实用细胞培养技术

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谭玉珍 编
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出版社: 高等教育出版社
ISBN:9787040299717
版次:1
商品编码:10381444
包装:平装
开本:16开
出版时间:2010-11-01
用纸:胶版纸
页数:333
字数:520000

具体描述

编辑推荐

本教材主要针对研究生需要掌握的细胞培养技术,评价实验结果和解决实验中出现的问题,重点叙述细胞培养操作步骤、结果分析和注意事项等,并介绍常用的细胞培养相关实验技术。《实用细胞培养技术》共十二章,包括细胞培养的基本条件、细胞培养的基本原理和技术、上皮细胞的培养、结缔组织细胞的培养、肌细胞的培养、神经元和神经胶质细胞的培养、成体和胚胎干细胞的培养及其诱导分化、肿瘤细胞及肿瘤干细胞的培养、细胞系的建立、鉴定和应用、培养细胞的相关检测技术、常用细胞培养实验技术与应用。《实用细胞培养技术》内容新颖,涵盖了目前先进的细胞培养技术和方法。

内容简介

《实用细胞培养技术》共十二章,包括细胞培养的基本条件、基本原理和技术、上皮细胞、结缔组织细胞、肌细胞、神经组织细胞及其相应的组织于细胞的培养,骨髓间充质干细胞和胚胎干细胞的培养及其诱导分化,肿瘤细胞和肿瘤干细胞的培养,培养细胞的相关生物学和分子生物学检测技术,以及细胞培养技术的应用。从研究生掌握基本技术和实际应用出发,流程规范,文字简练,通俗易懂。
《实用细胞培养技术》适用于医学、生命科学、药学、预防医学等专业研究生使用,也可供从事细胞培养实验的科研工作者参考。

目录

绪论
一、细胞的发现
二、细胞培养发展简史
三、本教材使用说明
四、细胞培养技术的学习方法

第一章 细胞培养的基本条件
第一节 细胞培养实验室的建立
一、细胞培养实验室设计原则与要求
二、细胞培养实验室的布局
三、细胞培养实验室的基本设备

第二节 培养仪器和材料
一、常用仪器设备
二、培养器皿与其他材料
三、培养器皿的清洗和消毒

第三节 细胞培养用液
一、培养基
二、清洗液
三、消化液
四、培养用液的灭菌与保存

第二章 细胞培养的基本原理和技术
第一节 细胞培养的基本原理
一、细胞培养的基本概念
二、培养细胞的生物学

第二节 细胞培养的准备和基本程序
一、细胞培养前的准备
二、细胞培养的基本程序与技术

第三节 细胞活性和增殖的检测
一、细胞活性的检测
二、细胞增殖的检测

第四节 细胞的冻存、复苏和运输
一、细胞的冻存
二、细胞的复苏
三、细胞的运输

第五节 细胞培养物污染的检测和排除
一、污染因素和预防措施
二、污染的检测
三、微生物污染的排除

第六节 显微观察和流式细胞术
一、相差显微镜
二、荧光显微镜
三、激光扫描共焦显微镜
四、流式细胞仪

第三章 上皮细胞及其干细胞的培养
第一节 内皮细胞和内皮祖细胞
一、血管内皮细胞
二、微血管内皮细胞
三、淋巴管内皮细胞
四、内皮祖细胞
第二节 胃和肠的上皮细胞
第三节 呼吸道-卜皮细胞
一、气管和支气管上皮细胞
二、Ⅱ型肺泡细胞

第四节 表皮细胞和表皮干细胞
一、角质形成细胞
二、表皮干细胞
三、毛囊干细胞
第五节 乳腺上皮细胞

第四章 结缔组织细胞及其牛细胞的培养
第一节 固有结缔组织细胞
一、成纤维细胞
二、巨噬细胞
三、肥大细胞
四、脂肪细胞
五、脂肪干细胞

第二节 软骨细胞和成骨细胞
一、软骨细胞
二、成骨细胞

第三节 单核细胞和淋巴细胞
一、单核细胞
二、淋巴细胞

第四节 树突状细胞
一、外周血中的树突状细胞
二、骨髓中的树突状细胞

第五章 肌细胞及其干细胞的培养
第一节 平滑肌细胞
一、血管平滑肌细胞
二、胃肠平滑肌细胞

第二节 骨骼肌成肌细胞
一、鸟类骨骼肌成肌细胞
二、啮齿类骨骼肌成肌细胞
三、人骨骼肌细胞

第三节 心肌细胞
一、幼年和胚胎心肌细胞

第四节 心肌干细胞
一、心脏内的心肌干细胞
二、骨髓中的心肌干细胞

第六章 神经组织细胞和神经干细胞的培养
第一节 神经元
第二节 神经胶质细胞
一、星形胶质细胞
二、少突胶质细胞
三、施万细胞
第三节 神经干细胞

第七章 骨髓间充质干细胞的培养及其诱导分化
第一节 骨髓间充质-厂细胞的分离、培养与鉴定
一、贴壁培养法
二、密度梯度离心法
三、骨髓间充质干细胞的鉴定

第二节 骨髓间充质干细胞的诱导分化
一、向软骨和骨细胞的诱导分化
二、向心肌细胞和内皮细胞的诱导分化
三、向神经细胞的诱导分化

第八章 胚胎干细胞的培养及其诱导分化
第一节 小鼠胚胎干细胞的分离、培养与鉴定
一、小鼠胚胎干细胞的分离与培养
二、小鼠胚胎干细胞的鉴定

第二节 山羊胚胎干细胞的分离、培养与鉴定
一、山羊胚胎干细胞的分离与培养
二、山羊es样细胞的鉴定

第三节 人胚胎干细胞的分离、培养与鉴定
一、人胚胎干细胞的分离与培养
二、人胚胎干细胞的鉴定

第四节 胚胎干细胞的诱导分化
一、胚胎干细胞诱导分化的基本策略及理论实践
二、胚胎干细胞向肝细胞的诱导分化
三、胚胎干细胞向神经前体细胞和终末细胞的诱导分化
四、胚胎干细胞向造血细胞的诱导分化
五、胚胎干细胞向其他类型细胞的诱导分化

第五节 胚胎干细胞系的建立与应用
一、胚胎干细胞系的建立
二、胚胎干细胞系的应用
三、胚胎干细胞研究与应用中存在的主要问题

第九章 肿瘤细胞和肿瘤干细胞的培养
第一节 实体肿瘤
一、肝癌细胞
二、胃癌细胞
三、肺癌细胞
四、乳腺癌细胞
五、卵巢癌细胞
第二节 血液肿瘤
第三节 肿瘤干细胞
一、肿瘤干细胞的分离和纯化
二、肿瘤干细胞的鉴定

第四节 肿瘤细胞系的鉴定
一、肿瘤细胞系的共同特征
二、人肿瘤细胞系的个别特性
三、细胞系污染的鉴定

第十章 培养细胞的相关生物学检测技术
第一节 细胞衰老与凋亡的检测
一、细胞衰老的检测
二、细胞凋亡的检测
第二节 细胞周期分析方法
第三节 细胞同步化方法
一、振荡分离法
二、低温培养法
三、血清饥饿法
四、两次阻滞法
五、细胞同步化检测

第四节 细胞迁移实验
一、细胞刮除法
三、细胞培养池法

第十一章 培养细胞的遗传学与分子生物学检测
第一节 培养细胞的遗传学检测
一、基因突变检测
二、染色体畸变分析
三、微核检测

第二节 培养细胞的分子生物学检测
一、培养细胞的dna检测
二、培养细胞的rna检测
三、培养细胞的蛋白质检测
四、分子生物学检测新技术介绍

第十二章 细胞培养技术的应用
第一节 体外细胞培养模型的建立与应用
一、细胞共培养模型的建立与应用
二、细胞外基质凝胶模型的建立与应用
三、生物材料的组织工程技术与应用

第二节 杂交瘤单克隆抗体技术
一、抗原的准备和动物免疫
二、杂交瘤制备
三、杂交瘤细胞株筛选
四、杂交瘤细胞株的亚克隆

第三节 培养细胞的基因导人技术
一、基因导入的基本原理
二、基因组功能研究中的基因导入
三、转基因动物中的基因导入
四、基因治疗中的基因导入
五、基因导入在其他领域中的应用

第四节 培养细胞的核移植技术及其应用
一、核移植技术的原理与方法
二、核移植技术的实际应用
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彩图
细胞与分子生物学前沿技术:从基础到应用 图书简介 本书深入探讨了现代生命科学研究中一系列至关重要的技术和方法,旨在为生物学、医学、药学等相关领域的科研人员、研究生及高级本科生提供一本全面、详实且具有实践指导意义的参考手册。我们聚焦于那些推动当代生物医学研究取得突破性进展的核心技术平台,而非传统细胞培养的常规操作细节。 第一部分:基因组学与高通量测序技术(Genomics and High-Throughput Sequencing) 本部分详细阐述了新一代测序(NGS)技术从样本制备到数据分析的全流程。 第一章:宏基因组学与单细胞测序技术 我们首先介绍宏基因组学(Metagenomics)的原理及其在复杂微生物群落结构解析中的应用。内容涵盖DNA提取优化策略,特别是针对低丰度或难提取样本的改进方法,如酶裂解与物理破碎的联合应用。随后,本书将核心篇幅置于单细胞测序(Single-Cell Sequencing, SCS)技术上。详细对比了微流控技术(如Droplet-based scRNA-seq)与基于孔板(Well-based)技术在效率、成本和分辨率上的差异。特别剖析了10x Genomics、BD Rhapsody等主流平台的文库构建流程,包括细胞捕获、裂解、逆转录和扩增的生化细节。在数据分析层面,本书侧重于降维算法(如t-SNE, UMAP)的应用,细胞聚类(Clustering)的生物学意义解读,以及细胞类型注释中基于参考基因组和可变基因(如SVs, CNVs)的整合分析方法。 第二章:长读长测序与表观遗传组学整合 本章聚焦于PacBio HiFi和Oxford Nanopore Technologies (ONT) 的技术优势及其在解决基因组组装难题中的作用。我们将深入探讨如何利用长读长信息解析复杂结构变异(SVs)和重复序列区域的精准测序。此外,长读长技术在直接检测DNA甲基化、RNA修饰(如m6A)方面的独特潜力被详细论述。表观遗传部分不仅涵盖ChIP-seq与ATAC-seq的标准流程,更引入了单分子荧光光谱技术在染色质可及性动态研究中的前沿应用,强调如何设计实验以区分活性增强子与沉默的异染色质区域。 第二部分:蛋白质组学与生物物理学分析(Proteomics and Biophysical Analysis) 本部分将读者的焦点从核酸转移到功能分子——蛋白质,重点介绍定量分析和空间定位技术。 第三章:定量蛋白质组学与修饰组学(PQC & PTMods) 本书系统性地介绍了TMT/iTRAQ等标记技术在复杂样本(如临床前/后样本)中的应用策略,包括多维色谱分离(如HILIC, 逆相)与高分辨质谱(Orbitrap Fusion Lumos等)的联用。对数据依赖采集(DDA)和数据非依赖采集(DIA)模式的优缺点进行了深入对比分析,并重点讲解了Spectra Library构建在DIA数据处理中的关键作用。在蛋白质修饰(PTMs)方面,本书详细描述了磷酸化、泛素化、糖基化肽段的富集策略(如金属螯合亲和层析、抗体捕获),以及如何通过多级质谱碎片信息对修饰位点进行精准鉴定和定量。 第四章:先进成像与分子相互作用分析 本章探讨了探究分子动态和相互作用的先进技术。超分辨率显微镜(如STED, STORM)的原理及其在揭示细胞器内蛋白质聚集体或纳米尺度结构中的应用被详尽阐述。对于蛋白质-蛋白质相互作用(PPIs)的分析,本书不仅涵盖酵母双杂交(Y2H)的优化,更侧重于体内(in vivo)技术的进步,如Proximity Ligation Assay (PLA) 和 BioID/APEX2 介导的近距离标记技术。特别强调了表面等离子体共振(SPR)和生物层干涉仪(BLI)在测定分子间结合动力学常数($k_{on}$, $k_{off}$, $K_D$)时的技术要点、仪器校准与数据拟合模型选择。 第三部分:合成生物学与基因编辑高级策略(Synthetic Biology and Advanced Genome Editing) 本部分聚焦于对生命系统进行精确重构和调控的前沿技术。 第五章:CRISPR/Cas系统的高级迭代与递送 本书详细分析了CRISPR-Cas9系统的局限性,并系统介绍了其衍生工具,包括碱基编辑器(Base Editors, BEs)和先导编辑器(Prime Editors, PEs)的分子机制、脱靶效应控制以及在非模式生物中的适用性。对于递送(Delivery)策略,本书侧重于非病毒载体,如脂质纳米粒(LNP)的制备与优化,及其在递送sgRNA/mRNA进入特定细胞亚群中的效率提升方法。此外,还讨论了CRISPRi/a系统在基因功能筛选中的应用及其局限性。 第六章:功能性核酸和细胞重编程 本章探讨了人工合成核酸在治疗和研究中的应用。mRNA疫苗设计中的关键要素(如加帽技术、密码子优化、LNP包封)被作为案例分析。对于细胞重编程领域,本书集中于如何利用特定转录因子组合(如Yamanaka因子)诱导间充质干细胞向神经元或心肌细胞的定向分化,重点分析了转录因子表达的瞬时性控制策略,以及如何通过代谢重塑辅助实现高效重编程。 第四部分:生物信息学与数据整合分析(Bioinformatics and Data Integration) 本部分强调数据解释能力的培养,这是处理高通量实验结果的核心。 第七章:多组学数据整合与系统生物学建模 本书不侧重于基础编程教学,而是聚焦于如何整合来自基因组、转录组、蛋白质组和代谢组的数据集。详细介绍了Causal Inference Models(因果推断模型)在生物系统中的应用,用以区分相关性与因果关系。讨论了基于网络分析(Network Analysis)的生物标志物发现策略,包括WGCNA(加权基因共表达网络分析)的应用场景与结果验证流程。最后,探讨了如何利用机器学习(ML)和深度学习(DL)框架(如Autoencoders, GNNs)来预测药物响应性及疾病进展模型,强调数据标准化与批次效应(Batch Effect)的校正。 本书结构严谨,内容前沿,是生命科学领域追求技术深度和系统性理解的专业读者的理想选择。

用户评价

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在我的生物学学习过程中,细胞培养一直是一个既重要又充满挑战的领域。我最近接触到一本名为《实用细胞培养技术》的书,据说是行业内的经典之作。我了解到的信息显示,这本书不仅仅是一本操作指南,更是一本深入探讨细胞培养背后科学原理的著作。它可能会详细解释为什么某些培养基成分对细胞生长至关重要,为什么无菌操作是培养成功的关键,以及不同细胞类型对环境因素的独特需求。我尤其期待书中关于如何优化培养条件,以提高细胞的生长速率、活力和功能的研究。此外,书中可能还会涉及如何对培养的细胞进行质量评估,比如通过细胞计数、活性检测、形态学观察等手段,确保细胞的健康和实验结果的可靠性。对于那些想要深入理解细胞培养科学的读者,我相信这本书一定会提供宝贵的见解和指导。我希望通过这本书,能够不仅掌握操作技巧,更能理解背后的科学逻辑,从而更自信地开展细胞培养相关的实验。

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最近我对生物医药领域的研究产生了浓厚的兴趣,尤其是在干细胞和基因治疗方面。我一直认为,细胞培养是这些前沿研究不可或缺的基础技术。我在网上看到一本备受好评的书籍——《实用细胞培养技术》,不少资深研究者都在推荐。这本书据说详细阐述了从体外培养各种类型细胞的原理、方法,到应对不同培养挑战的策略。我了解到,它不仅仅是一本技术手册,更深入地探讨了细胞培养过程中的生物学机制,以及如何优化培养条件以获得高质量的细胞。书中对不同培养基的成分、作用以及选择的考量,还有无菌操作的细节和为何如此重要的解释,都写得非常透彻。我特别关注书中关于细胞传代、计数、冻存和复苏的技术细节,这些都是保证实验连续性和数据可靠性的关键。书中还可能涵盖了细胞成像、流式细胞术等与细胞培养密切相关的下游应用技术,这将为我提供更全面的视角。我希望能通过阅读这本书,系统地掌握细胞培养的理论知识和实践技巧,为我未来在生物医药领域的研究打下坚实的基础,甚至为我将来独立开展相关实验项目提供有力的支持。

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作为一个刚开始涉足科研领域的新手,我对于各种实验技术都充满了好奇和渴望。最近听说有一本名为《实用细胞培养技术》的书,朋友们都强烈推荐,说这本书内容非常扎实,理论与实践结合得很好,是实验室必备的工具书。我特地去书店翻阅了一下,虽然还没来得及深入阅读,但从目录和一些章节的试读来看,这本书的编排结构非常合理,从最基础的细胞培养原理、无菌操作,到各种特殊细胞的培养方法,再到细胞的鉴定、传代、冻存等关键环节,都有详尽的介绍。特别是书中对实验过程中可能遇到的各种问题,如污染、细胞生长不良等,都给出了详细的分析和解决方案,这对于我这样缺乏经验的新手来说,简直是雪中送炭。我尤其对其中关于细胞株的选择和建立的部分感到兴趣,这对于我的研究项目至关重要。这本书的语言风格也很平实易懂,没有过于晦涩的专业术语,即便是我这样的初学者也能轻松理解。我已经迫不及待地想把它带回家,认真研读,相信这本书一定会成为我科研道路上的得力助手,帮助我快速掌握细胞培养的核心技能,为我的研究打下坚实的基础。

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作为一名经验丰富的实验室技术员,我深知掌握精湛的细胞培养技术对于科研项目的成功至关重要。我近期了解到一本名为《实用细胞培养技术》的书籍,据同行介绍,这本书在业内有着极高的声誉,是许多实验室的必备参考。我虽然已经从业多年,但总觉得在某些细节的把握上还有提升的空间,比如对于一些特殊细胞系,如原代细胞或干细胞的培养,其优化和维持一直是我关注的重点。这本书据说涵盖了从基础的细胞生物学原理,到各种类型细胞的培养流程,包括不同培养基的选择、添加物的优化,以及如何应对细胞污染、生长缓慢等常见问题。我尤其期待书中关于细胞鉴定、质量控制以及实验记录的详细指导,这些都是保证实验结果准确性和可重复性的基石。同时,我也对书中可能包含的细胞工程、基因转染等高级技术的介绍抱有很大期望,希望能从中汲取新的灵感,提升自己的技术水平。总之,我认为这本书将是我在专业技能上更上一层楼的重要资源。

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最近我一直在寻找一本能够系统讲解细胞培养技术的书籍,希望能帮助我更好地理解和掌握这一核心技能。在朋友的推荐下,我了解到了一本名为《实用细胞培养技术》的书。这本书的介绍让我非常心动,因为它声称能够涵盖细胞培养的方方面面,从最基础的无菌操作到各种特殊细胞的培养,再到细胞的鉴定和冻存。我了解到,书中对细胞培养的每一个步骤都进行了详细的阐述,并且配有大量的图表和案例分析,这对于我这样的初学者来说,无疑是非常有帮助的。我特别关注书中关于培养基的选择和配制的章节,因为这直接影响到细胞的生长和状态。同时,我也对书中关于如何避免和处理细胞培养过程中出现的问题,如污染、细胞活力下降等内容非常感兴趣。我希望通过阅读这本书,能够建立起一套完整而规范的细胞培养操作流程,并且能够灵活运用这些技术来解决实际问题,为我的科研工作打下坚实的基础。

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内容上:1书为研究生用书,起点有点高,内容以实验为主;2书章节中会附一些插图(后面附有一些彩图);3书里每章末了会附上实验的一些注意事项,个人认为这点很有用

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书本身的印刷很不错,挺清楚的;

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内容全面,实用,是研究生教材。

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书本身内容一般,较司徒那本有差距感觉

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作为工具书使用,学习一下。

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比较实用 适合专门做细胞的同学

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书很好,要是纸张能够再好一点就完美了~

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刚开始看,希望能有点帮助

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三、激光扫描共焦显微镜 一、贴壁培养法P 第二节 一、成纤维细胞 第四节 一、人胚胎干细胞的分离与j培养 第e四节 第一章 第一节 a四、杂交瘤细胞株的亚克隆 肿x瘤细胞系的鉴定 二、污染的检测o 第三节 一、肝癌细胞 R三、Y细胞的运t输 第二节 三、杂i交瘤细胞株筛选 肿瘤细胞系的鉴定 三、向神经细胞的诱导分化 二、细胞培养实验M室的布g局 第n四章u 二、细胞凋亡的检测 二、人肿瘤细胞系的个别特性 二、核移植技术的实际应用

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