植物显微技术(第2版)/全国高等农林院校研究生教材

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李和平 编
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出版社: 科学出版社
ISBN:9787030236883
版次:2
商品编码:12113197
包装:平装
丛书名: 全国高等农林院校研究生教材
开本:16开
出版时间:2009-02-01
用纸:胶版纸
页数:257
字数:410000
正文语种:中文

具体描述

内容简介

  《植物显微技术(第2版)/全国高等农林院校研究生教材》是据编者近30年的教学、科研积累及实验技能整理而成。主要介绍了植物显微技术中广泛应用和实用的内容与方法,包括:植物制片技术(石蜡切片、半薄切片、冰冻切片、超薄切片、冰冻超薄切片、扫描电镜样品制备、木材切片)、原位杂交、原位PCR、植物组织化学、GUS及荧光检测方法、细胞组织分离制片、整体透明技术、胚囊酶法分离技术、整体制片技术,显微镜的结构、原理、使用和保养,显微测量,专用显微技术(荧光显微术、相差显微术、偏光显微术、微分干涉显微术、暗视野显微术),以及摄影装置和显微摄影技术(微距摄影、体视显微镜摄影、显微摄影)。全书图文并茂,既论述了实验方法与原理,又突出了实验技术要点,并附有详尽相关实验指导,便于教学安排及自学查阅。
  《植物显微技术(第2版)/全国高等农林院校研究生教材》可作为农林院校植物生产类研究生、本科生各专业的基本教材,亦可供综合性大学、师范院校生物系师生及农林科技工作者参考。

内页插图

目录

第二版前言
代序
第一版前言

第一篇 植物制片技术
第一章 植物制片的目的和方法概述
第一节 植物制片的目的、类型和方法
第二节 植物制片的一般流程
一、一般制片的步骤
二、石蜡制片的主要步骤
三、半薄切片的主要步骤
第三节 常用仪器、用具、药品
一、常用仪器
二、常用实验用具
三、常用文具
四、药品及染料的规格
第四节 制片前的准备工作
一、玻璃器皿的清洁
二、实验计划、制片日程表
第二章 石蜡制片法
第一节 材料的选择与分割
一、取样
二、植物器官的分割
三、染色体制片取样
第二节 固定与保存
一、固定的原理和方法
二、固定液
三、固定操作步骤
四、材料的冲洗
五、固定时需要注意的问题
六、常用器具
第三节 脱水
一、脱水的目的
二、常用的脱水剂及脱水与复水方法
三、脱水时注意事项
第四节 透明
一、透明的目的
二、常用的透明剂
三、透明的方法
第五节 浸蜡
一、浸蜡的目的
二、浸蜡方法和步骤
第六节 包埋
一、包埋剂
二、石蜡的种类
三、石蜡的选择
四、各级石蜡的配制与包埋前的准备
五、包埋方法
第七节 切片
一、切片机、切片刀种类及应用
二、切片机的组成与使用
三、切片刀的准备
四、蜡块的分割、修整与固着
五、切片方法与步骤
六、石蜡切片过程易出现的问题及解决的办法
第八节 展片与粘片
一、展片、粘片
二、常用粘贴剂及其配制
三、展片、粘片方法及注意事项
第九节 脱蜡与透明
一、脱蜡与透明
二、石蜡制片中常用的脱蜡剂与透明剂
三、脱蜡方法
第十节 染料与染色
一、染色的目的
二、染料的分类
三、几种常用染料的性质及配制
四、染色原理简介
五、一般的染色方法
六、染色注意事项
第十一节 封藏
一、封藏的目的
二、封藏剂种类
三、封藏方法
第三章 石蜡制片实例
一、根尖纵切片制片法
二、茎的纵、横切片制片法
三、叶横切片制片法
四、花芽纵切片制片法
五、子房纵切片制片法
六、花生子叶横切片制片法
七、线粒体制片法——雷加特氏法
第四章 其他切片法
第一节 徒手切片法
一、徒手切片概述
二、徒手切片实例
第二节 冰冻切片法
一、冰冻切片概述
二、冰冻切片机
三、冰冻切片方法
四、冰冻切片注意事项
第三节 滑走切片法
一、滑走切片法概述
二、滑走切片机组成与使用
三、滑走切片法研究木材结构注意事项
四、滑走切片实例
第五章 非切片制片法
第一节 压片、涂片制片法
一、压片、涂片制片方法及在植物学研究中的应用
二、压片制片法
三、涂片制片法
第二节 整体制片法
一、整体透明法
二、蚕豆叶或鸭跖草叶表皮制片
三、小麦叶表皮制片
四、棉胚乳整体制片
第三节 离析法
一、木材解离制片
二、胚囊酶法分离技术
第六章 半薄切片、超薄切片与扫描电镜样品制备
第一节 半薄切片和超薄切片法常用试剂
一、几种常用固定液的配制
二、脱水剂
三、渗透剂
四、包埋剂
五、常用染料
第二节 半薄切片制样方法
一、半薄切片方法简介
二、半薄切片制样步骤
三、半薄切片法在植物学研究中的应用
第三节 超薄切片制样方法
一、超薄切片制样步骤
二、超薄切片法在植物学研究中的应用
第四节 扫描电子显微镜样品的制备
一、整体样品表面结构观察的制样方法
二、扫描电子显微镜制样中的关键步骤
三、扫描电子显微镜在植物学研究中的应用
第五节 冷冻超薄切片制样方法简介
一、冷冻超薄切片原理
二、冷冻超薄切片方法
三、低温包埋技术
四、冷冻超薄切片在植物学研究中的应用
第七章 原位杂交与组织化学
第一节 原位杂交技术
一、植物染色体原位杂交技术
二、RNA原位杂交技术
第二节 组织切片原位PCR
一、原位PCR技术的基本原理
二、基本类型
三、原位PCR基本步骤
第三节 植物组织化学
一、核酸的测定
二、细胞内含物的测定
三、细胞壁物质的测定
第四节 GUS及荧光检测
一、GUS组织化学染色
二、免疫组织化学检测
三、非免疫荧光标记

第二篇 显微镜与显微摄影技术
第八章 显微镜
第一节 显微镜基本知识
一、显微镜的种类
二、透镜成像的基本知识
三、光路简介
四、复式显微镜结构原理
五、显微镜的参数
第二节 显微镜的结构和性能
一、光学系统
二、机械部件
三、推进器和显微测微尺
四、显微镜的保养
五、显微镜的维护
第三节 几种常用显微镜简介
一、复式显微镜的原理、结构与使用
二、体视显微镜的原理、结构与使用
三、荧光显微镜的原理、结构与使用
四、倒置显微镜的原理、结构与使用
五、激光共聚焦显微镜简介
六、电子显微镜的原理、结构与使用
第四节 几种显微技术的应用
一、荧光显微术
二、相差显微术
三、微分干涉术
四、偏光显微术
五、暗视野显微术
第九章 显微摄影成像装置
第一节 摄影和照相机的发展历史
一、摄影术的含义和发明
二、照相机的发明和发展
第二节 照相机的类型和结构
一、照相机的类型
二、照相机的主要结构
第三节 照相机的使用方法
一、曝光和曝光量
二、调焦
三、控制景深
四、控制清晰度
五、数码相机简介
六、CCD相机简介
第十章 显微摄影技术
第一节 显微摄影技术概论
一、图像采集
二、图像存储
三、图像处理
四、图像转换
五、显微成像技术的展望
第二节 近距离摄影
一、构图
二、测光、曝光
三、表现力
四、近距离拍摄实例
五、消费型相机佳能Power Shot Prol结构功能简介
第三节 小物体(微距)摄影
一、正确操控相机
二、微距拍摄实例
三、专业数码单反相机Nikon D200结构功能简介
第四节 超微距摄影(解剖镜摄影)
一、超微距摄影装置
二、超微距摄影实例
第五节 高倍率显微摄影(显微镜摄影)
一、高倍率显微摄影装置
二、高倍率显微摄影实例
第六节 获得高质量显微图像与常见拍摄问题分析
一、相机握持的方式
二、如何判别一张模糊的图像
三、显微摄影采用的器材
四、如何虚化背景、突出主体
五、如何在暗弱光线下不使用闪光灯进行拍照
六、怎样合理使用曝光补偿
七、如何微距拍摄具有大面积绿色叶片背景的小花
八、怎样正确使用相机的白平衡
九、解剖镜下(超微距)摄影如何调光
十、高倍率显微摄影如何正确调焦
十 一、Photoshop软件后期处理时如何适度锐化
十 二、Photoshop软件后期处理时如何去除数码图像阴霾
第十一章 显微图像分析处理
第一节 显微图像处理
一、显微图像获得的几种方式
二、图像存储格式
三、图像处理方法
四、图像输出方式
五、发表文章电子图版的基本要求
第二节 专业显微图像处理分析软件
一、SimplePCI软件
二、Image-Pro Plus (IPP)软件
三、MetaMorph (MM)软件
四、Cytogenetics细胞遗传学工作站
五、两款免费的专业显微图像分析软件
六、显微图像分析对硬件的基本要求
……

第三篇 植物显微技术实验指导

前言/序言

  本教材自1992年出版以来,我校及一些兄弟院校一直用作研究生教材,深受学生和同行的好评。尽管其间曾经重印,但早已售罄,同行求购询问不断,因此我们三年前列出计划,修订再版此书。
  植物显微技术是一门理论与实践紧密结合的实验生物学课程。随着生物学的发展及学科交叉与渗透,植物显微技术不仅是经典植物科学研究的必备技术,而且已成为现代植物功能基因组学、分子生物学、植物与微生物分子互作等研究的重要技术。因此,在修订过程中,需要补充增加新内容。为了探索积累经验,近年来在学校研究生处的支持下,我们对该课程的教学体系、教学条件、教学内容、教学方法等做了相应的调整、充实和改革,以全面提高教学效果,帮助学生在理解实验原理的基础上熟练掌握关键技术,培养学生独立操作及分析问题能力。这些尝试和实践为修订再版这本教材奠定了基础。
  第二版在第一版的基础上,根据学科的发展及人才培养的需要,修改和补充了相关内容。修订后的教材总学时数由原来的80学时改为60学时。第一篇在基本保留原教材特点的基础上,增加了冰冻切片、冰冻超薄切片、扫描电镜样品制备、原位杂交、组织化学、整体透明新方法等,修改了半薄切片、超薄切片和木材切片的部分内容,第二篇增加了OlympusSZX16体视荧光显微镜、OlympusBX61研究显微镜、激光共聚焦显微镜、透射和扫描电镜、摄影装置及其摄影技术、图像处理技术。第三篇实验指导全部为新增加的内容,这是基于我们在长期教学过程中的经验和体会组织安排的。实验指导内容紧扣前两篇的实验理论与技术,前后贯通、融为一体,各个实验内容既可独立安排,又有密切的相互联系。这种编排体系便于学生在学习本课程中理论联系实际、融会贯通、学以致用,也有利于自学。
  本书在编写过程中承蒙武汉大学生命科学学院孙蒙祥教授审阅,并提出宝贵意见,深表感谢。
  本书由华中农业大学研究生处“研究生教育创新工程项目”资助。华中农业大学生命科学技术学院赵斌教授、湖北大学生命科学学院蔡得田教授、扬州大学生物科学与技术学院金银根教授、河北农业大学园艺学院张成合教授等对本教材的修订再版给予了关注和支持,在此一并感谢!
  中国科学院院士、武汉大学杨弘远教授为本书第一版作序,并在再版时予以关心,我们深表谢忱。本书是第一版的继承和发扬,值此之际,我们对第一版主编、已故王灶安教授(华中农业大学)表示深深的敬意!
  本书的第一篇第一章由李和平、龙鸿编写,第二章由李和平、冯燕妮编写,第三章由李和平编写,第四章由李和平、冯燕妮、徐有明编写,第五章由龙鸿、李和平、陈春丽编写,第六章由周竹青、龙鸿编写,第七章由陈春丽、龙鸿、李和平编写;第二篇第八章由龙鸿、周竹青、李和平、陈春丽编写,第九章和第十章由龙鸿编写,第十一章由陈春丽编写;第三篇实验指导由承担植物显微技术实验课的教师编写,文后署名。全书图版、插图由龙鸿、冯燕妮拍摄、编排。
  由于我们的水平有限,错误和不当之处在所难免,恳请同行和读者批评指正。
植物显微技术(第2版)/全国高等农林院校研究生教材 读者须知 本书系为高等院校农林专业研究生量身打造的专业教材,旨在系统、深入地介绍植物组织和细胞的显微观察与制备技术。 【重要提示】 本简介旨在说明本书不包含哪些领域或主题的内容,以帮助读者清晰界定本书的适用范围和学习重点。 本书内容核心聚焦于植物组织学、细胞学、解剖学的实验技术层面,严格围绕“显微技术”展开。因此,以下领域或主题的内容,未包含在本书的介绍或深入探讨范围之内: --- 一、 宏观植物学与生态学范畴 本书的关注点始终锁定在微观结构层面,因此,涉及植物宏观形态、生态适应性、种群动态及群落结构的内容,均不在本书讨论范畴内。 1. 植物分类学与系统发育: 本书不涉及植物的物种鉴定、科属划分的系统学原理,亦不深入探讨植物的进化历史和亲缘关系。相关的形态特征描述仅作为显微结构观察的背景参考,而非主体内容。 2. 植物生态学与群落结构: 关于植物群落的分布格局、物种多样性指数计算、植物与环境因子(如气候、土壤)的相互作用机制、群落演替过程等宏观生态学议题,本书未予介绍。 3. 植物生理学(宏观层面): 涉及光合作用总量测定、呼吸作用速率、水分运输的整体模型(如木质部导管的宏观水力学模型)等非细胞或组织层面的生理过程,本书不进行深入分析。 4. 农作物栽培与田间管理: 关于播种、灌溉、施肥、病虫害的田间防治策略、作物选育的杂交育种方案等农业生产技术,均不属于本书的显微技术范畴。 --- 二、 非植物系统或生物学前沿技术 本书的实验对象明确限定为植物材料(包括藻类、苔藓、蕨类、裸子植物和被子植物的组织、器官和细胞)。因此,涉及其他生物系统或新兴交叉学科的特定技术,本书不予收录。 1. 动物组织学与病理学技术: 本书完全不涉及动物细胞、组织(如肌肉、神经、结缔组织)的固定、染色和切片技术。与动物病理诊断相关的技术流程和染色方案(如H&E染色在动物组织中的应用)不在讨论之列。 2. 微生物学与分子生物学技术(非原位应用): 微生物培养与鉴定: 细菌、真菌的纯培养、代谢产物分析、形态鉴定等微生物学基础技术未包含。 分子生物学核心技术: DNA/RNA提取、PCR、基因克隆、蛋白质纯化与电泳(SDS-PAGE)等脱离组织结构的原位观察的技术,仅在提及细胞内特定物质定位时作为背景知识,不作为核心操作流程讲解。 3. 生物信息学与计算生物学: 关于高通量测序数据分析、基因组组装、生物图谱的定量分析软件使用指导等,均不属于本书的技术范畴。 --- 三、 偏离传统显微技术核心的影像学方法 本书侧重于经典组织化学染色、石蜡切片、冰冻切片、涂片等制片技术,以及在此基础上的光学显微观察。对于依赖于复杂仪器系统或高度专业化的影像技术,本书仅作基本原理提及,不提供详尽的仪器操作指南和故障排除方法。 1. 超高分辨率显微技术(如STED, SIM): 关于超出传统衍射极限的复杂显微成像技术原理、激光共聚焦显微镜(CLSM)的高级功能(如FRET、FRAP)的深度应用,本书仅作为未来技术展望,不作为标准研究生实验技能进行详尽阐述。 2. 电子显微镜(EM)的深度应用: 虽然本书会介绍透射电镜(TEM)和扫描电镜(SEM)的制样原理(如超薄切片和冷冻干燥),但不提供高真空环境下的样品制备细节(如全套的脱水梯度、包埋剂选择、超微切片机的具体操作参数调整),以及电镜图像的后期处理技术。 3. 活细胞成像的复杂探针: 涉及使用多种荧光蛋白(如GFP系列)构建复杂的报告基因系统进行长期活细胞动态观测、光漂白恢复技术(FRAP)的精确测定方法,本书不作为核心内容深入讲解。 --- 四、 辅助性或非直接相关的化学分析 本书的化学部分主要服务于组织和细胞结构的定位与显色(即组织化学染色)。因此,以下内容未包含: 1. 通用有机化学与无机化学的理论推导: 仅侧重于染色剂的化学结构与靶向基团的反应原理。 2. 大型仪器分析化学: 如原子吸收光谱法(AAS)、质谱法(MS)在植物化学成分定量分析中的应用,不属于本书的显微技术范畴。 3. 化学合成工艺: 某些特殊染色剂或荧光探针的实验室合成步骤或优化,本书不涉及。 --- 总结 《植物显微技术(第2版)》的核心价值在于为农林专业研究生提供一套全面、实用、规范的植物组织与细胞的样本制备、切片、染色和光镜观察的实验技术体系。读者应预期从中获得关于植物材料固定、脱水、石蜡包埋、冷冻切片、石蜡切片、徒手切片、常见组织化学染色、细胞器特定染色、以及常规光学显微镜操作与图像记录的扎实技能训练。任何超出上述技术范畴的生物学、生态学、分子生物学或大型仪器分析技术,请参考其他专业教材。

用户评价

评分

我一直对植物的生长发育及其分子调控机制很感兴趣,而《植物显微技术(第2版)》这本书,以一种全新的视角,将我的研究兴趣与先进的显微技术巧妙地结合在了一起。书中对活体细胞观察技术,如相差显微镜、DIC显微镜的介绍,让我了解到即使不经过复杂的固定和染色,也能观察到植物细胞的动态变化,这对于研究细胞分裂、质流运动等过程至关重要。我尤其关注书中关于荧光蛋白标记技术在植物研究中的应用,例如利用GFP标记特定的蛋白质,然后在活体植物中进行荧光显微观察,从而追踪蛋白质的亚细胞定位和运动。这简直是现代植物生物学研究的利器。书中还提到了光遗传学技术在植物研究中的一些初步应用,虽然这部分内容可能更偏向于前沿领域,但它为我们这些研究生指明了未来可能的研究方向,非常有启发性。本书的写作风格也很有特色,它并非简单地罗列技术步骤,而是通过大量的图片和图示,让抽象的技术变得生动形象。对于我这样一个视觉型学习者来说,这样的呈现方式非常有效。

评分

作为一名植物生理学的研究生,我常常需要借助显微镜来观察植物细胞和组织的形态学变化,以辅助理解生理过程。这本《植物显微技术(第2版)》无疑是一本及时雨。书中关于不同植物材料(包括藻类、苔藓、蕨类、裸子植物和被子植物)的特异性处理方法,对我来说非常有价值。比如,针对一些细胞壁较厚或组织疏松的植物,书中提供的改进型固定和渗透处理方案,大大提高了切片的成功率。我特别赞赏书中对染色方法的详细论述,从常用的苏木精-伊红染色,到针对特定细胞器或物质(如淀粉、果胶、纤维素)的特异性染色,都提供了丰富的选择和操作指南。我尝试了几种书中推荐的染色方法,发现染色效果确实比我之前自己摸索的方法要好很多,细胞结构清晰,对比度明显。此外,书中还包含了一个重要的章节,是关于显微镜的维护和故障排除。这对于我们实验室来说非常实用,很多时候我们遇到的问题都可以通过书中的提示找到原因并解决,减少了对技术人员的依赖。整本书结构严谨,逻辑清晰,内容翔实,是进行植物形态学研究不可或缺的参考书。

评分

说实话,拿到《植物显微技术(第2版)》时,我抱着一种“姑且看看”的心态,毕竟显微技术听起来就有些枯燥。然而,翻阅之后,我才发现它远不止是一本枯燥的技术手册。书中穿插的许多经典案例研究,让我看到了显微技术在揭示植物生命奥秘中的强大力量。比如,通过对植物细胞壁微观结构的观察,深入理解其功能;利用显微技术追踪植物生长发育过程中的细胞变化,揭示其调控机制。这些案例不仅增加了阅读的趣味性,更重要的是,让我深刻认识到显微技术不仅仅是“看清楚”,更是“看明白”。我尤其对书中关于细胞超微结构观察的部分印象深刻,对细胞器(如叶绿体、线粒体、内质网等)的形态、分布及其在植物生理活动中的作用有了更深入的理解。书中对电子显微镜技术(如透射电镜、扫描电镜)的介绍,虽然不涉及具体的实验操作,但其原理和应用拓展了我的视野,让我了解到即使在纳米尺度上,显微技术也能为我们提供宝贵的信息。另外,书中对数据分析和图像处理的初步介绍,也让我意识到,现代显微技术研究早已不是孤立的实验,而是与信息技术紧密结合的。这本书的价值,在于它不仅教授技术,更引领读者思考技术背后的科学意义。

评分

坦白说,我之前对植物显微技术有些畏难情绪,总觉得过程繁琐,结果难以预期。然而,《植物显微技术(第2版)》这本书的出版,彻底改变了我的看法。书中对不同类型显微图像的解读和分析方法,提供了非常有价值的指导。例如,如何通过显微图像来判断细胞损伤程度,如何利用图像分析软件来量化细胞学参数(如细胞面积、周长、形态指数等)。这让我意识到,显微技术不仅仅是获取图像,更是从图像中提取有意义的科学信息。书中还专门辟出了一个章节,讨论了在植物显微研究中可能遇到的伦理问题和生物安全问题,虽然篇幅不多,但作为一个严谨的科研工作者,我认为这是非常重要的内容,也体现了教材的全面性。我非常喜欢书中对质量控制和误差分析的强调,这有助于我们培养严谨的科学态度,避免因操作不当或试剂问题导致实验结果的偏差。总而言之,这本书为我提供了一个系统、全面的植物显微技术学习平台,让我从一个“不知所措”的学习者,变成了一个“胸有成竹”的实践者。

评分

这本《植物显微技术(第2版)》真是让我眼前一亮,作为一本面向全国高等农林院校研究生的教材,它在内容深度和广度上都做得相当出色。首先,我非常欣赏它对显微技术基本原理的梳理,从光学原理到各种显微镜(如光学显微镜、荧光显微镜、共聚焦显微镜)的构造、成像方式以及适用范围,都进行了详尽的介绍。这为我理解后续的实验操作打下了坚实的基础。更重要的是,书中对于不同植物组织(根、茎、叶、花、果实、种子等)的制备流程,如固定、漂白、脱水、包埋、切片、染色等,都有非常细致的图文讲解。我特别喜欢它对关键步骤的细节强调,比如在固定过程中如何选择合适的固定剂以最大限度地保留细胞结构,以及在切片时如何调整切片机的参数以获得理想厚度的切片。这些都是我在实际操作中常常会遇到的难题,有了这本书的指导,感觉信心大增。此外,书中还涉及了一些高级的显微技术,例如免疫荧光技术和原位杂交技术在植物研究中的应用,这些内容对于我未来的科研方向提供了宝贵的参考。整本书的语言清晰易懂,尽管涉及专业知识,但通过图解和实例,使得复杂的技术变得相对直观,非常适合我们这类初涉显微领域的研究生。

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