“十二五”国家重点图书出版规划项目·中国科学技术大学精品教材：生物化学与分子生物学实验 pdf epub mobi txt 电子书 下载 2025

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李卫芳 等 著

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• 生物化学
• 分子生物学
• 实验
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• 科学技术大学
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• 医学
• 教学参考
• “十二五”规划项目

出版社： 中国科学技术大学出版社

ISBN：9787312029653

版次：1

商品编码：10923864

包装：平装

开本：16开

出版时间：2012-01-01

用纸：胶版纸

页数：234

正文语种：中文

内容简介

《“十二五”国家重点图书出版规划项目·中国科学技术大学精品教材：生物化学与分子生物学实验》主要内容由学院多年使用的《生物化学与分子生物学基础实验讲义》及《生物化学与分子生物学高级讲义》综合选编而成。本书包括基础实验和综合实验两个部分，涵盖了生物化学与分子生物学的教学大纲的要求，从实验设计、实验选材到实验操作，都经历过多次的教学实践证实，很多实验内容由科研成果直接转化而来，是作者多年教学和科研经验的积累。
《“十二五”国家重点图书出版规划项目·中国科学技术大学精品教材：生物化学与分子生物学实验》适合作为生命科学类专业及相关专业的本科生教材，重在基础实验和基础技能方面，旨在培养学生解决实际问题的能力和创新能力，为学生日后的毕业实习和科学研究奠定坚实的实验技术基础。

目录

总序
前言
第一部分 基础实验
实验一 蛋白质的定量测定
实验二 核酸的定量测定
实验三 糖的定量测定
实验四 不同去污剂对红血球细胞膜的溶解作用比较
实验五 凝胶过滤层析柱的装填及柱效测定
实验六 葡聚糖凝胶柱层析
实验七 离子交换柱层析法分离蛋白质
实验八 硫酸铵分级沉淀法分离纯化Rubisco蛋白
实验九 聚丙烯酰胺凝胶电泳（Native-PAGE）分离植物过氧化物酶同工酶（活性染色法）
实验十 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）法测定蛋白质的分子量
实验十一 等电聚焦电泳（IEF）
实验十二 双向聚丙烯酰胺凝胶电泳（2D－PAGE）
实验十三 酶联免疫吸附测定法（ELISA）
实验十四 蛋白质免疫印记（Western Blotting）
实验十五 交联法（Cross-linking）鉴定蛋白质的聚集特性
实验十六 肌动蛋白的体外聚合和共沉降
实验十七 用正交法测定几种因素对酶活力的影响
实验十八 酸性磷酸酯酶动力学性质的分析
实验十九 质粒DNA的提取
实验二十 质粒DNA的酶切与鉴定
实验二十一 PCR基因扩增
实验二十二 DNA样品的胶回收及连接
实验二十三 大肠杆菌感受态细胞的制备及转化
实验二十四 酿酒酵母总RNA的提取、纯化与鉴定
实验二十五 反转录PCR（RT-PCR）和实时荧光定量PCR（QRT-PCR）

第二部分 综合实验
实验二十六 葡萄糖异构酶（GI）基因的克隆、表达及GI的纯化与性质鉴定

附录
附录一 实验室用水常识
附录二 玻璃器皿的洗涤和常用洗液的配制
附录三 常见市售酸碱的浓度
附录四 国际相对原子质量表（2001）
附录五 缓冲液的配制
附录六 硫酸铵饱和度常用表
附录七 常用分子量标准参照
附录八 常用核酸蛋白数据换算
附录九 柱层析介质的技术参数
附录十 电泳相关的常用缓冲液的配制
附录十一 常用培养基
附录十二 常用抗生素
附录十三 分子生物学常用软件
附录十四 学生实验守则
附录十五 生物化学与分子生物实验室安全及防护知识

前言/序言

《生物化学与分子生物学实验》精选教材导读：构建扎实的科研基石 本书概述 本教材精选了当前生物化学与分子生物学领域中最具代表性、最核心的实验技术与操作规程。它并非是对某一特定领域进行深入的理论阐述，而是致力于为学习者提供一个全面而实用的实验技能训练平台。本书的编写旨在弥合理论学习与实际操作之间的鸿沟，通过详尽的步骤指导和深入的原理剖析，帮助学生和初级研究人员快速掌握现代生命科学研究的必备技能。 第一部分：基础技术与通用操作——奠定实验根基 本部分聚焦于生物化学与分子生物学实验中最为基础但至关重要的通用技术，它们是后续所有复杂实验的逻辑起点和技术支撑。 1. 缓冲液与溶液配制技术： 精确的pH控制是生物化学实验成功的关键。本章详细介绍了各类生物缓冲体系（如Tris-HCl、磷酸盐缓冲液、HEPES等）的理论基础，包括Henderson-Hasselbalch方程的应用。重点阐述了如何根据实验需求（如酶反应、蛋白质溶解、核酸稳定性要求）精确计算所需原料的量，并掌握使用pH计的标准操作流程，包括电极的校准、维护与使用中的注意事项，确保缓冲液的稳定性与准确性。此外，对不同级别水（去离子水、蒸馏水、超纯水）的适用场景进行了区分说明。 2. 常用无菌操作技术： 微生物污染是分子生物学实验中的主要障碍。本部分系统介绍了超净工作台（生物安全柜）的正确使用、火焰灭菌技术、液体和固体培养基的无菌分装。重点讲解了酵母、大肠杆菌等模式生物的接种、传代和保藏方法。强调了个人防护装备（PPE）的规范穿戴和操作流程中的“无菌操作区”概念的建立与维护，以最大限度地减少环境微生物的引入。 3. 离心分离技术： 离心是实现生物大分子和细胞分离纯化的核心手段。本章全面介绍了低速、高速和超速离心机的原理、结构及安全操作规范。详细对比了水平转子和角式转子的特性差异及其对沉降系数的影响。对于密度梯度离心（如蔗糖密度梯度和Ficoll梯度），详细描述了如何根据目标物质的密度精确配制梯度，并讲解了如何根据沉降时间计算所需的相对离心力（RCF）。 第二部分：蛋白质研究的实验核心技术 本部分深入探讨了蛋白质的提取、分离、鉴定与定量分析的系列技术，这是理解生命活动分子机制的基石。 1. 蛋白质提取与粗纯化： 针对不同来源（细菌、动植物组织、细胞培养物）的样本，本章介绍了温和和强力裂解方法的选择。详细对比了机械法（匀浆、超声波）、酶解法（溶菌酶、蛋白酶K）和化学法（去污剂、变性剂）的优缺点及适用性。重点讲解了如何优化裂解缓冲液的成分（如加入蛋白酶抑制剂Cocktail、还原剂DTT/β-巯基乙醇）以防止蛋白质降解和失活。 2. 电泳分离技术（SDS-PAGE与等电聚焦）： SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）是分析蛋白质分子量和纯度的金标准技术。本章不仅教授了凝胶的配制（如APM的聚合反应控制），还详细解析了电泳缓冲液的缓冲系统、样品制备（还原性与非还原性处理）和上样流程。对于更精细的分离，等电聚焦（IEF）技术被引入，阐述了其基于蛋白质等电点（pI）的原理，以及双向电泳（2D-PAGE）的完整操作流程和成像技术。 3. 蛋白质定量与活性测定： 准确测定蛋白质浓度是后续实验的先决条件。本章详细介绍了紫外吸收法（A280nm）、Bradford法、Lowry法和BCA法的原理及其适用范围。特别强调了不同试剂对干扰物质（如去污剂、还原剂）的敏感性，以及如何通过标准曲线进行准确校准。同时，针对酶学研究，介绍了底物检测法（如对硝基苯酚底物）和偶联反应法来测定酶的比活力。 第三部分：核酸操作与基因工程基础 本部分聚焦于遗传物质的提取、修饰、增殖与分析，是分子生物学研究的核心领域。 1. 基因组DNA和质粒DNA的提取纯化： 本章区分了从原核细胞、真核细胞组织和血液中提取高分子量基因组DNA的SOP。重点介绍了基于有机溶剂（酚/氯仿）萃取法与基于硅胶柱的快速提取法的原理差异与操作细节。对于质粒DNA的提取，详述了碱裂解法的关键步骤（如超螺旋DNA的保持）以及不同类型的质粒（高拷贝、低拷贝）所需的处理差异。 2. PCR技术及其变体： 聚合酶链式反应（PCR）是核酸扩增的基石。本章详细解释了热循环仪的程序设置逻辑，包括引物退火温度（Tm）的计算与优化。重点介绍了应对复杂模板的挑战，如Touchdown PCR和热启动PCR的应用。此外，对实时荧光定量PCR（qPCR）的原理、荧光染料（SYBR Green）和探针技术（TaqMan）的选择与定量分析方法进行了详尽的阐述。 3. 琼脂糖凝胶电泳与核酸的可视化： 本章教授如何根据目标DNA片段的大小选择合适的琼脂糖浓度，并介绍了溴化乙锭（或替代品）的安全使用与DNA条带的分析、切胶回收技术。强调了电泳缓冲液的缓冲能力对迁移速度的影响，以及如何利用DNA Marker进行准确的分子量判断。 第四部分：现代生物学研究中的整合应用 本部分将基础技术有机结合，介绍了几种在当代研究中广泛使用的综合性技术流程。 1. 蛋白质与核酸的印迹分析（Western & Southern Blot）： 详细描述了蛋白质转移（转膜）技术，包括转膜槽的搭建、膜的选择（PVDF与NC膜）以及湿法与干法转膜的优缺点。讲解了抗体孵育的封闭步骤、一抗二抗的选择与优化，以及化学发光检测系统的显影过程。对于Southern Blot，则侧重于探针的标记（放射性与非放射性）和杂交条件（温度与盐浓度）的精确控制。 2. 基因克隆与载体构建基础： 本章介绍了限制性内切酶的酶切反应条件优化（如温度、盐浓度和配套缓冲液的选择），以及T4 DNA连接酶的反应原理。重点阐述了如何设计正向和反向引物以引入特定的限制性内切酶位点，并演示了“粘性末端连接”和“平末端连接”的实践操作流程。 结语 本书旨在作为一本“动手”的指导手册，而非纯粹的理论参考书。每项实验都配有详细的故障排除指南（Troubleshooting），预测学习者在实践中可能遇到的问题，并提供切实可行的解决方案。通过系统的训练，读者将能够独立设计、执行和分析复杂的生物化学与分子生物学实验，为未来的科研工作打下坚实的技术基础。

评分☆☆☆☆☆

这本书的实用性是我最看重的一点。很多实验教材在理论讲解上大同小异，但真正到了动手操作的时候，却常常会遇到各种问题。这本书则完全不同，它将理论与实践完美地结合在一起，给出的实验方案都经过了反复的验证，非常具有可操作性。书中对每个实验的注意事项都交代得非常清楚，比如试剂的配制、仪器的校准、操作过程中的关键步骤等等，这些细节都能够帮助我们避免很多不必要的错误，从而提高实验的成功率。更令我欣喜的是，书中还提供了一些常见的实验故障排除指南，这对于我们在实验中遇到突发情况时，能够迅速找到解决方法，大大减少了实验的挫败感。

评分☆☆☆☆☆

这本书名真是够分量，让我对它充满了期待。首先，封面设计就透着一股严谨和专业，简约而不失大气，一眼就能看出是出自名家之手。翻开目录，看到清晰的章节划分和实验项目的命名，就觉得心里踏实了不少。我一直对生物化学和分子生物学这块儿特别感兴趣，但总觉得理论知识像是一盘散沙，缺乏实践的支撑，难以融会贯通。这本书恰好弥补了这一块的缺失，提供了大量精心设计的实验，涵盖了从基础的酶学反应到复杂的基因克隆等，这对于我们这些想在理论和实践之间搭建桥梁的学生来说，简直是雪中送炭。而且，听说是“十二五”国家重点图书出版规划项目，又是中国科学技术大学的精品教材，这双重保障让我觉得这本书的质量绝对是杠杠的，内容编排的科学性和前沿性都有了保证。

评分☆☆☆☆☆

这本书给我的整体感受就是“扎实”和“前沿”。作为一本“精品教材”，它在内容的选择上无疑是经过了严格的筛选，既有生物化学与分子生物学领域的经典实验，也有一些近年来发展起来的新技术和新方法。这让我感觉自己学习到的知识是与时俱进的，能够跟上学科发展的步伐。而且，书中的内容逻辑清晰，层次分明，从易到难，层层递进，非常适合学生循序渐进地学习。我尤其欣赏书中对于实验结果的讨论部分，它不仅仅是给出参考答案，而是引导读者去思考实验结果的意义，以及可能存在的误差来源，这极大地培养了我们的批判性思维和独立思考能力。这本书无疑为我在生物化学与分子生物学领域打下了坚实的基础。

评分☆☆☆☆☆

作为一名刚刚接触生物化学与分子生物学实验的学生，我常常感到无从下手，很多理论知识读起来生涩难懂，直到我看到了这本书。它的语言风格非常友好，就像一位经验丰富的老师在循循善诱，没有丝毫的说教感。每个实验项目的讲解都非常细致，从实验目的、原理，到仪器设备、试剂准备，再到具体的实验步骤，都讲解得清清楚楚，甚至连一些容易出错的细节都一一指出。更重要的是，书中穿插了很多图示和流程图，这极大地降低了理解的难度，让抽象的实验过程变得形象生动。我特别喜欢它在实验操作指导之外，还结合了大量相关的背景知识和延伸阅读，这让我不仅仅是在完成实验，更是在理解实验背后的科学意义，能够将书本知识与实际操作紧密结合起来，这种学习方式让我觉得既高效又有趣。

评分☆☆☆☆☆

这本书给我的感觉就像一个宝库，里面蕴藏着无数珍贵的知识财富。我之前做过一些零散的实验，但总是觉得不够系统，很多操作技巧掌握得也不够扎实。这本书的出现，就像是给我点亮了一盏明灯。它在实验设计上非常精巧，每个实验都围绕着一个核心的科学问题展开，既能验证理论知识，又能锻炼实验技能。而且，书中提供了详细的数据分析和结果解释的指导，这对于我们这些初学者来说尤为重要，能够帮助我们学会如何正确地解读实验结果，并从中得出有价值的结论。我发现，通过这本书的学习，我不仅掌握了许多常用的生物化学与分子生物学实验技术，更重要的是，我的科学思维和解决问题的能力得到了极大的提升，学会了如何系统地思考和设计实验。

评分☆☆☆☆☆

1997年，我在实验室实习，当时大家的情绪都很高，实验室的气氛很像10年后的和今天的。不少人的座位旁都放着面那张美丽的夕阳照。现在想起来，它似乎预示着一个帝国的黄昏。说起美国电话和电报公司，即公司，在美国乃至在世界上几乎无人不知、无人不晓。该公司由电话之父亚历山大贝尔()创立于1877年，最初叫做贝尔电话公司。为了避免以后混淆，我们这里统一采用的称呼。电话的发明和公司的建立，第一次实．类远程实时的交互通信(虽然电报比电话出现得早，但它不是实时交互通信)，并且促进了社会的进步。

评分☆☆☆☆☆

1997年，我在实验室实习，当时大家的情绪都很高，实验室的气氛很像10年后的和今天的。不少人的座位旁都放着面那张美丽的夕阳照。现在想起来，它似乎预示着一个帝国的黄昏。说起美国电话和电报公司，即公司，在美国乃至在世界上几乎无人不知、无人不晓。该公司由电话之父亚历山大贝尔()创立于1877年，最初叫做贝尔电话公司。为了避免以后混淆，我们这里统一采用的称呼。电话的发明和公司的建立，第一次实．类远程实时的交互通信(虽然电报比电话出现得早，但它不是实时交互通信)，并且促进了社会的进步。

评分☆☆☆☆☆

公司

评分☆☆☆☆☆

公司

评分☆☆☆☆☆

图11是在上世纪90年代拍摄的美国新泽西州弗伦翰公园()日落时的照片。弗伦翰公园占地十几平方公里，大多是芳草地和森林，在森林中央，是一片中等规模临湖的工业园一这是笔者见到最美丽的工业园。在那里，每天都能看到天鹅在湖中悠闲地游荡，还不时可以见到野鹿出没。这里原是石油巨头埃克森美孚(-)的地产，1996年，这里来了一个新主人一美国电报和电话公司()实验室。1995年，如日中天的公司重组，分裂成、朗讯和三家公司。下属的举世闻名的科研机构贝尔实验室也被一分为二。朗讯公司获得了一半的科研机构和贝尔实验室的名称。划归的一半研究室组成了实验室(后来更名为香农实验室)，从原来的默里山()搬到了弗伦翰公园。在那里，出过11位诺贝尔奖获得者的实验室，像一颗进入晚年的恒星，爆发出极强的、但也是最后的光辉，然后就迅速地暗淡下来。10年后，和朗讯()公司分别被公司和法国的阿尔卡特()公司并购。

评分☆☆☆☆☆

很喜欢:..吴军1.吴军，他的每一本书几本上都有，这本浪潮之巅很不错，近一百多年来，总有一些公司很幸运地、有意识或无意识地站在技术革命的浪尖之上。在长达十年甚至几十年的时间里，它们代表着科技的浪潮，直到下一波浪潮的来临。从19世纪末算起，公司、公司、苹果公司、英特尔公司、微软公司、思科公司、雅虎公司和公司都先后被幸运地推到了浪尖。虽然，它们来自不同的领域，中间有些已经衰落或正在衰落，但是它们都极度辉煌过。吴军的这本浪潮之巅系统地介绍了这些公司成功的本质原因及科技工业一百多年的发展。在这些公司兴衰的背后，有着它必然的规律。浪潮之巅不仅讲述科技工业的历史，更重在揭示它的规律性。浪潮之巅梳理了产业发展的历史脉络，叙述了美国硅谷明星公司的兴衰沉浮。通过对各大公司从技术轨迹到经营理念的剖析，作者想向读者展现的并不仅仅是一幅有关科技产业更迭和大公司成长规律的历史景观，而是为了让中国的读者能更真实地了解美国、了解科技产业，以此理解科技创新和商业公平在美国文化生活中的深刻意义。第1章帝国的余晖

评分☆☆☆☆☆

图11是在上世纪90年代拍摄的美国新泽西州弗伦翰公园()日落时的照片。弗伦翰公园占地十几平方公里，大多是芳草地和森林，在森林中央，是一片中等规模临湖的工业园一这是笔者见到最美丽的工业园。在那里，每天都能看到天鹅在湖中悠闲地游荡，还不时可以见到野鹿出没。这里原是石油巨头埃克森美孚(-)的地产，1996年，这里来了一个新主人一美国电报和电话公司()实验室。1995年，如日中天的公司重组，分裂成、朗讯和三家公司。下属的举世闻名的科研机构贝尔实验室也被一分为二。朗讯公司获得了一半的科研机构和贝尔实验室的名称。划归的一半研究室组成了实验室(后来更名为香农实验室)，从原来的默里山()搬到了弗伦翰公园。在那里，出过11位诺贝尔奖获得者的实验室，像一颗进入晚年的恒星，爆发出极强的、但也是最后的光辉，然后就迅速地暗淡下来。10年后，和朗讯()公司分别被公司和法国的阿尔卡特()公司并购。

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1百年帝国

评分☆☆☆☆☆

1997年，我在实验室实习，当时大家的情绪都很高，实验室的气氛很像10年后的和今天的。不少人的座位旁都放着面那张美丽的夕阳照。现在想起来，它似乎预示着一个帝国的黄昏。说起美国电话和电报公司，即公司，在美国乃至在世界上几乎无人不知、无人不晓。该公司由电话之父亚历山大贝尔()创立于1877年，最初叫做贝尔电话公司。为了避免以后混淆，我们这里统一采用的称呼。电话的发明和公司的建立，第一次实．类远程实时的交互通信(虽然电报比电话出现得早，但它不是实时交互通信)，并且促进了社会的进步。