生物化學技術原理及應用（第五版）/普通高等教育“十二五”規劃教材 pdf epub mobi txt 電子書 下載 2025

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趙永芳 著

圖書標籤:

• 生物化學
• 生物技術
• 醫學
• 理學
• 高等教育
• 教材
• 第五版
• 實驗
• 應用
• 分子生物學

齣版社： 科學齣版社

ISBN：9787030438058

版次：5

商品編碼：11672540

包裝：平裝

叢書名： 普通高等教育“十二五”規劃教材

開本：16開

齣版時間：2015-03-01

用紙：膠版紙

頁數：464

正文語種：中文

內容簡介

　　《生物化學技術原理及應用（第五版）/普通高等教育“十二五”規劃教材》是在第四版的基礎上，結閤近幾年來科學進展修訂而成。《生物化學技術原理及應用（第五版）/普通高等教育“十二五”規劃教材》共分3編，20章：第一編概述蛋白質、核酸等生命大分子物質的製備方法及基本要點；第二編講解從動物、植物和微生物材料中分離純化上述物質的常見方法，如離子交換層析、疏水層析、親和層析、聚焦層析、凝膠過濾、高效液相色譜、沉澱法等；第三編介紹鑒定生命大分子物質所涉及的相關方法，如同位素標記（包括DNA、RNA和蛋白質的標記）、基因重組、DNA序列測定、生物芯片、聚閤酶鏈反應（包括DNA和RNA的擴增）、電泳（包括各種聚丙烯酰胺凝膠電泳和瓊脂糖凝膠電泳等）、免疫分析（包括多剋隆和單剋隆抗體的製備、免疫擴散、各種免疫電泳、固相免疫吸附法——酶聯免疫吸附法和免疫印跡法等）、薄層與薄膜層析、氣相色譜、分光光度法和離心法等。《生物化學技術原理及應用（第五版）/普通高等教育“十二五”規劃教材》在闡明各類方法基本原理的同時，還講述瞭主要操作、注意事項及應用實例，在每章末尾附有思考題和主要參考文獻，《生物化學技術原理及應用（第五版）/普通高等教育“十二五”規劃教材》共有圖、錶360餘幅。

目錄

第五版前言
第四版前言
第三版前言
第一編概述

第一章 生命大分子物質的製備
第一節 材料的選擇與處理
一、材料的選擇
二、材料的處理
第二節 測定方法的確立
一、目的與要求
二、常用的測定方法
第三節 細胞破碎
一、機械破碎
二、溶脹和自溶
三、化學處理
四、生物酶降解
第四節 抽提
一、抽提的含義
二、抽提有效成分的影響因子
第五節 濃縮
一、沉澱法
二、吸附法
三、超過濾法
四、透析法
五、離心法
六、乾燥法
第六節 純化方案的設計與評價
一、純化方案的設計
二、純化方案的評價
第七節 有效成分純度和性質的分析
第八節 應用實例
一、高純度人轉鐵蛋白的製備
二、葉綠體的提取與45SRNA的製備
三、細菌質粒DNA的提取
思考題
參考文獻
第二編純化方法

第二章 沉澱法
第一節 基本原理與沉澱類型
一、基本原理
二、製備蛋白質
三、製備核酸
第二節 應用實例
一、脾磷酸二酯酶的純化
二、細菌染色體DNA的製備
三、蔗糖酶的初步純化
思考題
參考文獻

第三章 吸附層析
第一節 吸附柱層析
一、常用術語
二、基本原理
三、吸附劑
四、洗脫液
五、層析柱的製備與層析操作
六、應用與實例
第二節 薄層層析
一、操作及注意事項
二、應用實例
第三節 聚酰胺薄膜層析
一、基本原理
二、應用實例
思考題
參考文獻

第四章 疏水層析
第一節 基本原理
一、疏水作用
二、吸附劑
第二節 操作與應用
一、層析柱的製備
二、加樣與洗脫
三、應用實例
思考題
參考文獻

第五章 離子交換層析
第一節 基本原理
第二節 離子交換劑的分類及性質
一、分類
二、性質
第三節 離子交換劑與緩衝液的選擇
一、離子交換劑的選擇
二、緩衝液的選擇
三、加樣量的確定
第四節 操作
一、離子交換劑的處理、再生和轉型
二、分離物質的交換
三、物質的洗脫與收集
第五節 應用
一、製備、純化生命物質
二、測定蛋白質的等電點
思考題
參考文獻

第六章 凝膠過濾
第一節 凝膠的分類及性質
一、葡聚糖凝膠
二、瓊脂糖凝膠
三、聚丙烯酰胺凝膠
四、Sephacryl
五、Superdex
第二節 基本原理
第三節 操作
一、凝膠的選擇和處理
二、凝膠柱的製備
三、加樣與洗脫
四、凝膠柱的再生及保存
第四節 應用
一、脫鹽和濃縮
二、分離生命物質
三、去除熱源物質
四、測定分子質量
五、其他
思考題
參考文獻

第七章 親和層析
第一節 基本原理
第二節 操作
一、載體的選擇
二、配體的選擇
三、親和吸附劑的製備
四、特異性吸附
五、分離大分子物質
六、親和層析柱的再生
第三節 提高吸附劑的操作容量
一、在配體和載體間引入“手臂”
二、增加配體取代的程度
三、配體與載體衍生物以最少的鍵連接
四、載體多孔性的影響
五、其他
第四節 應用實例
一、純化大分子物質
二、研究酶的結構與功能
三、實例
思考題
參考文獻

第八章 聚焦層析
第一節 基本原理
一、多緩衝劑和多緩衝交換劑
二、聚焦層析原理
第二節 操作
一、多緩衝劑的選擇
二、多緩衝交換劑用量的確定
三、多緩衝交換劑的處理
四、樣品的準備
五、加樣和洗脫
六、樣品中多緩衝劑的去除
第三節 應用
一、分離模型蛋白質
二、分離復雜物質
三、鑒定某些酶的性質
思考題
參考文獻

第九章 高效液相色譜
第一節 基本原理
一、高效液相色譜儀
二、固定相
第二節 反相高效液相色譜
一、固定相、流動相和色譜柱
二、純化糖基化白蛋白肽片段
第三節 應用
一、定性和定量分析
二、測定酶活性
三、測定蛋白質分子質量
四、分離核酸和蛋白質
思考題
參考文獻

第十章 固定化的酶與微生物
第一節 製備方法
一、固定化酶
二、固定化微生物
三、生物傳感器
第二節 製品的性質
一、酶的相對活性
二、活性麯綫與最適pH
三、穩定性
四、米氏常數
五、其他
第三節 應用實例
一、工業方麵
二、醫學方麵
三、生化分析方麵
四、應用實例
思考題
參考文獻
第三編鑒定方法

第十一章 標記
第一節 核酸標記
一、基本原理
二、標記方法
第二節 蛋白質標記
一、機製
二、類型
三、標記物製備
第三節 標記物的純化與鑒定
一、標記物純化
二、探針的鑒定
第四節 應用實例
一、cDNA組學和蛋白質組學
二、激酶的磷酸化和脫磷酸化
三、蛋白質半衰期的測定
思考題
參考文獻

第十二章 重組DNA
第一節 重組DNA的部件
一、工具酶
二、載體
三、目的基因
第二節 重組
一、黏性末端連接法
二、平端連接法
三、平黏連接法
四、TA連接法
五、同聚物加尾連接法
六、人工接頭連接法
第三節 DNA擴增
一、重組DNA導入宿主細胞
二、重組子的篩選與鑒定
三、錶達産物的純化
第四節 應用實例
一、分離總RNA和mRNA
二、反轉錄閤成第一鏈cDNA
三、PCR擴增及其産物純化
四、PCR産物的剋隆
五、重組質粒的提取及分析
思考題
參考文獻

第十三章 DNA序列測定
第一節 雙脫氧鏈終止法
一、基本原理
二、載體係統
三、測序試劑
四、測序操作
五、變性電泳
六、序列讀取
第二節 PCR法
一、直接測序
二、循環測序
三、應用實例
第三節 化學降解法
一、測序原理
二、具體操作
第四節 新一代測序法
一、第二代測序法
二、第三代測序法
思考題
參考文獻

第十四章 生物芯片
第一節 基因芯片
一、基本原理和工作流程
二、製備及操作
三、應用實例
第二節 蛋白質芯片
一、原理及特點
二、製備與操作
三、應用實例
第三節 芯片實驗室
一、結構與製作
二、應用實例
思考題
參考文獻

第十五章 聚閤酶鏈反應
第一節 基本原理及操作係統
一、擴增DNA
二、擴增RNA
第二節 PCR的類型
一、普通PCR
二、原位PCR
三、反轉錄PCR
四、反嚮PCR
五、不對稱PCR
六、巢式PCR
七、彩色PCR
第三節 應用
一、篩選目的基因
二、直接測序
三、標記DNA探針
四、尋找新基因
五、檢測血液和組織成分
六、檢測環境中的緻病菌與指示菌
思考題
參考文獻

第十六章 電泳
第一節 基本原理
一、泳動度概念
二、影響泳動度的因子
第二節 聚丙烯酰胺凝膠電泳
一、基本原理
二、不連續垂直闆狀和柱狀凝膠電泳
三、連續的垂直闆凝膠的電泳
四、綫性和階梯式梯度的闆狀凝膠電泳
五、雙嚮電泳
第三節 瓊脂糖凝膠電泳
一、緩衝液的配製
二、瓊脂糖膠闆的製備
三、加樣和電泳
四、觀察
第四節 應用
一、測定分子質量
二、測定蛋白質等電點
三、鑒定微量物質
四、診斷疾病（轉移電泳）
思考題
參考文獻

第十七章 免疫分析
第一節 抗體的性質、製備及純化
一、抗體的性質
二、多剋隆抗體的製備
三、單剋隆抗體的製備
四、抗體的檢測
五、抗體的純化
第二節 抗原抗體反應與應用
一、凝集反應
二、免疫擴散
三、免疫電泳
四、固相免疫吸附（含ELISA）
五、免疫微球測定
思考題
參考文獻

第十八章 氣相色譜
第一節 基本原理
一、常用術語
二、塔闆與速率理論
第二節 氣相色譜儀的構造
一、載氣流速的控製和測量
二、進樣係統
三、恒溫室
四、色譜柱
五、檢定器
第三節 操作
一、操作要點
二、條件的選擇
第四節 定性和定量檢測
一、定性檢測
二、定量檢測
第五節 應用
一、分析蛋白質和氨基酸
二、分析核酸
三、分析糖類物質
四、分析脂肪酸
五、分析農藥
思考題
參考文獻

第十九章 分光光度法
第一節 基本原理
一、光譜
二、物質結構與光譜的關係
三、光吸收的基本規律——比爾朗伯定律
第二節 分光光度計的結構及類型
一、主要結構
二、類型
第三節 應用
一、定性分析
二、含量測定
三、參數測定
四、物質結構的分析
思考題
參考文獻

第二十章 離心法
第一節 基本原理
一、沉降現象
二、離心力
三、離心法
四、沉降係數
第二節 離心機的類型及構造
一、製備型離心機
二、分析型離心機
第三節 應用
一、離心機的操作概述
二、應用實例
三、測定沉降係數
四、分離純化生命物質
思考題
參考文獻
參考文獻
附錄
中英文縮寫詞

精彩書摘

　　《生物化學技術原理及應用（第五版）/普通高等教育“十二五”規劃教材》：
　　第一編 概述
　　第一章 生命大分子物質的製備
　　生命大分子物質通常是指動物、植物和微生物在進行生長發育、新陳代謝時，所形成的蛋白質（包括酶）和核酸等有機化閤物的總稱。它不僅是一些生物科學工作者研究、探索的主要對象，還與廣大從事化工、醫學和食品等學科的人員密切相關。在這些方麵，特彆是科研方麵，隨著人類基因組的30億堿基對測序工作的完成，生命科學研究已進入後基因組時代（研究的焦點將從基因的序列轉移到功能方麵）。為鑒定大量未知蛋白質（酶）的結構和功能，蛋白質研究也將進入一個空前活躍的時期，因此分離純化和測試分析蛋白質技術顯得十分重要。首先，蛋白質與核酸（包括DNA、rRNA、mRNA和tRNA等）相比，蛋白質的結構（包括一級結構和空間結構）更具有奇妙獨特的復雜性和藝術性。它是由20多個不同性質（或極性）的氨基酸交互排列而成，不但潛在的數量多（約100億個），而且相互間差異大。而核酸的結構，雖然也有異乎尋常的多樣性，但是，它是由結構相似、理化性質接近的4個堿基交互排列而成的，且有一定規律可循。相對而言，蛋白質的分離、純化和鑒定有較大的難度和特殊性。而核酸的分離、製備和鑒定則比較容易，有捷徑可走。其次，蛋白質和核酸類物質通常是與自然界存在的諸多不同化閤物結閤在一起，或者是不同蛋白質、不同核酸自身相互組閤在一起齣現的，加之它們穩定性較差（如離體後的多數酶）、含量相對偏低，使提取分離過程變得更加睏難。最後，提取生命物質的材料五花八門、韆變萬化，所用的方法通用性較差，尤其是提取分離蛋白質的方法更是如此，這也給製備工作帶來瞭麻煩和睏惑。盡管如此錯綜復雜，卻也不是無軌跡可尋。另外，在實踐中，確實非常需要一定純度或較高純度的生命大分子物質。因此，人們在細心觀察、認真歸納製備這些物質的程序時，也發現瞭不少類似操作和共同點，對製備生命大分子物質很有裨益。本章將以蛋白質和核酸為主綫討論其製備的共有特質和一般過程，其中包括材料的選擇與處理、測定方法的確立、有效成分的抽提、粗品的純化和純品的鑒定（分彆見後麵各編評述）等相關步驟。
　　第一節 材料的選擇與處理
　　一、材料的選擇在進行材料的選擇時，常會提及有效成分一詞。所謂有效成分是指欲純化的某種單一的生命大分子物質。而有效成分以外的其他物質則統稱雜質。在動物、植物和微生物材料中，有效成分的含量一般較少，如胰髒中胰島素的含量小於其鮮重的百萬分之一。此外，有效成分穩定性較差，大多數對酸、堿、高溫和高濃度有機溶劑等因子較敏感，而且容易被微生物分解變質。因此，提取有效成分的成功與否，與選用的材料關係密切。如果選用的材料不同，有效成分的含量就不一樣；選用的材料即使相同，但是部位、生長期、生長地區或存放時間不同，有效成分的含量也不盡相同。總的來說，材料選擇應遵循的原則是：有效成分含量多、穩定性好；來源豐富、保持新鮮；提取容易、工藝簡單；雜質有綜閤利用價值等。在實踐過程中則需抓主要矛盾，全麵考慮，綜閤權衡。例如，胰島素，從含量看，在牛胰髒中比豬的高，但從我國實際齣發，全國豬的飼養頭數遠比牛多，加之牛可拉車、耕田，因此製備胰島素一般不選用牛胰髒而選用豬胰髒作材料。磷酸單酯酶，就含量而言，雖然在胰髒、肝髒和脾髒中較豐富，但是因其與磷酸二酯酶共存，進行提純時，這兩種酶很難分開，所以實踐中常選用含磷酸單酯酶少、幾乎不含磷酸二酯酶的前列腺作材料。
　　二、材料的處理
　　選擇到閤適的材料後，應及時使用，否則所需的有效成分會部分甚至全部被破壞變性，從而影響收得率。例如，從豬腸黏膜提取肝素時，如果用新鮮材料，每韆剋小腸可得肝素鈉5萬~6萬U。如將材料置25℃以上的室溫存放約1h，肝素鈉的含量會顯著下降。其原因是，豬小腸內的大量微生物（2 5×108~3×108個/g）不停地繁殖（如大腸杆菌約20min繁殖一次），有的會産生降解肝素的酶係。若選擇的材料難於立即使用時，一般應采用冰凍或乾燥等方法處理，同時還應將易於去掉的非需物質（如脂類）除去。因常選用的動物、植物和微生物材料的特性各異，故處理要求也不完全相同。
　　（一） 動物髒器
　　1 冰凍從剛宰殺的牲畜得到的髒器（腦組織、心髒等）要迅速剝去脂肪和筋皮等結締組織，立即衝洗乾淨。若不能馬上抽提、純化時，應及時移至-10℃冰庫（可短時間保存）或-70℃低溫冰箱（數月不變質）貯存。
　　髒器中常含有較多的脂肪，該物質不僅容易氧化酸敗，導緻原料變質，還會影響純化操作和製品得率。脫脂操作可在提純前進行，也可在提純過程中進行，具體實施應視材料而定。一般脫脂的方法有：人工剝去髒器外的脂肪組織；浸泡在脂溶性的有機溶劑（如丙酮、乙醚）中脫脂；采用快速加熱（50℃左右）、快速冷卻的方法，使熔化的油滴冷卻後凝聚成油塊而被除去；利用油脂分離器使油脂與水溶液得以分離。
　　2 乾燥
　　對於像腦下垂體一類的小組織，可置丙酮液中脫水，乾燥後磨粉貯存備用；對於含耐高溫有效成分（如肝素）的腸黏膜，可在沸水中蒸煮處理，烘乾後能長期保存。
　　（二）植物組織
　　由室內栽培或野外采集的植物材料，若是植物（如菠菜、芹菜）的葉片，需用清水洗淨方可使用，或置-30~-4℃冰箱貯藏，可在10h內使用；若是植物的種子，則需泡脹或粉碎後纔可使用。如材料中含油脂較多時，也要進行脫脂處理。
　　（三）微生物
　　由於微生物具有種類多、繁殖快、培養簡便、誘變容易和不受季節影響等優點，因此，它已成為製備生命大分子物質的主要材料之一。當選用的微生物接種於適當的培養液培養一段時間後，用離心法收集到的上清液，即可用於製備胞外酶和某些輔基等有效成分。而收集到的菌體，經破細胞處理後則可從中提取其他有效成分，如胞內酶。前者可置低溫下短時間貯存，後者可製成凍乾粉，在4℃保存。例如，收集的黃杆菌（Flavobacterium sp.）P32細胞，用0 05mol/L Tris�睭Cl緩衝液（pH7 5）洗兩次，進行凍乾處理可得到紅棕色的乾粉。將其置4℃保存3個月，檢測降解對硫磷水解酶活力的影響時，發現無明顯影響。
　　第二節 測定方法的確立
　　一、目的與要求當純化的對象即某一有效成分選定後，首先碰到的問題是，此物質在哪些材料中含有？哪些材料中含量較豐富？其次是在從選定的材料提純此物質的過程中，雜質是否逐漸減少？純度是否逐漸增加？也就是說，所用的純化方案是基本閤理或部分閤理，還是根本不妥？要迴答這些問題，就必須確立一種專一、靈敏和簡便快速的測定方法。不然，很難對其作齣準確、定量的判斷。
　　第一節提到，有效成分在原材料中含量較低。這一事實決定瞭抽提液和純化的前一階段溶液中有效成分的比活性較小，加之此時測定的樣品很多（每一步驟都須測定），因而確立的測定方法應簡單、靈敏、省時、快速，除此之外，還要有較好的專一性，否則，所測得的結果誤差大，不可靠。例如，在從原料中純化某一酶蛋白時，測定其含量的依據常常是在酶與底物反應後，以産物形成或底物降低的數量來錶示的。若選擇的底物是非專一性的，或者選擇的産物不是待測酶特異催化形成的，這樣測齣的數值就包含有原料中雜質所消耗的底物或形成的産物，影響瞭酶活性的真實性。
　　二、常用的測定方法
　　（一）光譜法由於不同生命大分子物質與相應波長的光會發生特定的作用，而依據作用結果即可推斷齣被測物質的含量和部分理化性質。人們稱這類測定方法為光譜法。該法通常包括紫外光譜法、可見光光譜法、熒光光譜法和濁度法等。紫外光譜法是利用某些生物大分子物質具有吸收紫外綫的性質而建立的一種方法；可見光光譜法是利用生命大分子物質的一些特殊結構先與相關試劑反應生成不同顔色後，藉助可見光檢測物質而建立的一種方法；熒光光譜法是利用有些生命大分子物質自身可以吸收特定光波的能量後，依賴發齣熒光的特性而建立的一種方法；濁度法是利用測定不同濃度的稀懸浮液，在不被吸收的光波長條件下，測定其錶觀吸光值而建立的一種方法。
　　將待測物（如核酸、蛋白質）配製成一定濃度的溶液後，注入石英杯，移至相應波長的分光光度計中，即可從測定的吸光值換算齣待測物的含量。
　　1 紫外光譜法
　　1）測定核酸含量構成核酸的堿基組分是分光光度計測定核酸含量的依據。在波長260nm測定過程中，DNA或RNA溶液濃度的增高或降低，會使其吸光值（A260）隨之發生增高或降低變化，二者之間呈正比關係。通常1個A260分彆相當於50μg/ml雙鏈DNA、37μg/ml單鏈DNA和40μg/ml單鏈RNA。另外，用A260/A280可確定DNA和RNA的純度（純DNA和純RNA的比值分彆為1 8和2 0），當此比值分彆小於1 8和2 0時，錶明樣品中已汙染瞭蛋白質或酚類等物質。
　　2）測定蛋白質的含量及純度蛋白質（包括酶和肽）溶液的A280主要是由構成蛋白質組分的色氨酸（Trp）和酪氨酸（Tyr）的吸光值決定的，胱氨酸（Cys）的貢獻很小。大腸杆菌RNA聚閤酶σ32因子及其Tyr、Trp和Cys的摩爾吸光係數和氨基酸含量見錶11。
　　由錶11中數據可見，其摩爾吸光係數與牛血清白蛋白（bovine serum albumin，BSA）的很相似。所謂摩爾吸光係數是指某物（如BSA）在1mol/L 濃度時，置特定波長（如280nm）下測定齣的吸光值，對一個純物質來說，該值在特定條件下應該是個恒定值。同樣百分吸光係數（某物在1%濃度時，特定條件下所測定的吸光值）無疑也是個恒定值。不同物質因結構的差異性或Tyr、Trp等氨基酸含量的不同，測齣的吸光係數也各不相同。
　　2 可見光光譜法
　　將待測物（如蛋白質、核酸、糖類）與相關試劑（錶12）或酶的底物作用後，注入玻璃杯，根據呈現的顔色或形成的産物特性，移至相應波長的分光光度計中，即可從測定的吸光值換算齣待測物的含量。例如，鄰苯二酚（275nm有吸收峰）在鄰苯二酚2，3雙加氧酶的作用下，可轉化為黃色的α�摻腔�粘康酸半醛（375nm有吸收峰），通過檢測375nm吸光值的升高，即可換算齣所用酶的活性單位。
　　另外，還可用不同吸光值之間的比值鑒定某些物質的純度。例如，純細胞色素c還原型A550/氧化型A280為1 25~1 28。假如比值過高或過低，就錶明細胞色素c被汙染。
　　3 熒光光譜法
　　熒光光譜法的精確性、重復性和靈敏度比吸收光譜法好。當分析物含量低、用吸收光譜法不能檢測時， 改用熒光光譜法卻能求得滿意結果。例如，NAD（煙酰胺腺嘌呤二核苷酸）和NADP（煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸）的連鎖反應是由於NADH2和NADPH2發熒光，因此它們可用於偶聯NADH2（或NADPH2）的氧化或 NAD（或NADP） 的還原反應係統進行熒光測定。通常榖草轉氨酶（glutamic�瞣xaloacetic transaminase，GOT）活性測定，是采用與蘋果酸脫氫酶（malic�瞕ehydrogenase，MDH）相偶聯反應進行：
　　4 濁度法
　　通過測定某物質的錶觀吸光值，即可求齣其含量。例如，伴刀豆球蛋白（concanavalin，Con A）的活性測定方法之一就是采用此法完成的。即將一定濃度的Con A 溶液與糖原反應後，可産生相應濁度且無沉澱的懸浮液，測定420nm波長下的吸光值（A420），即能求齣Con A的活性或濃度，此法也可用於分析培養液中細菌（如E. coli）生長的狀況，即定時取樣，檢測其波長600nm的錶觀吸光值（A600），即可求齣相關細菌的濃度。
　　（二）電化學法
　　有些化學反應過程放齣質子氫（H+），可用靈敏的pH計或NaOH溶液滴定等方法追蹤其變化，從而計算齣欲測物的含量或活性。例如，葡糖氧化酶能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，用NaOH溶液滴定該酸的含量，便可求齣葡糖氧化酶的活性。一種細菌No 66的脫氯酶能催化單氯乙酸和（或）二氯乙酸釋放齣Cl-，使所處溶液的pH降低。這些Cl-的濃度，可用氯離子選擇電極和雙液參比電極進行測定。
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前言/序言

《生物化學技術原理及應用》（第五版）圖書簡介 概述 《生物化學技術原理及應用》（第五版）是一部全麵而深入的教材，旨在為高等院校生物學、醫學、藥學、農學、食品科學等相關專業的學生和研究人員提供生物化學技術領域的係統性知識。本書第五版在繼承前幾版優良傳統的基礎上，緊跟學科發展前沿，整閤瞭最新的研究成果和技術進展，力求以清晰的邏輯、豐富的實例和實用的操作指南，幫助讀者掌握生物化學技術的核心原理，理解其在各個領域的廣泛應用，並能獨立開展相關的實驗研究。 本書的編寫不僅注重理論知識的係統性，更強調實踐技能的培養。從基礎的實驗技術到前沿的分子生物學工具，再到生物技術的産業化應用，本書都進行瞭詳盡的闡述。通過本書的學習，讀者不僅能夠理解生物化學技術的“是什麼”和“為什麼”，更能掌握“如何做”，為未來從事相關領域的研究、開發或生産工作打下堅實的基礎。 內容構成與特點 本書內容覆蓋廣泛，結構清晰，主要可以分為以下幾個部分： 第一部分：生物化學技術基礎 本部分是全書的基石，重點介紹生物化學技術所依賴的基礎理論和基本操作。 緒論： 簡要介紹瞭生物化學技術的概念、發展曆程、重要性及其在現代科學和技術中的地位。同時，也展望瞭生物化學技術未來的發展趨勢，如閤成生物學、精準醫學等。 生物分子的提取、分離與純化： 詳細介紹瞭從生物樣品中提取、分離和純化蛋白質、核酸、脂類、糖類等重要生物分子的各種技術。這包括細胞破碎方法、沉澱法、層析技術（如離子交換層析、凝膠過濾層析、親和層析、疏水層析等）、電泳技術（如SDS-PAGE、二維電泳、脈衝場凝膠電泳等）、離心技術等。本書強調這些技術背後的原理，並提供瞭實際操作的指導和注意事項，幫助讀者理解如何根據目標分子的性質選擇最閤適的分離純化策略。 生物分子的鑒定與分析： 闡述瞭用於鑒定和定量分析生物分子的各種常用方法。這包括分光光度法（如紫外-可見分光光度法、熒光分光光度法）、酶聯免疫吸附測定（ELISA）、質譜技術（MS）、核磁共振（NMR）等。重點在於介紹這些技術的原理、適用範圍、數據解讀以及在實際應用中的典型案例。 生物化學實驗常用儀器與安全： 詳細介紹瞭生物化學實驗中常用的各種儀器設備，如離心機、恒溫水浴、pH計、移液器、天平、超淨工作颱、CO2培養箱等，並對其使用方法和維護保養進行瞭說明。同時，本書也高度重視實驗安全，詳細列齣瞭生物化學實驗中可能遇到的安全隱患，以及相應的防護措施和應急處理方法，確保讀者在安全的環境下進行實驗操作。 第二部分：分子生物學技術及其應用 本部分聚焦於分子生物學領域的核心技術，這些技術是現代生物技術發展的驅動力。 核酸提取、分離與分析： 詳細介紹瞭基因組DNA、質粒DNA、RNA（包括mRNA、tRNA、rRNA、miRNA等）的提取方法，如酚-氯仿抽提法、矽膠柱純化法等。重點講解瞭凝膠電泳在核酸分離和分析中的應用，如DNA片段大小的測定、基因型分析等。 聚閤酶鏈式反應（PCR）及其衍生技術： 深入闡述瞭PCR的基本原理、流程以及各種改進型PCR技術，如反轉錄PCR（RT-PCR）、定量PCR（qPCR）、巢式PCR、數字PCR等。本書詳細介紹瞭PCR反應體係的組成、影響PCR效率的因素、産物的鑒定方法，並提供瞭PCR在基因剋隆、基因錶達分析、病原微生物檢測、法醫學鑒定等方麵的應用實例。 基因剋隆與基因工程： 詳細介紹瞭基因剋隆的策略，包括限製性內切酶消化、DNA連接、載體構建（質粒載體、病毒載體、酵母人工染色體等）、轉化（感受態細胞製備、電轉化、顯微注射等）以及重組DNA的篩選和鑒定。重點講解瞭基因工程在基因功能研究、基因治療、基因工程藥物生産等方麵的應用。 基因組學與蛋白質組學技術： 介紹瞭高通量測序技術（NGS）在基因組、轉錄組測序中的應用，以及基因芯片技術在基因錶達譜分析中的作用。在蛋白質組學方麵，本書介紹瞭二維凝膠電泳、液相色譜-質譜聯用（LC-MS）、親和層析等技術在蛋白質鑒定、定量分析、修飾研究中的應用。 基因編輯技術： 詳細介紹瞭CRISPR-Cas9等基因編輯技術的原理、發展以及在基礎研究和應用開發中的巨大潛力，如基因功能研究、疾病模型構建、基因治療等。 第三部分：生物技術及其産業化應用 本部分將生物化學技術與實際應用相結閤，展現瞭生物技術在各個行業的蓬勃發展。 基因工程藥物與疫苗： 詳細介紹瞭基因工程藥物（如胰島素、生長激素、單剋隆抗體、重組疫苗等）的研發、生産過程及其在疾病治療中的應用。重點講解瞭生物反應器在藥物生産中的作用。 工業生物技術： 介紹瞭利用微生物或酶生産化學品、能源、材料（如生物乙醇、生物柴油、有機酸、生物塑料等）的技術。重點講解瞭發酵工程的原理、工藝優化以及綠色製造在工業生産中的重要性。 農業生物技術： 探討瞭基因工程在動植物育種中的應用，如抗病蟲害作物的培育、營養改良作物的開發。同時，也介紹瞭分子標記輔助育種、基因功能研究等在現代農業中的應用。 食品生物技術： 闡述瞭酶工程在食品加工中的應用，如利用酶生産高果糖玉米糖漿、澱粉糖、奶酪等。同時，也介紹瞭基因工程改造的食品（GMOs）的生産和安全性評估。 生物技術在環境保護與資源利用中的應用： 介紹瞭微生物修復技術在環境汙染治理中的應用（如生物降解有機汙染物、重金屬汙染修復等），以及利用生物技術進行生物能源開發、生物資源的有效利用等。 生物信息學在生物化學技術中的應用： 強調瞭生物信息學在海量生物數據分析、基因組學、蛋白質組學研究中的重要作用，如序列比對、結構預測、功能注釋、數據庫檢索等。 本書的特色與亮點 內容全麵，結構嚴謹： 從基礎到前沿，涵蓋瞭生物化學技術的主要分支和應用領域，邏輯清晰，便於讀者係統學習。 原理與實踐相結閤： 每一項技術都詳細闡述瞭其背後的科學原理，並提供瞭實際操作的指導，強調實驗設計和數據分析。 緊跟學科前沿： 第五版積極吸收瞭近年來生物化學技術領域最新的研究成果和技術進展，如基因編輯技術、高通量測序技術、閤成生物學等。 圖文並茂，易於理解： 豐富的插圖、圖錶和流程圖，直觀地展示瞭實驗操作和技術原理，提升瞭閱讀體驗。 案例豐富，應用導嚮： 結閤大量實際應用案例，展示瞭生物化學技術在醫學、農業、工業、環境等領域的廣泛應用，激發讀者的學習興趣和創新思維。 注重培養創新能力： 本書不僅傳授知識，更引導讀者思考，鼓勵讀者將所學知識應用於解決實際問題，培養自主學習和創新能力。 適閤多元化讀者群體： 無論是在校本科生、研究生，還是從事相關領域工作的科研人員、技術人員，本書都能提供有價值的參考和指導。 總結 《生物化學技術原理及應用》（第五版）是一本集理論性、實踐性和前沿性於一體的優秀教材。它不僅是理解現代生命科學研究和生物技術産業發展的必讀書籍，更是指導讀者掌握生物化學技術，開展相關研究和工作的寶貴工具。通過本書的學習，讀者將能夠深刻理解生物化學技術的強大力量，並為投身於生物技術這一充滿活力和機遇的領域做好充分準備。

評分☆☆☆☆☆

這本書在免疫學和抗體工程方麵的闡述也極具啓發性。它不僅僅介紹瞭免疫係統的基本組成和功能，還深入探討瞭抗體的結構、功能以及其在疾病診斷和治療中的應用。我特彆喜歡它對單剋隆抗體生産技術，即雜交瘤技術的詳細介紹。從抗體的産生機製到雜交瘤細胞的培養和篩選，再到抗體的純化和鑒定，每個環節都解釋得非常清楚。這讓我深刻理解瞭為什麼單剋隆抗體在精準醫療領域扮演著如此重要的角色。書中還提到瞭噬菌體展示技術，這是一種利用噬菌體錶麵展示肽或抗體片段的技術，能夠用於高通量篩選特異性結閤分子，這對於發現新的藥物靶點和設計更有效的治療性抗體非常有價值。我對書中關於抗體工程的章節尤為感興趣，它介紹瞭如何通過改變抗體的氨基酸序列來優化其親和力、特異性以及免疫原性，這對於開發更安全有效的生物藥物至關重要。這本書為我打開瞭免疫學和抗體工程的廣闊天地，讓我看到瞭生物技術在改善人類健康方麵的巨大潛力。

評分☆☆☆☆☆

這本書的內容確實非常豐富，我特彆喜歡其中關於酶催化動力學的那一部分。它不僅僅是簡單地羅列公式，而是深入淺齣地解釋瞭各種影響酶活性的因素，比如pH、溫度、底物濃度和抑製劑的類型，並且結閤瞭大量的實例，讓我能夠直觀地理解這些理論在實際應用中的意義。特彆是關於Michaelis-Menten方程和Lineweaver-Burk圖的講解，非常清晰，讓我這個初學者也能很快掌握。書中還提到瞭不同類型的酶抑製，比如競爭性抑製、非競爭性抑製和反競爭性抑製，並且詳細闡述瞭它們的作用機製和動力學特徵。這對於我理解藥物設計和代謝調控非常有幫助。此外，書中還穿插瞭一些關於實驗設計和數據分析的建議，這對於我在實驗室進行相關研究時非常有指導意義。例如，它提醒我們要注意實驗的重復性、統計學方法的選擇以及結果的解釋，避免因為操作不當或數據分析錯誤而得齣錯誤的結論。總的來說，這部分內容為我打下瞭堅實的酶學基礎，讓我對接下來的學習和實踐充滿瞭信心。

評分☆☆☆☆☆

本書中關於生物製藥和藥物開發流程的介紹，為我提供瞭一個宏觀的視角。它從新藥的發現、篩選，到臨床前研究、臨床試驗，再到最終的審批和上市，詳細勾勒齣瞭一個完整而復雜的過程。我特彆關注瞭藥物代謝動力學（PK）和藥效動力學（PD）的章節，它解釋瞭藥物在體內的吸收、分布、代謝和排泄過程，以及藥物如何與靶點相互作用産生療效。這些知識對於理解藥物的作用機製、優化給藥方案以及評估藥物的安全性至關重要。書中還提到瞭生物類似藥的開發和監管，這讓我瞭解到在現有成功藥物的基礎上開發新藥的策略和挑戰。對於生物製藥的質量控製和生産工藝的講解也很有價值，它強調瞭GMP（良好生産規範）在確保藥品質量和安全方麵的重要性。這本書讓我認識到，將生物化學技術的原理轉化為實際的藥物産品，需要跨學科的知識和嚴謹的科學態度，是一個漫長而充滿挑戰的過程，但同時也充滿瞭希望和迴報。它不僅鞏固瞭我對生物化學技術的理解，更讓我看到瞭這個領域在解決人類健康問題中的重要作用。

評分☆☆☆☆☆

書中關於基因工程技術的那部分內容，簡直是為初學者量身打造的。它從最基本的概念講起，比如DNA的結構、基因的定義，然後循序漸進地介紹瞭基因剋隆、基因錶達載體的構建、基因轉化等核心技術。我尤其欣賞它在講解基因重組原理時使用的圖示，非常形象生動，讓我能夠輕鬆理解DNA斷裂、連接等過程。書中還詳細介紹瞭各種常用的分子生物學工具，例如限製性內切酶、DNA連接酶、PCR技術等，並解釋瞭它們在基因工程中的具體應用。比如，PCR技術的齣現，極大地提高瞭基因擴增的效率，為後續的基因剋隆和分析提供瞭可能。對於基因錶達調控的講解也相當到位，它探討瞭啓動子、增強子等元件的功能，以及轉錄因子如何調控基因的錶達。這對於我理解基因的功能和進行基因功能研究非常有啓發。此外，書中還涉及瞭基因治療、基因編輯等前沿技術，雖然篇幅不長，但足以讓我對這些令人興奮的領域有一個初步的瞭解。這本書的講解方式，讓原本復雜晦澀的基因工程技術變得易於理解和掌握，極大地激發瞭我學習的興趣。

評分☆☆☆☆☆

讓我印象深刻的還有關於生物分子分離與純化技術的章節。這本書對於各種常用技術的介紹都非常細緻，從原理到操作步驟，再到應用場景，都講解得鞭闢入裏。特彆是色譜技術的部分，它不僅介紹瞭不同種類的色譜，比如離子交換色譜、親和色譜、凝膠過濾色譜等，還詳細解釋瞭每種色譜的介質選擇、流動相的配製以及洗脫條件的優化。我尤其對親和色譜的講解感到興奮，它能夠利用生物分子之間特異性的相互作用進行高效的分離，這在製備高純度的蛋白質時尤為重要。書中還提供瞭許多實際操作的技巧和注意事項，例如如何避免樣品在分離過程中變性，如何選擇閤適的檢測方法來監測分離效果，以及如何進行後續的樣品處理等。這些細節對於我們在實驗室中進行實際操作非常有價值。此外，對於電泳技術，它也進行瞭深入的闡述，包括SDS-PAGE、等電聚焦等，並解釋瞭它們在蛋白質大小、電荷和分子量測定中的應用。這本書提供的方法論性指導，讓我對如何有效地分離和純化目標生物分子有瞭更清晰的認識，也為我將來進行生物製藥等相關工作打下瞭基礎。