生命科學實驗指南係列：精編分子生物學實驗指南（第5版 套裝上下冊） pdf epub mobi txt 電子書 下載 2025

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[美] F.M.奧斯伯，[美] R.布倫特，[美] R.E.金斯頓 等 編，金由辛，包慧中，趙麗雲 等 譯

圖書標籤:

• 分子生物學
• 實驗指南
• 生命科學
• 生物技術
• 實驗教學
• 高等教育
• 科研
• 醫學
• 生物學
• 第五版

齣版社： 科學齣版社

ISBN：9787030203366

版次：1

商品編碼：12169510

包裝：平裝

叢書名： 生命科學實驗指南係列

開本：16開

齣版時間：2008-05-01

用紙：膠版紙

頁數：1391

套裝數量：2

字數：2063000

正文語種：中文

內容簡介

　　《生命科學實驗指南係列：精編分子生物學實驗指南（第5版 套裝上下冊）》是知名度很高、不斷更新的《Current Protocols in Molecular Biology》係列的精編版本。新版對原有內容進行瞭修訂和更新，包括：大腸杆菌、質粒和噬菌體，DNA的製備和分析，DNA和RNA的酶學操作，RNA的製備和分析，重組DNA文庫的構建，重組DNA文庫的篩選，DNA序列測定，剋隆化DNA的誘變，DNA導入哺乳動物細胞，蛋白質分析，免疫學，DNA-白質相互作用，釀酒酵母，原位雜交和免疫組織化學，聚閤酶鏈反應，蛋白質的錶達，蛋白質磷酸化的分析，生物信息學，蛋白質相互作用的分析等；又新增瞭染色質的裝配與分析，核酸陣列，組閤文庫的建立和使用，單個細胞或一群細胞間差異錶達基因的發現和分析四章內容。
　　《生命科學實驗指南係列：精編分子生物學實驗指南（第5版 套裝上下冊）》可供高等院校和科研機構從事分子生物學研究的科研工作者和研究生參考。

內頁插圖

目錄

譯者序
前言

第1章 大腸杆菌、質粒和噬菌體
1．1 培養基的製備及細菌學工具
1．1．1 極限培養基
1．1．2 豐富培養基
1．1．3 固體培養基
1．1．4 實驗工具
1．2 在液體培養基中培養
1．2．1 基本方案1過夜培養
1．2．2 基本方案2大體積培養
1．2．3 基本方案3利用計數闆監測生長情況
1．2．4 基本方案4利用分光光度計監測生長情況
1．3 固體培養基上培養
1．3．1 基本方案1通過連續稀釋法滴定和分離細菌菌落
1．3．2 基本方案2通過平闆劃綫法分離單菌落
1．3．3 基本方案3通過鋪平闆分離單個菌落
1．3．4 基本方案4影印平闆
1．3．5 輔助方案菌株的保存和復蘇
1．4 經典細菌遺傳學選論
1．5 質粒載體
質粒載體的選擇
1．6 質粒DNA的小量製備
1．6．1 基本方案1堿裂解小量製備
1．6．2 備選方案96孔微量滴定闆堿裂解法
1．6．3 基本方案2煮沸小量製備法
1．7 質粒DNA的大量製備
1．7．1 基本方案1堿裂解法製備粗製裂解物
1．7．2 基本方案2氯化銫／溴化乙錠平衡離心法
1．7．3 備擇方案利用陰離子交換層析或分子篩層析純化質粒DNA
1．8 將質粒DNA導入細菌細胞
1．8．1 基本方案CaCl2轉化法
1．8．2 備擇方案一步法製備和轉化感受態細菌
1．8．3 基本方案2高效率的電轉化方法
1．9 入噬菌體概述
1．9．1 裂解性生長
1．9．2 溶源性生長
1．10 作為剋隆載體的入噬菌體
1．10．1 用入噬菌體的優點
1．10．2 選擇插入的DNA
1．10．3 入噬菌體來源的剋隆載體的圖譜
1．11 入噬菌體鋪平闆産生噬斑
1．11．1 基本方案1通過連續稀釋法分離單個噬斑
1．11．2 基本方案2噬菌體轉染和體外包裝構建
1．12 培養入衍生的噬菌體載體
1．12．1 基本方案通過平闆裂解製備噬菌體庫
1．12．2 備擇方案製備液體裂解物
1．13 從噬菌體裂解液中製備入DNA
基本方案通過分級平衡梯度離心製備DNA
1．14 源於絲狀噬菌體的載體
1．15 利用M13噬菌體衍生載體製備單鏈DNA
基本方案利用輔助噬菌體從質粒製備單鏈DNA

第2章 DNA的製備和分析
電泳及其應用
凝膠和電路
2．1 水溶液中DNA的純化和濃縮
2．1．1 基本方案DNA的酚抽提和乙醇沉澱
2．1．2 備擇方案1異丙醇沉澱DNA
2．1．3 輔助方案1丁醇濃縮DNA
2．1．4 輔助方案2醚抽提法去除殘存酚、氯仿或丁醇
2．1．5 備擇方案2矽膜離心柱法純化DNA
2．1．6 備擇方案3RNA及DNA稀溶液的純化和濃縮
2．1．7 備擇方案4乙醇沉澱法去除低分子質量的寡核苷酸和核苷三磷酸
2．2 陰離子交換色譜法純化DNA
基本方案
2．3 從哺乳動物組織中製備基因組DNA
基本方案
2．4 從植物組織中製備基因組DNA
2．4．1 基本方案氯化銫離心法製備植物DNA
2．4．2 備擇方案CTAB製備植物DNA
2．5 從細菌中製備基因組DNA
2．5．1 基本方案細菌基因組DNA的小量製備
2．5．2 備擇方案氯化銫法大規模製備細菌基因組DNA
……
第3章 DNA和RNA的酶學操作
第4章 RNA的製備和分析
第5章 重組DNA文庫的構建
第6章 重組DNA文庫的篩選
第7章 DNA序列測定
第8章 剋隆化DNA的誘變
第9章 DNA導入哺乳動物細胞
第10章 蛋白質分析
第11章 免疫學
第12章 DNA-蛋白質相互作用
第13章 釀酒酵母
第14章 原位雜交和免疫組織化學
第15章 聚閤酶鏈反應（PCR）
第16章 蛋白質的錶達
第17章 蛋白質磷酸化的分析
第18章 生物信息學
第19章 蛋白質相互作用的分析
第20章 染色質的裝配與分析
第21章 核酸陣列
第22章 組閤文庫的建立和使用
第23章 單個細胞或一群細胞間差異錶達基因的發現和分析

附錄
索引

前言/序言

　　分子生物學已經發展成熟，並且實驗研究已經進展到如此狀態——以前特殊的實驗程序，現在已成為常規操作——因此，《精編分子生物學實驗指南》（Short Protocols in Molecular Biology，以下簡稱《精編》）的範圍和概念也在不斷改變。某些內容一度被認為對一般的讀者顯得過於復雜，如組閤化學或染色質裝配和分析，現在已被有規律地應用。基於這樣的思考，我們增加瞭新的章節，並擴展瞭《精編》原有主題下的內容。
　　與前麵的版本一樣，兩捲本的《精編分子生物學實驗指南》第五版是已齣版的《最新分子生物學實驗方法匯編》（Current Protocols in Molecular Biology，以下簡稱《匯編》）一書中的實驗方法的簡編版本。它由《匯編》的核心手冊和每季度更新的服務手冊中提煉而來，涵蓋瞭《匯編》中所有基本方法及其詳細實驗步驟。本書擬作為實驗室手冊使用，對象是那些熟悉《匯編》中各種詳細解釋的研究生和博士後人員，然而，在本書中對實驗方法有詳細的步驟說明，有經驗的研究人員也可將本書作為獨立的實驗室操作指南。
　　雖然熟練掌握本書中的技術方法可使讀者進行分子生物學和相關學科研究，但本書並不適用於替代研究生水平的分子生物學教材或作為這一領域的綜閤性讀本。另外，我們推薦讀者在使用本書時要對照參考《匯編》中的評述和詳細注釋。最後，我們極力要求讀者通過在分子生物學實驗室中的工作獲得關於基本技術和實驗室安全操作規程的第一手經驗。
　　如何使用這本書
　　結構
　　本書按章編排，每種實驗方案均可從各節中獲得。每一節中列齣材料、實驗方案的步驟和每種技術的參考文獻。在附錄5中囊括瞭整本書全部的參考文獻。本書的排列和結構與《匯編》基本一緻。盡管各節的編號可能不完全相對應，但各節的標題在兩個版本中是相同的。因此，擁有兩種版本的使用者當需要更詳細的解釋時會發現對照參考《匯編》十分容易和便利。
　　在整本書中，許多試劑和實驗程序被反復應用，不過我們並不是反復復製這些信息，而是在章節之間廣泛地進行對照參考。書中前麵各章（和附錄3）主要介紹常用的技術方法，如基本微生物學和酶、DNA、RNA的基本操作方法，而後麵的各章介紹的是更先進的技術方法。因此，在一種方案中無論什麼時候用到某一特定的酶，均可對照參考第3章中適當的節，找到介紹該酶反應條件的內容（如3.5介紹逆轉錄酶）。同樣，在整本書中讀者可參照1.3鋪平闆或在平闆上劃綫；參照2.1進行酚抽提和乙醇沉澱；參照2.6進行瓊脂糖凝膠電泳等。因此，在本書的後麵章節所介紹的方案中就省略瞭製備、純化和分析樣品或目的分子的輔助程序。
　　附錄提供瞭試劑和溶液的配方（附錄1），有用的測量值和數據（附錄2），常用的生物化學實驗技術（附錄3），供應商的名稱和地址（附錄4）。
　　方案
　　許多節中都含有幾組方案。在每個節中首先齣現的是基本方案，它一般也是首選的實驗方法。備擇方案在以下情況下使用：①使用不同的儀器或試劑可得到相似的結果；②起始材料需要方法有所改變；③對最終産物的要求與基本方案不同。輔助方案介紹瞭基本方案和備擇方案所需的附加步驟。這些步驟之所以從核心方案中單列齣來，是因為它們可能在本書中具有其他用途，或操作時與基本方案各步驟在時間上可以分開。
　　試劑與溶液
　　實驗步驟開始之前，材料欄中列齣瞭一個方案中所需要的各種試劑。除培養基和限製性內切核酸酶反應緩衝液配方外，相應的配方都在附錄1中列齣，並在括號中列齣瞭這些配方的齣處。尤其要注意這些特殊溶液中有些溶液的名稱在一個節與另一個節中可能是相似的（如雜交液、裂解緩衝液等），但配方卻不同；因此，在按適當的配方配製試劑時要仔細確認。為瞭避免混淆，在附錄1中緊接每個試劑名稱的括號內列齣瞭使用每個配方的節序數，但常用緩衝液和溶液除外，如TE緩衝液、PBS。
　　【注】本書中實驗方案中所使用的，以及所有試劑和溶液製備所使用的水，均應為去離子蒸餾水。儀器
　　現代分子生物學實驗室中標準儀器及相關用品在本文後列齣，並在本書中廣泛采用。在每個方案之前的材料欄中僅包括“特殊”儀器，即在實驗室不易備有的或需要特殊製備的儀器。
　　供應商
　　在本書的某些實驗中，我們推薦一些化學試劑、生物材料或實驗儀器的供應商。但我們盡量避免這種做法，因為對某種品牌的喜好是主觀的，而且一般並無廣泛比較試驗的基礎。對所推薦的供應商，我們的原則是：這種特殊品牌實際上已被證實具有齣眾的品質；或者，這種材料在市場上很難找到。附錄4列齣瞭推薦的供應商的名稱、地址和電話號碼，但它們並非唯一的生物試劑供應商。讀者也可使用自己喜好的品牌進行實驗。

好的，這是一份針對您的圖書《生命科學實驗指南係列：精編分子生物學實驗指南（第5版 套裝上下冊）》所不包含內容的、詳細的圖書簡介草稿，旨在描述其他生命科學或相關領域的經典實驗指南。 --- 經典實驗方法匯編：跨越分子生物學邊界的深度探索 係列總覽： 本套匯編精選瞭在生命科學研究中占據核心地位的幾部經典實驗手冊的精華內容，它們共同構築瞭一個遠超單一分子生物學範疇的廣闊實驗技術圖景。本係列旨在為生物醫學研究人員、高級學生以及臨床檢驗專業人士提供一套全麵、深入且高度實用的操作指南，重點關注細胞生物學、免疫學、生物化學以及生物信息學等關鍵領域的前沿技術。 第一捲：細胞與組織學深度解析：結構、功能與成像技術 本捲聚焦於生命活動最基本的載體——細胞及其所在環境的精細化研究。它避開瞭分子剋隆和核酸操作的細節，轉而深入細胞的亞結構、相互作用及其動態變化的捕捉與量化。 第一部分：高級細胞培養與功能分析 本部分詳盡闡述瞭各類復雜細胞係、原代細胞以及乾細胞培養的優化策略。不同於分子生物學側重於基因錶達的穩定，本捲強調的是細胞的生理活性和三維結構維持。 原代細胞分離與傳代： 詳述瞭從不同組織（如肝髒、腎髒、神經元）分離純化原代細胞的酶解和機械分離技術，重點討論瞭影響細胞活力和錶型穩定的關鍵因素，如血清替代物的選擇和基質的優化。 3D細胞培養模型構建： 詳細介紹瞭水凝膠（如Matrigel, 膠原蛋白I型）的使用方法，球狀體（Spheroid）和類器官（Organoid）培養的配方優化與成熟標準。這部分內容側重於重建體內微環境，而非單純的二維貼壁生長。 細胞活力與凋亡檢測： 涵蓋瞭經典的颱盼藍排除法之外，更先進的基於膜電位、綫粒體功能和胱天蛋白酶激活的熒光探針檢測技術。強調瞭流式細胞術在多參數分析中的應用，用於精確區分細胞周期階段和凋亡的不同時相。 第二部分：免疫組織化學與共聚焦成像 本部分是理解細胞微環境和蛋白質空間定位的關鍵，其核心在於空間分辨率和熒光信號的可靠性。 組織固定與包埋技術： 詳盡介紹瞭醛類固定液（如多聚甲醛、戊二醛）和醇類固定液的最佳配比與作用時間，以及石蠟包埋和冷凍切片的精確操作規程。討論瞭抗原修復技術，特彆是熱修復（HIER）和酶促修復（EIER），以最大化暴露內源性抗原位點。 免疫熒光（IF）與免疫組織化學（IHC）： 深入講解瞭一抗、二抗的稀釋梯度優化、封閉液的選擇（如BSA、脫脂奶粉）以減少非特異性背景。重點分析瞭熒光光譜串擾（Crosstalk）的校正，以及如何利用譜圖解（Spectral Unmixing）技術區分多重免疫標記。 活細胞成像技術： 介紹瞭延時攝影（Time-lapse imaging）在追蹤細胞遷移、吞噬作用或鈣離子瞬時變化中的應用。討論瞭共聚焦顯微鏡（Confocal Microscopy）的層析成像原理，以及去捲積（Deconvolution）處理對三維圖像質量的提升作用。 第二捲：生物化學與蛋白質組學：功能解析與相互作用網絡 本捲將研究的焦點從細胞結構轉移至分子層麵的精細功能驗證，重點在於分離、鑒定和定量蛋白質組分及其動態相互作用。 第一部分：蛋白質純化與結構錶徵 本部分不涉及核酸的提取與PCR擴增，而是專注於蛋白質的溶解、分離和功能性驗證。 溫和裂解與去汙： 詳細對比瞭RIPA、NP-40、Triton X-100等不同裂解緩衝液的強度和適用性，強調瞭保護蛋白質天然構象的重要性。 層析技術深度應用： 聚焦於區分離子交換層析（IEX）、疏水作用層析（HIC）和親和層析（Affinity Chromatography）在多步純化中的順序優化。親和層析部分詳細介紹瞭鎳柱（Ni-NTA）的適用範圍，以及如何設計高效的洗脫梯度以去除雜蛋白。 質譜前處理與二維電泳（2D-PAGE）： 涵蓋瞭蛋白質的點染（如Coomassie Brilliant Blue, Silver Staining）的優化方案，以及2D電泳中等電點聚焦（IEF）的電壓與時間控製，用於初步蛋白質分離與差異錶達分析。 第二部分：蛋白質功能性互作與定量分析 此部分旨在確認蛋白質在細胞內扮演的角色，以及它們如何與其他分子形成功能復閤體。 免疫沉澱（Co-IP）與蛋白質組學整閤： 詳述瞭抗體選擇、洗滌條件對“真陽性”互作組的影響。重點討論瞭如何將Co-IP與後續的質譜分析（LC-MS/MS）相結閤，進行蛋白質復閤體鑒定。 酶活性測定與動力學分析： 涵蓋瞭多種水解酶、激酶的底物閤成與選擇。重點分析瞭Michaelis-Menten動力學方程的應用，如何通過Lineweaver-Burk圖法確定$K_m$和$V_{max}$，以及抑製劑的競爭性與非競爭性分析。 生物傳感器技術基礎： 介紹瞭錶麵等離子共振（SPR）技術在無需標記的情況下測定分子間結閤常數 ($K_D$) 的原理和數據解析方法。這部分內容側重於分子間親和力的精確量化，而非核酸的結閤實驗。 第三捲：生物信息學基礎：數據處理與可視化方法學 本捲不再涉及濕實驗操作，而是提供理解和解釋復雜生物學數據集的必要計算工具集。 通用統計學在生物學中的應用： 強調瞭數據正態性檢驗（如Shapiro-Wilk檢驗）和非參數檢驗（如Mann-Whitney U檢驗）的選擇，以及多重比較校正（如Bonferroni, FDR）的必要性，以確保實驗結論的統計學可靠性。 圖像數據處理與量化： 提供瞭使用ImageJ/Fiji等軟件對顯微圖像進行去背景、閾值處理和量化的標準操作流程，特彆是針對細胞計數、熒光強度積分的自動化腳本編寫指導。 組學數據初探： 簡要介紹瞭基因錶達芯片數據（如Affymetrix, Agilent）和RNA-seq數據的質量控製（QC）流程，包括PCA分析和熱圖（Heatmap）的構建，用於初步識彆樣本間的差異和聚類關係。 --- 本書特色總結： 本匯編的價值在於其對實驗通用性與深度驗證的強調。它係統地涵蓋瞭從活細胞動態觀察、組織形態學分析到蛋白質純化與互作驗證的全鏈條技術，為研究人員提供瞭在分子生物學基礎技術（如PCR、測序）之上，進行更復雜、更貼近生理環境的生物學研究所需的關鍵工具箱。讀者將掌握如何構建更可靠的模型、如何更精確地量化功能變化，以及如何利用計算工具對結果進行嚴謹的解釋。

評分☆☆☆☆☆

第四段： 書籍的整體風格讓我眼前一亮，那種專業而不失親和力的感覺，讓我對即將開始的學習充滿期待。我一直以來都對分子生物學實驗充滿瞭好奇，但往往在尋找可靠的實驗指導方麵感到睏惑。這套書的齣現，讓我看到瞭希望。我希望它能提供一套非常詳盡的實驗操作流程，每一個步驟都清晰明確，並且附有高質量的圖片或插畫，方便我對照學習。我還希望書中能夠包含一些常見的實驗問題及解決方法，這樣在遇到睏難時，我能夠快速找到應對之策，避免不必要的挫摺。此外，我也期待它能介紹一些經典的分子生物學實驗，讓我能夠瞭解到這些研究是如何一步步推動學科發展的。

評分☆☆☆☆☆

第一段： 這本書的封麵設計非常吸引人，那種沉穩而又充滿科技感的藍色，搭配上清晰的字體，瞬間就勾起瞭我對生命科學領域的好奇心。我一直對分子生物學抱有濃厚的興趣，但總覺得理論知識太過抽象，缺少一些實踐的觸感。這次偶然的機會看到瞭這套書，迫不及待地想要深入瞭解。我期待它能像一位經驗豐富的老師，一步步地引導我走進分子生物學的奇妙世界，用通俗易懂的語言解釋那些復雜的概念，並能提供切實可行的實驗操作指導。我希望它能涵蓋從基礎的DNA提取、PCR擴增，到更高級的基因剋隆、蛋白質錶達等內容，讓我能夠通過親手操作，真正理解分子生物學的原理和應用。同時，我也希望書中能提供一些經典的實驗案例分析，讓我瞭解這些技術是如何在實際研究中發揮作用的，從而激發我更多地思考和探索。

評分☆☆☆☆☆

第三段： 這套書的裝幀設計著實令人驚艷，簡潔大方的風格，加上恰到好處的細節處理，讓人一看就心生喜愛。我一直對分子生物學的實驗操作有著濃厚的興趣，渴望能通過動手實踐來加深對理論知識的理解。我非常期待這本書能夠提供一套係統性的實驗方案，從基礎的試劑準備到最後的實驗結果分析，都能有條不紊地進行指導。我希望它能涵蓋一些前沿的分子生物學技術，比如CRISPR-Cas9基因編輯、單細胞測序等，讓我能夠緊跟學科發展的步伐。同時，我也希望書中能夠提供一些常用的數據分析方法和軟件介紹，幫助我們更好地解讀實驗數據，並從中得齣有價值的結論。

評分☆☆☆☆☆

第五段： 翻開這本書，一種嚴謹而又充滿活力的氣息撲麵而來。我一直深陷於分子生物學的理論海洋，渴望能有這樣一本指南，將那些抽象的概念具象化，讓我能夠真正“玩轉”分子生物學。我期待它能提供一係列精心設計的實驗，涵蓋從入門到進階的各個層次，並且每一步都標注得清清楚楚。我希望它能包含一些實用的技巧和竅門，讓我事半功倍。同時，我也希望書中能夠強調實驗的邏輯性和嚴謹性，讓我們明白每一個操作背後的科學原理，而不僅僅是機械地模仿。這套書的齣現，無疑為我打開瞭一扇通往分子生物學實驗實踐的大門，讓我充滿瞭學習的動力和熱情。

評分☆☆☆☆☆

第二段： 拿到這套書，我首先被它厚重的分量和精美的印刷所摺服。上下兩冊，厚實得恰到好處，仿佛蘊含著海量的知識等待我去發掘。我特彆關注的是它的內容結構是否閤理，是否能夠循序漸進地引導讀者掌握知識。我希望能看到詳盡的實驗步驟，每一個細節都經過精雕細琢，並且配有清晰的圖示，這樣即使是初學者也能輕鬆上手。此外，我非常重視實驗的安全性，希望書中能夠充分考慮實驗過程中可能齣現的風險，並提供相應的安全提示和注意事項，確保我們在實踐過程中能夠安全無虞。同時，我也期待書中能夠介紹一些常用的分子生物學儀器設備，並對其工作原理和操作要點進行詳細的講解，幫助我們更好地理解實驗的基礎。

評分☆☆☆☆☆

是現代分子生物學的聖經啊，好書！

評分☆☆☆☆☆

是現代分子生物學的聖經啊，好書！

評分☆☆☆☆☆

經典教科書，值得擁有！！！唯一缺點：沒有給發票

評分☆☆☆☆☆

生命科學實驗指南係列：精編分子生物學實驗指南（第5版 套裝上下冊）

評分☆☆☆☆☆

有點興趣，存著慢慢看，書質量很好

評分☆☆☆☆☆

生物技術的教科書

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好書，縱裏尋他韆百度，超級滿意，好好學起來

評分☆☆☆☆☆

生命科學必備！！非常好的書！！！贊！！