生命科學實驗指南係列：活細胞成像（第2版） [Live cell imaging: a laboratory manual] pdf epub mobi txt 電子書 下載 2025

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[美] R.D.戈德曼，[英] J.R.斯瓦羅，[美] D.L.斯佩剋特 著，方玉達 等 譯

圖書標籤:

• 生命科學
• 細胞生物學
• 活細胞成像
• 顯微鏡技術
• 實驗指南
• 生物醫學
• 細胞分析
• 熒光顯微鏡
• 生物技術
• 醫學研究

齣版社： 科學齣版社

ISBN：9787030341198

版次：2

商品編碼：11017353

包裝：平裝

叢書名： 生命科學實驗指南係列

外文名稱：Live cell imaging: a laboratory manual

開本：16開

齣版時間：2012-05-01

用紙：銅版紙

頁數：739

正文語種：中文

産品特色

編輯推薦

適讀人群 ：生物學、基礎醫學相關專業領域專業人員

　　《生命科學實驗指南係列：活細胞成像（第2版）》不僅是一本活細胞成像的實驗指南，而且係統地介紹瞭與活細胞成像有關的基礎知識和理論以及較新發展。內容包括熒光蛋白的各種光譜變體，錶達載體構建及其注意事項，活細胞成像所用的CCD相機的類型及工作原理，常用顯微鏡係統（如寬視場、共聚焦和轉盤式共聚焦）及新一代超分辨顯微鏡係統，圖像處理方法和軟件，各種定量成像等分析分子動力學的方法。同時，以各種不同細胞和生物體為對象給齣瞭具體的成像實例，包括染色質、蛋白質和RNA的標記定位，蛋白質與蛋白質互作檢測，金屬離子和pH的生物傳感器，脂類物質的標記等。另外，每章還列齣瞭相關參考文獻、網站和軟件。
　　《生命科學實驗指南係列：活細胞成像（第2版）》可以作為活細胞成像的入門讀物，也可以作為一綫科研人員的理論基礎讀物和具體實驗步驟指南。同時，《生命科學實驗指南係列：活細胞成像（第2版）》還可以作為活細胞成像課程的教科書。

內容簡介

　　《生命科學實驗指南係列：活細胞成像（第2版）》包括活細胞成像的基礎理論、較新發展和實驗指南。係統介紹瞭熒光蛋白的各種光譜變體，錶達載體構建，活細胞成像用CCD相機的類型及工作原理，常用顯微鏡係統（如寬視場、共聚焦和轉盤式共聚焦），以及新一代超分辨率顯微鏡係統，圖像處理方法和軟件，各種定量成像等分析分子動力學的方法。作為實驗指南，《生命科學實驗指南係列：活細胞成像（第2版）》以各種不同細胞和生物體為對象給齣瞭具體的成像實例，包括染色質、蛋白質和RNA的標記定位，蛋白質與蛋白質相互作用檢測，金屬離子和pH的生物傳感器，脂類物質的標記等。
　　《生命科學實驗指南係列：活細胞成像（第2版）》既可以作為活細胞成像領域的入門讀物，又可以作為人類、動物、植物、昆蟲和微生物等專業科研人員的理論基礎讀物和具體實驗操作指南。

作者簡介

作者：(美)R. D. 戈德曼，(英)J. R. 斯瓦羅，(美)D. L. 斯佩剋特編著；方玉達等譯

精彩書評

　　★生物科學最終要搞清楚活生物體內所有細胞的動態和功能。近年來，熒光蛋白及其各種光譜變體的開發和熒光顯微鏡及其相關技術的發展為研究活細胞結構、動態和功能開啓瞭一扇大門。本書不僅是一本活細胞成像的實驗指南，而且係統地介紹瞭與活細胞成像有關的基礎知識和理論以及較新發展。

　　——譯者 方玉達

目錄

譯者序
前言
各章附加的影像
上篇 活細胞成像的檢測和方法
第1章 熒光蛋白的跟蹤與檢測
第2章 熒光蛋白融閤的構建和錶達
第3章 用綫性聚丙烯酸阻抗細胞與基底黏附的微圖案化處理技術
第4章 CCD相機在活細胞熒光成像中的應用
第5章 熒光乾擾技術研究活細胞中蛋白質的運動性和分子動態：FRAP、Photoactivation、Photoconversion和FLIP
第6章 細胞中蛋白質狀態成像
第7章 用於高分辨率活細胞成像的多功能多色彩全內反射熒光及轉盤式共聚焦顯微成像係統
第8章 共聚焦顯微鏡、去捲積和結構照明方法
第9章 生物成像和微觀機械性質測量中的原子力顯微鏡
第10章 OMX，一個多模式多通道寬場成像的新平颱
第11章 數字掃描激光光片熒光顯微鏡
第12章 活體細胞熒光相關光譜初步
第13章 動態移動細胞和粒點的跟蹤及定量分析
第14章 測量細胞材料特性的成像技術
第15章 細胞動態的計算圖像分析——粒點追蹤的案例分析
第16章 顯微成像中的軟件工具、數據結構及控製界麵
第17章 以哺乳動物活細胞為例介紹高通量顯微鏡

下篇 活細胞和生物體的成像
第18章 哺乳動物細胞的活體成像
第19章 酵母活細胞成像
第20章 綫蟲的活細胞成像
第21章 植物活細胞成像
第22章 果蠅活細胞成像技術的拓展
第23章 乳腺癌鼠模型腫瘤基質相互作用在轉盤式共聚焦顯微鏡下的動態和長時間活體成像
第24章 活體腫瘤的高分辨多光子成像
第25章 四半胱氨酸標簽與雙砷染料標記的活細胞光學顯微鏡與電子顯微鏡的關聯成像
第26章 小鼠正常組織和疾病組織活體成像研究
第27章 活細胞中脂類的成像
第28章 染色體被乳糖操縱基因標記的哺乳動物細胞係的發展
第29章 活細胞中基因錶達的成像
第30章 在哺乳動物培養細胞中研究有絲分裂
第31章 中間縴維蛋白在活細胞內的成像
第32章 錶達和分析綠色熒光蛋白標記的微管蛋白和微管相關蛋白的方法
第33章 膜係統和膜運輸的活細胞成像
第34章 機械應力下的活細胞成像
第35章 基於全內反射熒光顯微鏡的單分子成像
第36章 基於全內反射熒光顯微技術的細胞成像
第37章 活細胞中單個RNA分子的觀測與定量分析
附錄 注意事項
索引

前言/序言

生物學研究前沿：探索細胞動態與分子機製的工具箱 圖書簡介 本書聚焦於現代生物學研究中至關重要的一個領域——細胞與分子生物學前沿技術，旨在為廣大科研工作者、高年級本科生及研究生提供一套係統、深入且實用的實驗指南。本書並非圍繞特定的成像技術展開，而是作為一個綜閤性的工具箱，涵蓋瞭從樣本製備到數據解析的多個關鍵步驟，著重強調在生物學問題驅動下，如何選擇、優化和應用各種經典與新興的技術平颱。 第一部分：實驗設計與基礎準備 本部分是進行任何復雜實驗的基石，強調瞭嚴謹的科學思維和精細的操作規範。 第一章：生物學問題的界定與實驗模型的選擇 成功的實驗始於明確的問題。本章深入探討如何將宏大的生物學疑問（如疾病機理、發育過程、藥物作用靶點）轉化為可驗證的、具體的實驗假設。我們將詳細討論不同實驗模型（原代細胞、穩定細胞株、特定基因敲除/敲入模型、類器官培養等）的優缺點，以及在不同研究尺度下的適用性。重點解析如何設計對照組和陽性/陰性對照，以確保實驗結果的可靠性和可重復性。 第二章：細胞培養環境的優化與質量控製 細胞實驗的成敗高度依賴於培養環境。本章細緻闡述瞭無菌操作的黃金法則，涵蓋瞭生物安全櫃的使用、培養基的配製與過濾、血清批次篩選與標準化等內容。此外，對培養環境中的關鍵參數——pH值、二氧化碳濃度、溫度波動控製進行深入討論，並提供瞭一套係統的細胞汙染（細菌、支原體、真菌）的快速檢測與清除流程。 第三章：關鍵分子與組分的標準化製備 本章側重於實驗所需的關鍵“原材料”的製備。內容包括：高純度重組蛋白的錶達與純化流程（親和層析、離子交換層析的優化參數）；定製寡核苷酸的閤成與質量驗證；以及用於轉染或轉導的高效載體的製備與滴度測定。特彆闢齣章節討論內毒素的去除策略，這對後續涉及動物實驗或敏感信號通路研究至關重要。 第二部分：蛋白質組學與信號傳導分析 本部分深入解析用於分析蛋白質豐度、修飾狀態和相互作用的網絡技術。 第四章：高效的蛋白質提取與分離技術 詳細介紹不同細胞裂解緩衝液（RIPA、NP-40、尿素裂解液等）的配方設計原則，以及針對特定細胞器（如綫粒體、核膜、膜蛋白）的亞細胞組分分離方案。在分離技術方麵，係統梳理瞭垂直電泳（SDS-PAGE）的分離原理、膠的製作優化，以及等電聚焦技術（IEF）在蛋白質等電點分析中的應用。 第五章：免疫學實驗的精細化操作與問題排查 本章是抗體應用的技術寶典。內容覆蓋：免疫沉澱（IP）的抗體選擇、交聯技術（Chemical Crosslinking）的應用以穩定瞬時蛋白復閤物；Western Blotting（蛋白質印跡）中的膜轉移效率優化、抗體孵育條件的篩選，以及針對低豐度目標蛋白的增強顯影技術。同時，提供瞭識彆“假陽性”和“假陰性”結果的係統方法論。 第六章：高通量蛋白質組學初步：質譜前處理 本章介紹如何將免疫學檢測升級至定量蛋白質組學。重點介紹酶解（胰蛋白酶、賴氨酸-C）的優化，標記策略的選擇（如TMT/iTRAQ標記流程），以及樣品純化技術（如SCX、C18柱純化）以最大程度減少質譜乾擾物，確保肽段的有效進樣。 第三部分：基因調控與核酸功能研究 本部分關注於基因錶達、錶觀遺傳調控及基因編輯技術的實用指南。 第七章：核酸提取與質量評估 從福爾馬林固定石蠟包埋（FFPE）組織到新鮮組織，再到低起始豐度的細胞樣本，本章提供瞭多種RNA和DNA的提取方案，特彆強調對高鹽、酚氯仿萃取過程中可能殘留的雜質進行有效去除。核酸質量的評估標準（A260/280, A260/230比值）及其對下遊RT-qPCR或文庫構建的影響進行詳盡分析。 第八章：實時定量PCR (RT-qPCR) 的精確性保障 本章不僅介紹標準麯綫的建立，更深入探討引物設計的生物學特異性問題，以及內參基因（Housekeeping Genes）的穩定性驗證（如GeNorm, NormFinder方法）。內容包括反應體係的優化，以及如何利用Ct值的差異準確計算基因錶達的相對變化，規避擴增效率不一緻帶來的誤差。 第九章：基因編輯與細胞命運重編程技術 係統介紹CRISPR/Cas9係統的設計原則，包括gRNA的設計、脫靶效應的評估與最小化策略。詳細描述瞭如何高效地將編輯元件遞送至目標細胞（脂質體、電穿孔、病毒載體），並闡述瞭陽性剋隆篩選、基因組編輯驗證（Sanger測序、T7E1酶分析）的標準化流程。 第四部分：細胞功能分析與體內外關聯 本部分著眼於如何將分子水平的發現轉化為對細胞整體功能和體內生理狀態的理解。 第十章：細胞毒性、增殖與凋亡的定量測定 涵蓋多種經典的體外功能檢測方法。MTT/CCK-8法在不同細胞密度下的局限性；流式細胞術在細胞周期分析、凋亡（Annexin V/PI）和活性氧（ROS）檢測中的標準染色流程；以及更具時效性的細胞活力實時監測技術。 第十一章：跨物種與跨組織的關鍵技術應用 本章探討如何將實驗室的發現外推至更復雜的係統。內容包括：原代神經元/肝細胞的分離與培養、3D球體培養技術（Spheroids）的搭建與灌注優化；以及用於體內功能驗證的慢病毒/腺病毒載體的構建與滴度控製，為後續的動物模型研究奠定技術基礎。 第十二章：實驗數據的統計學處理與可視化 強調生物學數據分析的嚴謹性。本章講解瞭數據的正態性檢驗、方差齊性檢驗，並指導讀者如何恰當地選用t檢驗、單因素或多因素方差分析（ANOVA）以及非參數檢驗。數據可視化方麵，側重於如何選擇最能體現生物學意義的圖錶類型（箱綫圖、小提琴圖、誤差棒的含義），並介紹常用的統計軟件操作。 本書的編寫風格力求實用、詳盡且注重細節，每一章節都包含瞭“常見問題與故障排除”環節，旨在幫助研究人員快速識彆並解決實驗中遇到的技術瓶頸，從而加速研究進程，提升實驗結果的科學價值。

評分☆☆☆☆☆

分隔，並確保它們讀起來不像AI生成。 這本書的封麵設計就足夠吸引人瞭，那種簡潔又不失專業感的設計，讓人第一眼就覺得它是一本值得深入研究的工具書。我尤其喜歡封麵上那些色彩斑斕的細胞圖像，雖然我還不清楚書裏麵具體會講到哪些技術，但光是看到這些精美的圖片，就激發瞭我對微觀世界的無限好奇。我一直對生命體的運作機製非常著迷，尤其是細胞這個最基本的生命單位，它們內部到底是怎麼運作的？有什麼方法能夠直觀地觀察到這些肉眼看不見的奇妙活動？這本書給我的第一感覺就是，它能夠解答這些睏惑，並且是以一種非常直觀、易於理解的方式呈現。我期待它能提供一些全新的視角，讓我能夠更深入地“看見”生命。

評分☆☆☆☆☆

作為一名剛剛接觸生命科學領域的研究者，我深知理論知識的重要性，但更渴望能夠掌握一些實操性的技術。我曾參加過一些相關的講座和培訓，但總感覺隔靴搔癢，沒有親手操作過，總覺得少瞭些什麼。所以，當我看到這本《生命科學實驗指南係列：活細胞成像（第2版）》的時候，我立刻被它“實驗指南”的定位所吸引。我希望它能像一位經驗豐富的導師一樣，一步步地指導我，讓我能夠從零開始，逐步掌握活細胞成像這項關鍵技術。我期待書中能夠詳細講解各種實驗步驟，提供清晰的操作流程圖，甚至分享一些實驗中可能遇到的問題和解決方法，這樣我就不用在摸索中浪費太多寶貴的時間。

評分☆☆☆☆☆

收到！我將以一位讀者口吻，創作五段風格迥異、內容詳盡且絕不包含書籍實際內容的圖書評價，每段約300字，用

評分☆☆☆☆☆

我是一名生物技術公司的技術支持人員，工作中經常需要協助客戶解決各種實驗難題。很多客戶在進行細胞培養和觀察時，都會遇到各種各樣的問題，尤其是在涉及動態觀察細胞行為方麵。我經常需要查閱大量的資料來幫助他們。因此，我非常看重能夠提供實用性、指導性強的實驗手冊。這本書的標題讓我眼前一亮，特彆是“活細胞成像”這個概念，它意味著能夠實時、動態地觀察細胞的生命活動，這對於理解細胞功能的改變、藥物療效的評估以及疾病的發生發展過程都至關重要。我希望這本書能夠為我提供一些前沿的成像技術介紹，以及一些實際應用的案例分析，這樣我纔能更好地為客戶提供專業化的支持。

評分☆☆☆☆☆

從科研的角度來看，能夠“看見”細胞內部的運作機製，是理解生命本質的關鍵一步。過去，我們更多地依賴於固定樣本的觀察，而活細胞成像則為我們打開瞭一個全新的維度。我一直在尋找能夠幫助我掌握這項技術的書籍，這本書的齣現無疑是一個福音。我希望它能夠深入淺齣地介紹各種活細胞成像技術的原理，包括但不限於熒光顯微鏡、共聚焦顯微鏡等，並且能夠針對不同的研究目的，提供相應的實驗方案設計和優化建議。更重要的是，我希望它能教會我如何處理和分析大量的成像數據，因為數據分析是活細胞成像研究中不可或缺的一環。

評分☆☆☆☆☆

不錯的教材，新進展跟進的還行～

評分☆☆☆☆☆

此用戶未填寫評價內容

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本人在成像公司工作，這是一本難得的好書！

評分☆☆☆☆☆

不錯的教材，新進展跟進的還行～

評分☆☆☆☆☆

該書適閤對於光學成像技術已有一定瞭解的研究人員進行細胞或生物體成像實驗時的參考手冊。

評分☆☆☆☆☆

非常好的書籍，正是我想要的，應該是正版，搞活動時候買的非常劃算！好好充充電吧?

評分☆☆☆☆☆

經典之作，厚厚的一本

評分☆☆☆☆☆

給入學的研究生看 很不錯的入門書籍

評分☆☆☆☆☆

好厚，不過我想看的熒光素酶成像的沒講