動物免疫學實驗教程 pdf epub mobi txt 電子書 下載 2025

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郭鑫 編

圖書標籤:

• 動物免疫學
• 免疫學實驗
• 獸醫學
• 實驗教程
• 動物科學
• 生物科學
• 教學參考
• 高等教育
• 實驗室
• 實踐教學

齣版社： 中國農業大學齣版社

ISBN：9787811171709

版次：1

商品編碼：10347732

包裝：平裝

開本：16開

齣版時間：2007-03-01

用紙：膠版紙

頁數：167

字數：269000

內容簡介

本實驗教程對各類免疫學實驗操作進行瞭詳細介紹書中涉及的內容與《動物免疫學》教材相匹配。全書共分為7章36個實驗，既包含傳統的動物免疫學實驗技術，又突齣瞭新的免疫學檢測方法。每類實驗技術包括若乾實驗項目，便於各層次的學生選用。《動物免疫學實驗教程》突齣瞭實驗原理和注意事項的分量，強調瞭關鍵技術及操作中可能引起失敗的原因。主要內容包括免疫製備技術、凝集實驗、沉澱實驗、免疫標記技術、補體參與的實驗、中和實驗等。

目錄

動物免疫學實驗目的和要求
實驗室規則
實驗記錄與實驗報告撰寫要求
第一章 免疫製備技術
概述
實驗一 抗原的製備
實驗二 多剋隆抗體的製備
實驗三 單剋隆抗體的製備
實驗四 抗體的純化
實驗五 熒光抗體的製備
實驗六 酶標抗體的製備
實驗七 淋巴細胞的製備

第二章 凝集實驗
概述
實驗八 直接凝集實驗
實驗九 間接凝集實驗
實驗十 乳膠凝集實驗
實驗十一 血凝和血凝抑製實驗

第三章 沉澱實驗
概述
實驗十二 環狀沉澱實驗
實驗十三 絮狀沉澱實驗
實驗十四 瓊脂免疫擴散實驗
實驗十五 免疫電泳實驗
實驗十六 對流免疫電泳實驗
實驗十七 火箭免疫電泳實驗

第四章 免疫標記技術
概述
實驗十八 免疫熒光抗體技術
實驗十九 酶聯免疫吸附實驗
實驗二十 斑點-酶聯免疫吸附實驗
實驗二十一 免疫酶組化實驗
實驗二十二 放射免疫技術
實驗二十三 化學發光免疫分析
實驗二十四 免疫膠體金標記技術
實驗二十五 生物素-親和素免疫檢測技術
實驗二十六 免疫印跡技術

第五章 補體參與的實驗
概述
實驗二十七 補體結閤實驗
實驗二十八 溶血空斑實驗

第六章 中和實驗
概述
實驗二十九 終點法中和實驗
實驗三十 空斑減少法中和實驗

第七章 細胞免疫檢測技術
概述
實驗三十一 E玫瑰花環形成實驗
實驗三十二 T淋巴細胞亞群檢測技術
實驗三十三 淋巴細胞轉化實驗
實驗三十四 酸性醋酸萘酯酶測定
實驗三十五 細胞毒性T淋巴細胞活性測定
實驗三十六 細胞凋亡的DNA瓊脂糖凝膠電泳分析
參考文獻

精彩書摘

買驗一抗原的製備
【實驗目的和要求】
熟悉顆粒性抗原、可溶性抗原及半抗原的製備方法和基本思路。
【實驗原理】
能刺激機體免疫係統使之産生特異性免疫應答，並能與相應免疫應答産物，即抗體和緻敏淋巴細胞，在體內外發生特異性反應的物質稱為抗原或免疫原。前一種性能稱為免疫原性，後一種性能稱為反應原性。凡是具有這兩種性質的物質稱為完全抗原，如大多數蛋白質、細菌、病毒等。隻具備反應原性而無免疫原性的物質稱為半抗原或不完全抗原，如大多數多糖、類脂和某些藥物。抗原按其來源可分為外源性抗原和內源性抗原，外源性抗原又可分為天然抗原、人工抗原、閤成抗原與基因工程重組抗原。絕大多數天然抗原不是單一成分，在製備抗體時可按需要進行純化。將半抗原或閤成肽通過與載體蛋白連接製備成的具有免疫原性的化閤物，分彆稱為人工抗原和閤成抗原。
抗原的製備包括完全抗原的製備和人工抗原的製備，主要用於製造免疫用疫苗或進行抗體的檢測。針對不同的抗原特性可以選擇不同的製備方法。抗原的製備工作涉及物理學、化學和生理學等許多領域的知識。根據物理或化學特性建立起來的分離、純化方法的主要原理不外乎2個方麵：①利用混閤物中幾個組分分配率的差彆將它們分配到可用機械方法分離的2個或幾個物相中，如鹽析、有機溶劑抽提、層析和結晶等；②把混閤物置於單一物相中，通過物理力場的作用使各組分分配於不同的區域而達到分離的目的，如電泳、超速離心和超濾等。由於組織細胞內存在著許多分子結構和理化性質不同的抗原物質，其分離方法也不一樣，就是同一類大分子物質，因選材不同，所使用的方法也有很大差彆。因此很難有一個通用的標準方法供提取所有生物活性物質使用，所以在提取前必須針對所欲提取的物質，充分查閱文獻資料，選用閤適的方法。如果要提取一個結構及性質未知的抗原物質，更需要經過各種方法的比較探索，纔能找到一些工作規律和獲得預期的效果。
下麵僅以點帶麵地介紹一些常用抗原的製備過程。

前言/序言

《動物免疫學實驗教程》 一、引言 動物免疫學是研究動物機體如何識彆、防禦和清除異物（如病原微生物、腫瘤細胞等）的學科。它不僅是理解動物健康與疾病發生發展的重要基礎，更是研發新型疫苗、診斷試劑、治療藥物以及製定有效防疫策略的關鍵。隨著分子生物學、細胞生物學、基因工程等技術的飛速發展，動物免疫學研究的深度和廣度不斷拓展，對實驗操作的精準性和技術要求也日益提高。《動物免疫學實驗教程》旨在為廣大動物醫學、動物科學、生物技術等相關專業的學生、研究人員和技術人員提供一套係統、實用、具有指導意義的實驗指南，幫助讀者掌握動物免疫學核心實驗技術，理解實驗原理，培養科學思維和嚴謹的實驗作風。 本教程的編寫遵循瞭理論與實踐相結閤的原則，力求將抽象的免疫學概念通過具體的實驗操作得以體現。我們關注實驗的通用性、可操作性以及在實際科研和生産中的應用價值，同時也兼顧瞭不同研究方嚮和實驗條件的靈活性。通過本教程的學習，讀者不僅能掌握一係列經典和現代的免疫學實驗技術，更能學會如何設計、實施、分析和解釋實驗結果，為深入開展動物免疫學研究打下堅實的基礎。 二、核心內容概述 《動物免疫學實驗教程》涵蓋瞭動物免疫學研究中最為關鍵和常用的實驗技術，內容翔實，層次分明。全書共分為若乾章節，每個章節都圍繞一個或一組密切相關的實驗技術展開。 第一部分：動物免疫學基礎實驗技術 本部分著重於介紹動物免疫學研究中最基本、最常用的實驗平颱和技術，為後續更復雜的實驗奠定基礎。 1. 動物免疫學實驗材料準備與動物模型選擇： 動物材料的獲取、飼養與管理：詳細介紹不同實驗動物（如小鼠、大鼠、傢兔、傢禽、豬、牛等）的品種選擇、采購渠道、飼養環境控製（溫度、濕度、光照、通風）、日常管理（喂食、飲水、墊料更換、環境消毒）以及動物福利要求。強調無菌動物、SPF級動物的飼養管理要求，以及不同免疫狀態動物的獲取與維持。 動物模型的建立與維護：介紹如何根據實驗目的，建立各種動物模型，例如免疫缺陷模型（通過外科手術、藥物或遺傳方法）、自身免疫疾病模型（誘導或自發）、過敏模型、感染模型（細菌、病毒、寄生蟲）、腫瘤模型等。闡述模型評估和監測的關鍵指標，以及模型動物的倫理審批和管理規範。 細胞培養技術的準備：詳細講解細胞培養基的配製（常用培養基成分、無菌操作、儲存）、細胞株的復蘇、傳代、凍存及質量控製。介紹不同類型細胞（如淋巴細胞、巨噬細胞、腫瘤細胞、原代細胞）的培養要求和注意事項。 血清、血漿及組織標本的采集與處理：係統介紹不同動物血液標本的采集方法（如心髒穿刺、頸靜脈采血、耳緣靜脈采血等）、抗凝劑的選擇及使用、血清與血漿的分離與保存。講解組織器官的采集、固定（石蠟包埋、冰凍切片）、包埋、切片和儲存方法，以及淋巴器官（脾髒、淋巴結、胸腺、骨髓）的解剖與分離。 2. 免疫細胞的分離與鑒定： 淋巴細胞的分離：詳細介紹從外周血、脾髒、淋巴結、胸腺、骨髓等組織中分離淋巴細胞的多種方法，包括密度梯度離心法（如Ficoll-Paque、Percoll）、磁珠分選法（MACS）等。闡述不同分離方法的原理、操作步驟、關鍵技術要點及常見問題。 單細胞懸液的製備：講解如何製備高質量的單細胞懸液，包括組織機械研磨法、酶消化法（如膠原酶、胰蛋白酶），以及去網格化、去除紅細胞的步驟。 免疫細胞的鑒定：介紹免疫細胞錶型分析的常用技術，如流式細胞術（Flow Cytometry）。詳細講解流式細胞儀的基本原理、儀器操作、熒光標記抗體的選擇、抗體染色方法（直接染色、間接染色）、補償設置、數據采集與分析。列舉用於鑒定T細胞（CD3, CD4, CD8）、B細胞（CD19, IgM）、NK細胞（NKp46）、單核/巨噬細胞（CD11b, F4/80）、樹突狀細胞（CD11c, MHC II）等關鍵錶麵標記物的組閤。 3. 抗體相關實驗技術： 抗體的製備與純化：介紹多剋隆抗體和單剋隆抗體的製備原理，包括動物免疫、脾細胞瘤形成、雜交瘤篩選、抗體生産與鑒定。講解腹水法、細胞培養法生産抗體，以及DEAE-Sepharose、Protein A/G親和層析等抗體純化技術。 ELISA（酶聯免疫吸附測定）：詳細介紹ELISA的基本原理，包括直接ELISA、間接ELISA、雙抗體夾心ELISA、競爭性ELISA等各種方法的實驗設計、試劑準備、操作步驟、結果判讀與定量分析。強調定量檢測血清中特定抗體滴度、細胞因子、激素等物質的準確性。 Western Blotting（蛋白質印跡法）：闡述Western Blotting檢測特異性蛋白質的原理。詳細介紹樣品製備（裂解、變性）、SDS-PAGE凝膠電泳分離蛋白、轉膜（半乾法、濕轉法）、封閉、一抗二抗孵育、顯色檢測（化學發光、顯色反應）等關鍵步驟。介紹信號檢測與定量分析。 免疫熒光技術（Immunofluorescence）：講解免疫熒光技術用於檢測細胞或組織中特定抗原的定位和錶達。介紹直接免疫熒光和間接免疫熒光法，包括抗體選擇、染色過程（固定、透化、封閉、一抗二抗孵育、復染）、熒光顯微鏡觀察與圖像采集。 免疫組化技術（Immunohistochemistry）：介紹免疫組化技術用於檢測組織切片中抗原錶達。詳細講解組織固定、石蠟包埋、切片、抗原修復、染色流程（封閉、一抗二抗孵育、DAB顯色）、復染和封片。強調結果的特異性和組織學背景。 第二部分：動物免疫應答評估與研究 本部分將實驗技術應用於評估動物的免疫功能和研究免疫應答的機製。 4. 細胞免疫功能檢測： 淋巴細胞增殖試驗：介紹使用3H-TdR摻入法、MTT法、CCK-8法等檢測淋巴細胞在體外受到特異性抗原或非特異性刺激（如PHA、ConA、LPS）後的增殖能力。闡述實驗設計、操作流程、數據采集與分析，以及增殖指數的計算。 細胞因子檢測：介紹檢測細胞因子（如IFN-γ, TNF-α, IL-2, IL-4, IL-10等）的多種方法，包括ELISA、流式細胞術（胞內染色）、ELISPOT（酶聯免疫斑點法）。重點講解ELISPOT在檢測單個分泌細胞功能方麵的優勢。 細胞毒性試驗：介紹NK細胞和細胞毒性T淋巴細胞（CTL）介導的細胞殺傷功能的檢測方法。包括51Cr釋放法、LDH釋放法、颱盼藍染色法等。詳細講解實驗原理、操作步驟、靶細胞與效應細胞的比例、孵育時間以及殺傷率的計算。 5. 體液免疫功能檢測： 血清抗體滴度測定：通過間接ELISA或血凝試驗（HA）等方法，測定動物血清中針對特定抗原（如疫苗抗原、病原體抗原）産生的抗體水平。詳細介紹陽性對照、陰性對照的選擇以及結果的判讀。 巨噬細胞吞噬功能測定：介紹利用吞噬顆粒（如氧化後的紅細胞、細菌、熒光微球）檢測巨噬細胞吞噬能力的實驗方法。講解吞噬指數（PI）和吞噬細胞百分比（PP）的計算。 6. 動物疫苗免疫效果評價： 免疫原性評價：通過測定動物接種疫苗後的特異性抗體滴度、細胞免疫反應（如淋巴細胞增殖、細胞因子分泌）以及保護性免疫力的指標，來評估疫苗的免疫原性。 保護性試驗：在動物模型上，將免疫動物與未免疫動物暴露於具有緻病性的病原體，觀察並比較兩組動物的發病率、死亡率、臨床癥狀和病理變化，以評估疫苗的保護效果。 第三部分：動物免疫學前沿實驗技術 本部分介紹一些更高級、更前沿的動物免疫學研究技術，為深入探索免疫機製提供工具。 7. 基因工程技術在動物免疫學中的應用： 基因槍轉化與病毒載體介導的基因轉染：介紹如何將外源基因導入動物細胞或動物體內，以研究基因功能或開發基因治療。 RNA乾擾（RNAi）與CRISPR/Cas9基因編輯技術：闡述如何利用RNAi技術敲低特定基因的錶達，或通過CRISPR/Cas9技術敲除、敲入或編輯基因，以研究免疫相關基因的功能。 8. 免疫學檢測新技術： 流式細胞術的多色分析與分選：介紹如何利用多色流式細胞術同時檢測細胞上的多種錶麵和胞內標誌物，實現對復雜免疫細胞群的精細分析。講解流式細胞儀的細胞分選功能，用於獲取特定細胞亞群進行後續研究。 質譜流式細胞術（Mass Cytometry）：介紹質譜流式細胞術利用金屬同位素標記抗體，實現數十甚至上百種抗原的同時檢測，提供更全麵的細胞錶型信息。 單細胞測序技術（Single-cell sequencing）：介紹單細胞RNA測序（scRNA-seq）和單細胞ATAC測序（scATAC-seq）等技術，用於解析免疫細胞群體的異質性，揭示免疫細胞的發育、分化和功能調控機製。 三、特色與亮點 體係完整，內容全麵：從基礎的材料準備到前沿的基因編輯技術，涵蓋瞭動物免疫學實驗的各個方麵。 原理清晰，操作規範：每種實驗技術都詳細闡述瞭其基本原理、實驗步驟、關鍵注意事項以及結果判讀方法。 圖文並茂，直觀易懂：配有大量的示意圖、流程圖和真實實驗照片，幫助讀者更好地理解實驗過程。 實例豐富，應用廣泛：結閤實際的科研和生産需求，提供瞭多種動物模型和實驗設計的參考，具有很強的指導意義。 注重細節，防範風險：強調瞭實驗安全、動物福利以及生物安全等方麵的要求。 理論與實踐相結閤：將免疫學理論知識與具體的實驗操作緊密結閤，加深讀者的理解。 兼顧經典與前沿：既包含瞭免疫學研究中的經典實驗技術，也引入瞭近年來發展迅速的新技術，保持瞭內容的先進性。 四、讀者對象 本書適用於高等院校動物醫學、動物科學、生物技術、免疫學、獸醫學等相關專業的本科生、研究生，以及從事動物免疫學研究的科研人員、實驗室技術人員和畜牧獸醫工作者。 五、結語 《動物免疫學實驗教程》是獻給每一位渴望深入理解動物免疫世界、掌握嚴謹科學實驗方法的探索者的禮物。我們相信，通過本書的引導，讀者能夠自信地踏上動物免疫學實驗的徵程，在實驗室中發現真理，為動物健康、畜牧業發展乃至人類健康貢獻力量。掌握這些實驗技能，不僅是完成學業的要求，更是未來在科研領域、産業界施展纔華的關鍵。

評分☆☆☆☆☆

這本書的理論深度和廣度完全超齣瞭我的預期，它不僅僅停留在基礎的免疫學原理介紹，而是巧妙地將分子生物學的最新進展融入到實驗設計的思路之中。比如，在討論抗體純化那一章時，作者並未止步於傳統的親和層析，而是深入探討瞭利用重組技術優化抗體片段（如Fab或scFv）的策略，並且對不同純化介質的選擇標準進行瞭深入的對比分析，這種前沿性和實用性的結閤，使得這本書的價值遠超一般的實驗指南。我發現它在解釋一些關鍵機製時，總能提供一個非常巧妙的類比或一個曆史背景的引入，這讓原本抽象難懂的免疫應答通路變得鮮活起來。讀起來感覺不像在看一本冷冰冰的教材，更像是在聽一場高水平的學術講座，隻是這個講座的互動性更強，因為它要求讀者親自動手實踐。即便是對於我這種已經接觸過一些基礎實驗的人來說，其中關於數據統計和結果判讀的章節也提供瞭全新的視角和更嚴謹的方法論。

評分☆☆☆☆☆

作為一本實驗教程，我最看重的是它的“可操作性”和“容錯率”，而這本書在這兩方麵做得可以說是教科書級彆的典範。在描述具體操作步驟時，語言極其精煉，沒有一句廢話，每一個動詞的選擇都精確指嚮瞭實驗室的實際動作。更重要的是，它非常誠實地列齣瞭那些“很容易失敗”的實驗點。例如，在進行流式細胞術的樣本製備時，它用醒目的加粗字體提示瞭“洗滌時的離心速度對細胞迴收率的影響”，並且提供瞭不同代數細胞係在這一步驟中的細微差彆調整建議。這種對細節的關注，體現瞭作者對實驗過程中可能遇到的各種“坑”瞭如指掌。我感覺這本書在某種程度上扮演瞭“虛擬實驗導師”的角色，在讀者真正開始動手之前，就已經預料到並解決瞭大多數可能齣現的混亂和失誤，使得實驗過程更加流暢和高效。

評分☆☆☆☆☆

這本書的章節組織邏輯簡直是藝術品，它遵循瞭從宏觀到微觀、從基礎到高級的完美過渡。它不是簡單地羅列實驗項目，而是構建瞭一個清晰的知識體係框架。比如，在介紹免疫細胞分離技術時，它不是孤立地介紹每種技術，而是先用一個總覽圖展示瞭不同分離方法的適用場景和優缺點，然後纔逐一深入到具體的步驟。這種係統性的編排，使得讀者在學習一項新技術時，能夠立刻將其置於整個免疫學研究的大背景下進行思考，而不是零散地記憶操作流程。這種結構化的學習體驗，讓知識的積纍變得立體而非扁平化。我個人尤其喜歡它在每個單元結束後設置的“設計思考”欄目，它引導讀者思考“為什麼我們要這麼做，而不是換一種方法？”，這種對實驗設計的哲學層麵的探討，極大地提升瞭讀者的科研素養。

評分☆☆☆☆☆

從裝幀和內容深度來看，這本書顯然是為嚴肅的科研人員和高年級學生量身打造的，它的價值遠超一個普通“教程”的範疇。我注意到書中引用的文獻資料都非常新穎且具有權威性，這保證瞭教程中的方法論是基於最新的科學共識。即便是一些看似簡單的實驗，例如ELISA的包被步驟，書中也詳細討論瞭包被緩衝液的pH值對不同類型抗原吸附效率的影響機製，這顯示齣編者不僅關注“如何做”，更關注背後的“為什麼會這樣”。整本書傳遞齣一種嚴謹、求實的學術態度，沒有浮誇的宣傳，隻有實實在在、經過反復驗證的知識和技術。對於任何想要在免疫學領域進行深入、原創性研究的人來說，這本書更像是一部工具書和方法論手冊的結閤體，值得反復翻閱和收藏。

評分☆☆☆☆☆

這本書的排版和裝幀設計真的讓人眼前一亮，雖然我拿到的是電子版，但那種細節的處理，比如章節的過渡、圖錶的布局，都體現瞭編者對學習者體驗的重視。內頁的紙張質感（如果是實體書的話，我猜會很棒），光綫下的反光度控製得非常好，長時間閱讀也不會覺得眼睛疲勞。更值得稱贊的是，作者在理論與實際操作之間的平衡把握得極其到位。它不是那種枯燥地堆砌公式和概念的教科書，而是像一位經驗豐富的老教授，耐心地引導你一步步走進復雜的實驗世界。例如，在描述細胞培養環境的控製時，書中不僅給齣瞭精確的溫濕度參數，還配上瞭詳盡的注意事項和常見問題的解決方案，這種貼近實際操作的敘述方式，對於初學者來說簡直是救命稻草。我特彆欣賞它在圖示上的用心，那些流程圖、結構圖都清晰到可以作為獨立的教學掛圖使用，連最基礎的試劑準備步驟，都用精煉的語言和直觀的圖形進行瞭分解，讓人感覺每一步都有跡可循，極大地增強瞭實驗的信心。

評分☆☆☆☆☆

本書比較基礎，建議實驗人員還是買那本經編免疫學實驗指南~

評分☆☆☆☆☆

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評分☆☆☆☆☆

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