国鬼子最早打到香港岛,驻扎军队的地方。上下班的时候,在周围左

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