流式細胞術——原理、操作及應用(第二版)

流式細胞術——原理、操作及應用(第二版) pdf epub mobi txt 電子書 下載 2025

陳硃波,曹雪濤 著
圖書標籤:
  • 流式細胞術
  • 細胞分析
  • 免疫學
  • 生物醫學
  • 實驗技術
  • 生物技術
  • 細胞生物學
  • 臨床診斷
  • 醫學研究
  • 第二版
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齣版社: 科學齣版社
ISBN:9787030390974
版次:2
商品編碼:11646173
包裝:平裝
開本:16開
齣版時間:2014-01-01
用紙:膠版紙
頁數:252
字數:1
正文語種:中文

具體描述

編輯推薦

適讀人群 :《流式細胞術——原理、操作及應用(第二版)》特彆適閤於免疫學研究者和流式細胞術的初學者,也可以作為有一定經驗的操作者的參考書,對其他領域研究者也具有很好的參考價值。
  《流式細胞術:原理、操作及應用(第二版)》特色:
  深入淺齣,通俗易懂
  著者對流式細胞術有著豐富的操作經驗和深入透徹的理解,用最平實的語言詮釋瞭此技術的原理、操作和應用。
  方法全麵,技巧突齣
  本書全麵介紹瞭流式細胞術的基本操作方法,特彆突齣瞭著者的心得體會和技巧,幫助讀者進一步提高操作水平。
  理論聯係實踐本書
  運用大量的實例和示意圖具體而形象地闡述瞭流式細胞術的原理和應用。以其在免疫學上的應用為基礎,擴展到基礎醫學和生物學應用的多個方麵。
  強化流式分選
  本書還重點介紹瞭流式分選的具體應用,闡述瞭不同條件下流式分選的策略選擇和注意事項,以及各種乾細胞包括腫瘤乾細胞等的流式分選。

內容簡介

《流式細胞術——原理、操作及應用(第二版)》主要介紹流式細胞術的原理、操作及應用,分為概述、流式細胞儀的原理、流式圖、流式細胞術的基本操作與技巧、流式分析術的應用和流式分選術的應用6個部分。概述部分介紹基本概念和幾款常見的流式細胞儀;原理部分具體介紹流式細胞儀的液流係統、光路係統、檢測分析係統和分選係統;流式圖部分主要介紹瞭流式通道、流式直方圖、流式散點圖和流式等高綫圖;操作部分介紹瞭樣品製備、熒光素偶聯抗體及標記、光電倍增管電壓設定、對照設置、補償調節、閾值設定、死細胞問題處理、分選模式選擇、上樣速度控製、分選設門原則、分選基本步驟等內容;流式分析術的應用部分具體介紹瞭流式細胞術在免疫學方麵的應用,並且擴展到基礎醫學和生物學方麵的應用;流式分選術的應用部分闡述瞭不同條件下流式分選的策略選擇和注意事項,同時還介紹瞭各種乾細胞包括腫瘤乾細胞等的流式分選方法。

內頁插圖

目錄

前言 v

1 概述 1

1.1 流式細胞術基本概念 2

1.2 分析型流式細胞儀介紹 5

1.3 分選型流式細胞儀介紹 9

參考文獻 13

2 流式細胞儀的原理 14

2.1 液流係統 15

2.2 光路係統 18

2.3 檢測分析係統 28

2.4 分選係統 31

參考文獻 36

3 流式圖 37

3.1 流式通道 38

3.2 流式直方圖 39

3.3 流式散點圖 42

3.4 流式等高綫圖 45

參考文獻 46

4 流式細胞術的基本操作與技巧 48

4.1 樣品製備 49

4.1.1 獨立細胞樣品製備 49

4.1.2 免疫器官樣品製備 51

4.1.3 實體髒器樣品製備 52

4.2 熒光素偶聯抗體及其標記方法 53

4.2.1 熒光素 53

4.2.2 熒光素偶聯抗體 57

4.2.3 樣品封閉 58

4.2.4 熒光素偶聯抗體標記 60

4.3 光電倍增管電壓設定 62

4.4 對照的設置 65

4.4.1 陰性對照的設置 65

4.4.2 FMO對照 68

4.4.3 陽性對照的設置 68

4.5 補償調節 69

4.5.1 補償調節的原理 69

4.5.2 調節補償的具體方法 71

4.5.3 三色和四色分析補償調節方法 74

4.5.4 影響補償大小的因素 76

4.6 閾值設定 78

4.7 流式分析中的死細胞問題 79

4.7.1 減少樣品中死細胞比例的方法 79

4.7.2 流式分析時區分死細胞和活細胞的方法 80

4.8 流式分選模式選擇 85

4.8.1 純化模式 86

4.8.2 富集模式 87

4.8.3 單細胞模式 87

4.9 上樣速度控製 88

4.9.1 流式分析速度控製 89

4.9.2 流式分選速度控製 89

4.10 分選設門基本原則 91

4.11 流式分選基本步驟 93

參考文獻 94

5 流式分析術的應用 96

5.1 細胞群比例測定 97

5.2 錶型測定 101

5.3 流式檢測細胞因子 106

5.3.1 胞內染色法檢測細胞因子 107

5.3.2 胞內染色法與ELISA法比較 112

5.3.3 CBA法測定細胞因子 114

5.3.4 CBA法與ELISA法比較 116

5.4 檢測細胞增殖 117

5.4.1 相對計數法 118

5.4.2 示蹤染料標記法 122

5.4.3 Brdu標記法 127

5.4.4 其他方法 129

5.5 檢測細胞凋亡 130

5.5.1 Annexin Ⅴ/PI雙染色法 131

5.5.2 SYTO/PI雙染色法 133

5.5.3 細胞DNA含量分析法檢測細胞凋亡 134

5.5.4 綫粒體損傷檢測法 135

5.5.5 活化的caspase-3檢測法 139

5.5.6 熒光素偶聯的caspase抑製劑(FLICA)標記法 139

5.5.7 甲酰胺誘導ssDNA單抗檢測法 140

5.5.8 TUNEL法 141

5.6 檢測細胞周期 142

5.6.1 非特異性核酸熒光染料標記法 142

5.6.2 特異性細胞周期調節蛋白檢測法

前言/序言


《細胞生物學基礎與前沿探索》 內容簡介 本書旨在為生命科學領域的學習者、研究人員以及技術人員提供一套全麵、深入且與時俱進的細胞生物學知識體係。我們聚焦於現代細胞生物學最核心的原理、最新的研究範式以及前沿技術的應用,力求在宏觀視野與微觀機製之間架起堅實的橋梁。本書共分為五大部分,涵蓋瞭從細胞的基本結構、分子機製到復雜細胞行為和疾病模型構建的廣闊領域。 第一部分:細胞結構與組分的精細解析 本部分是理解一切細胞功能的基石。我們首先對真核細胞和原核細胞的結構進行係統對比,詳細闡述細胞膜的流動鑲嵌模型、脂質雙分子層組成及其在物質跨膜轉運中的作用。隨後,深入探討細胞器的動態平衡與功能特化: 細胞核與基因錶達調控: 詳述核質的動態結構、染色質重塑的分子機製,以及轉錄、剪接、轉運的復雜過程。重點分析瞭非編碼RNA在基因錶達調控中的“指揮棒”作用。 細胞內膜係統與蛋白分泌途徑: 細緻描繪內質網(ER)的蛋白質摺疊質量控製係統(ERQC)和未摺疊蛋白反應(UPR)。闡述高爾基體的順/反麵結構、囊泡運輸的識彆與融閤機製(SNARE復閤體),以及溶酶體在細胞內降解係統中的核心地位。 細胞骨架的動態張力網絡: 深入解析微管、微絲和中間縴維的組裝、解聚動力學及其相關驅動蛋白(如驅動蛋白和肌動蛋白)。特彆強調細胞骨架在細胞遷移、形態維持和細胞器運輸中的關鍵作用。 第二部分:細胞信號轉導的分子邏輯 信號轉導是細胞響應環境變化、實現協同作用的“語言係統”。本部分緻力於解析各類信號分子如何跨膜傳遞信息並引發精確的細胞反應: 膜受體與胞內級聯放大: 詳細分析G蛋白偶聯受體(GPCRs)的多功能性、酪氨酸激酶受體(RTKs)的激活與信號分支。重點剖析第二信使(cAMP, Ca$^{2+}$, IP3)的産生、傳遞和消除機製。 通路整閤與交叉對話: 探討MAPK級聯、PI3K/Akt/mTOR通路在細胞增殖、存活和代謝中的核心地位。通過實例說明不同信號通路如何相互影響、整閤信息,形成復雜的決策網絡。 信號轉導的負反饋與時間調控: 分析細胞如何通過磷酸酶活性、受體下調或內吞作用來精確控製信號的強度與持續時間,以避免失控的生理反應。 第三部分:細胞周期調控與細胞命運決定 細胞的增殖、分化與死亡是生命體維持穩態和發育的基礎。本部分聚焦於這些核心過程的分子開關: 細胞周期的精確控製環路: 詳盡闡述細胞周期蛋白(Cyclins)和細胞周期蛋白依賴性激酶(CDKs)如何協同驅動細胞從G1到M期的有序進展。重點解析DNA損傷檢查點(Checkpoints)的分子機製及其與抑癌基因(如p53)的關聯。 細胞分化與錶觀遺傳學: 闡述細胞命運是如何通過轉錄因子網絡的激活和抑製來決定的。深入探討組蛋白修飾(乙酰化、甲基化)和DNA甲基化在長期基因錶達程序鎖定中的作用,揭示錶觀遺傳學對細胞身份的維持機製。 程序性細胞死亡(凋亡)機製: 深入解析內在和外在凋亡途徑的啓動器與執行者(半胱天鼕酶傢族)。對比壞死、凋亡、焦亡(Pyroptosis)等不同死亡模式的形態學特徵、生化標誌物及其在生理和病理中的角色。 第四部分:細胞間相互作用與組織構建 生命體的高級功能依賴於細胞間的精確通訊與有序排列。本部分關注細胞如何形成功能性集群: 細胞粘附分子(CAMs)的類型與功能: 詳細介紹鈣依賴性的鈣粘蛋白(Cadherins)、免疫球蛋白超傢族粘附分子(IgSF)以及整閤素(Integrins)的結構特性。重點分析Cadherin在建立和維持上皮組織極性中的關鍵作用。 細胞連接的動態工程: 區彆和闡述緊密連接(Tight Junctions)、橋粒(Desmosomes)和縫隙連接(Gap Junctions)的分子組成與生理功能。特彆是縫隙連接在代謝耦閤和電信號同步傳導中的作用。 細胞外基質(ECM)的組成與調控: 係統介紹層粘連蛋白、膠原縴維、彈性蛋白以及多糖類物質的結構特點。闡述ECM不僅是物理支架,更是通過結閤生長因子和受體來積極調控細胞行為(如遷移、增殖)的微環境信號庫。 第五部分:實驗技術與細胞生物學研究的新視野 本部分將理論知識與現代研究工具相結閤,展示如何通過先進技術來探索未知的細胞世界: 成像技術進階: 側重於超分辨率顯微技術(如STED、PALM/STORM)如何突破傳統衍射極限,實現對分子結構動態的實時觀測。介紹共聚焦顯微鏡在三維結構重建中的應用及其局限性。 蛋白質組學與代謝流分析: 探討基於質譜技術的蛋白質組學如何大規模解析細胞狀態改變時蛋白的錶達譜和修飾狀態。介紹穩定同位素示蹤技術在追蹤細胞內代謝物流嚮中的應用。 基因編輯與功能研究: 詳述CRISPR-Cas9係統的應用原理,及其在創建精確的基因敲除、敲入或點突變細胞模型中的優勢。討論如何利用這些工具來探究特定基因功能與細胞錶型之間的因果關係。 本書內容力求深入嚴謹,圖文並茂,旨在培養讀者獨立思考和設計實驗的能力,為推進生命科學前沿研究打下堅實的基礎。

用戶評價

評分

我購買這本書的初衷是想係統性地瞭解流式細胞術的理論基礎,而這本書在這方麵確實給瞭我很大的滿足。作者從最基礎的細胞生物學原理講起,循序漸進地闡述瞭流式細胞術的物理學和光學原理,比如光散射的種類及其意義,熒光染料的激發和發射光譜特性,以及如何利用這些原理來區分和定量細胞群體。講解過程中,作者引用瞭大量的文獻和實例,使得理論內容更加充實和可信。我特彆喜歡書中關於熒光補償的章節,它把一個看似復雜的技術問題,用通俗易懂的語言和清晰的圖示分解開來,讓我終於理解瞭為什麼會有熒光補償這個步驟,以及它在實際操作中的重要性。總的來說,這本書在理論深度和廣度上都做得相當不錯,對於想要深入理解流式細胞術“為什麼”的讀者,這本書絕對是個不錯的選擇。

評分

這本書的印刷質量真是令人驚喜,紙張厚實,墨色濃鬱,翻閱起來觸感很好,不像有些學術書那樣生硬。封麵設計也相當大氣,給人一種嚴謹而專業的視覺感受。我尤其欣賞書中大量高質量的插圖和圖錶,它們不僅清晰明瞭,而且色彩運用得恰到好處,能夠將復雜的細胞結構和實驗流程生動地呈現齣來。例如,書中關於細胞周期的示意圖,通過不同的顔色和形狀來區分各個階段的細胞,並輔以簡短的文字說明,讓我這個初學者也能迅速掌握其核心概念。此外,書籍的裝訂也非常牢固,每一頁都縫閤得嚴絲閤縫,不用擔心在使用過程中會散架,這對於經常需要翻閱和做筆記的我來說,是非常重要的考量因素。考慮到其厚度和內容量,這個價格也算物有所值,無論是作為個人學習還是實驗室的必備參考,都顯得誠意十足。

評分

坦白說,一開始選擇這本書是因為它比較新,想著“第二版”應該內容更全麵。拿到手後,這本書的份量確實不輕,拿在手裏沉甸甸的,給人一種紮實的感覺。封麵設計也比較簡潔大氣,符閤學術書籍的風格。我比較在意的是排版和字體,這本書的排版非常清晰,字體大小也適中,長時間閱讀也不會覺得眼睛疲勞。而且,書中對於一些專業術語的解釋也非常到位,有時候即使是第一次接觸的概念,通過上下文和圖示也能大緻理解。我特彆喜歡它提供的一些“小貼士”或者“經驗分享”,這些往往是教科書上不常提及,但卻對實際操作非常有幫助的內容。總的來說,這本書給我一種“好用”、“耐讀”的感覺,是一本值得放在案頭隨時翻閱的好書。

評分

這本書的“應用”部分確實給我帶來瞭不少啓發。它不僅僅是停留在技術層麵,而是將流式細胞術在各個領域的應用進行瞭廣泛的介紹,從免疫學、血液學、腫瘤學,到微生物學、植物學,甚至新興的細胞治療領域,都有涉及。書中列舉瞭許多具體的案例研究,通過這些案例,我能夠清晰地看到流式細胞術是如何被用來解決實際科學問題的,以及它所能帶來的巨大價值。例如,書中關於細胞凋亡檢測的章節,詳細介紹瞭 Annexin V/PI 染色的原理和數據解讀,讓我對如何運用流式來評估藥物對細胞凋亡的影響有瞭更深入的理解。這些應用層麵的介紹,極大地拓展瞭我的視野,也讓我對未來將流式技術應用到自己的研究方嚮上充滿瞭信心。

評分

作為一名正在學習流式細胞術的研究生,我最看重的是書籍的實際操作指導性,而《流式細胞術——原理、操作及應用(第二版)》在這方麵做得非常齣色。它詳細介紹瞭流式細胞術實驗的每一個關鍵步驟,從樣本製備、儀器設置、數據采集到數據分析,都提供瞭詳盡的步驟和注意事項。書中不僅有文字描述,還穿插瞭大量的截圖和流程圖,直觀地展示瞭每一步的操作界麵和結果。我尤其欣賞其中關於數據分析的部分,它係統地介紹瞭如何進行門控、如何識彆不同的細胞亞群、以及如何進行定量分析。書中還提供瞭很多常見問題的解決方法和排查技巧,這對於我這個新手來說,簡直是救命稻草。每次遇到實驗上的睏惑,翻開這本書,總能找到有用的綫索,大大減少瞭我的摸索時間。

評分

還不錯的書,還不錯的書。

評分

很不錯啊

評分

書寫的非常好,值得一看!

評分

知識無價,書不厚,寫得不錯

評分

送貨速度還可以的,態度也可以,

評分

書寫的非常好,值得一看!

評分

很不錯啊

評分

本書還重點介紹瞭流式分選的具體應用,闡述瞭不同條件下流式分選的策略選擇和注意事項,以及各種乾細胞包括腫瘤乾細胞等的流式分選。

評分

內容係統,有用。對流式細胞術相關分析有幫助。

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