PCR理論與技術(第三版) pdf epub mobi txt 電子書 下載 2025

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王廷華，劉佳，夏慶傑 著

圖書標籤:

• PCR
• 分子生物學
• 生物技術
• 基因擴增
• 聚閤酶鏈式反應
• DNA
• 實驗技術
• 生物化學
• 醫學分子生物學
• 遺傳學

店鋪： 蛋蛋圖書專營店

齣版社： 科學齣版社

ISBN：9787030379344

商品編碼：27463944375

包裝：平裝

齣版時間：2016-02-01

基本信息

書名：PCR理論與技術(第三版)

定價：48.0元

作者：王廷華,劉佳,夏慶傑

齣版社：科學齣版社

齣版日期：2016-02-01

ISBN：9787030379344

字數：286000

頁碼：

版次：31

裝幀：平裝

開本：16

商品重量：0.4kg

編輯推薦

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導語_點評_推薦詞

內容提要

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目錄

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作者介紹

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文摘

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序言

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序言

現代生物技術前沿探索：基因組編輯與單細胞分析的實踐指南 圖書名稱：《現代生物技術前沿探索：基因組編輯與單細胞分析的實踐指南》 字數：約1500字 --- 內容簡介 本書聚焦於當前生命科學研究領域最具革命性和應用價值的兩大技術支柱：基因組編輯技術（特彆是CRISPR/Cas係統的高級應用）與單細胞多組學分析技術。本書旨在為生命科學、生物醫學工程、分子生物學、生物信息學等相關專業的本科高年級學生、研究生以及一綫科研人員，提供一套兼具理論深度與前沿實踐指導的綜閤性參考資料。 我們深知，隨著高通量測序、自動化操作和計算能力的飛速發展，生物學研究範式已從宏觀群體水平分析徹底轉嚮微觀、精準的個體細胞或基因組層麵的解析。本書摒棄對基礎分子生物學概念的冗長敘述，而是直接切入現代生物技術的核心挑戰、最新進展及其具體操作流程。 第一部分：CRISPR係統的深度進階與精確操控 本部分深入探討瞭CRISPR/Cas係統，特彆是CRISPR-Cas9、Cas12a、Cas13等平颱的最新發展，重點強調如何實現更高級、更精準的基因組編輯，以應對復雜的生物學問題。 第一章：CRISPR係統的進化與酶的拓撲結構優化 本章首先概述瞭CRISPR/Cas係統的發現曆程，隨後詳細解析瞭Cas9、Cas12等關鍵核酸酶的結構域功能。重點討論瞭通過蛋白質工程改造的“高保真（High-Fidelity, HF）”Cas9變體，它們如何顯著降低脫靶效應，這對於臨床轉化至關重要。此外，還介紹瞭Cas12a（Cpf1）在處理DNA末端和gRNA設計上的獨特優勢。 第二章：基因編輯的精準化：堿基編輯與先導編輯（Prime Editing） 這是對傳統雙鏈斷裂（DSB）編輯模式的重大超越。本章將詳細闡述堿基編輯器（Base Editors, BEs）的工作原理，包括胞嘧啶堿基編輯器（CBEs）和腺嘌呤堿基編輯器（ABEs）的化學催化機製，以及如何精確地將單個堿基替換為目標堿基，避免插入/缺失（Indel）的産生。隨後，深入剖析瞭先導編輯（Prime Editing, PE）技術。PE如何通過逆轉錄酶與修飾的sgRNA（pegRNA）相結閤，實現無需供體DNA模闆的精確“查找和替換”操作，包括對點突變、小片段插入或刪除的編輯策略。本章提供瞭針對PE係統設計pegRNA的計算工具推薦與實用技巧。 第三章：錶觀遺傳學調控與CRISPR的非切割應用 本部分拓展瞭CRISPR的應用邊界，不再局限於基因組的永久性修飾。我們詳細介紹瞭CRISPRi（乾擾）和CRISPRa（激活）係統的構建，利用失活的Cas9（dCas9）作為載體，通過融閤轉錄抑製結構域（如KRAB）或轉錄激活結構域（如VP64、p65-HSF1）來調控內源基因的錶達水平，實現對基因功能研究的動態控製。此外，還討論瞭使用dCas9作為“DNA追蹤器”或用於靶嚮染色質免疫沉澱（ChIP-seq）的增強方法。 第四章：體內（In Vivo）遞送策略與臨床轉化挑戰 基因編輯技術的瓶頸在於高效、安全的遞送。本章係統對比瞭目前主流的遞送載體：病毒載體（AAV、慢病毒）和非病毒載體（脂質納米顆粒LNP、電穿孔）。重點分析瞭AAV血清型的組織靶嚮性，以及LNP在mRNA或sgRNA遞送中的優化策略。同時，對當前CRISPR療法麵臨的免疫原性、脫靶效應的體內監測和長期安全性評估進行瞭深入探討。 第二部分：單細胞多組學分析：從高通量到高維度解析 本部分聚焦於解析生物係統中異質性的核心技術——單細胞技術。內容側重於技術原理、數據獲取流程以及復雜高維數據的生物信息學處理方法。 第五章：單細胞測序技術的平颱比較與文庫製備 本章詳細比較瞭當前主流的單細胞測序技術平颱：基於液滴微流控（如10x Genomics Chromium）和基於微孔闆（如Drop-seq、Seq-Well）。重點解析瞭這些技術如何實現對數百萬細胞的文庫捕獲，並討論瞭它們各自在捕獲效率、背景噪音和細胞活性保持方麵的優缺點。此外，還覆蓋瞭單細胞轉錄組（scRNA-seq）的文庫構建流程、質量控製指標（如UMI計數、基因數）的判定標準。 第六章：單細胞多組學整閤：跨模態數據的深度融閤 現代生物學不僅需要瞭解“哪些基因在錶達”，還需要同步瞭解“哪些蛋白質存在”或“哪些基因組區域被重塑”。本章專門處理多組學數據的整閤挑戰。詳細介紹瞭可同時捕獲同一細胞內轉錄組與錶觀遺傳信息（如scATAC-seq/scRNA-seq聯閤分析）的技術原理。重點講解瞭用於整閤異構數據集的生物信息學算法，例如基於LIGER、Seurat V4/V5中多模態集成（Multi-modal Integration）模塊的實踐操作，以識彆不同組學數據間的生物學關聯。 第七章：空間轉錄組學：解碼細胞的組織上下文 細胞的空間位置決定瞭其功能。本章介紹瞭空間轉錄組學（Spatial Transcriptomics）技術的最新突破，包括基於就位捕獲（如Visium）和基於分子條形碼的空間分辨技術。重點講解瞭如何使用這些技術重建組織內的基因錶達圖譜，並介紹瞭用於空間數據可視化的軟件工具，例如如何將基因錶達數據映射迴組織切片圖像上，實現對細胞微環境的精確描繪。 第八章：單細胞數據分析的高級模型與機器學習應用 單細胞數據是典型的稀疏、高維數據，對傳統統計方法構成挑戰。本章側重於高級分析方法： 1. 細胞軌跡推斷（Trajectory Inference）： 運用如Monocle、PAGA等算法，重建細胞分化、發育或疾病進展的連續過程，識彆關鍵決策點（Branch Points）。 2. 細胞類型注釋的自動化： 介紹使用深度學習模型（如scVI、scANVI）對大規模數據集進行去噪、批次效應校正和細胞類型注釋的先進策略。 3. 細胞通訊網絡預測： 基於配體-受體相互作用數據庫，利用CellChat、NicheNet等工具，從單細胞數據中推斷細胞間的相互作用強度和功能。 總結與展望 本書並非基礎實驗手冊，而是為希望掌握下一代生物技術核心工具的科研工作者量身打造的進階指南。它強調技術背後的生物學邏輯、算法的有效性以及跨平颱數據整閤的能力，確保讀者能夠站在當前生命科學研究的最前沿，有效解決基因功能解析、疾病機理探索以及新型療法開發中的復雜問題。讀者在掌握本書內容後，將能獨立設計和執行前沿的基因編輯實驗，並高效處理和解讀復雜的單細胞多組學數據。

評分☆☆☆☆☆

我閱讀瞭這本書關於分子剋隆技術應用的章節，它對不同載體類型在特定實驗目的下的選擇邏輯進行瞭詳盡的剖析，這種細緻程度遠超我之前接觸過的其他參考資料。作者並沒有停留在對基礎操作步驟的羅列，而是深入挖掘瞭每一步驟背後的生化原理和潛在的效率影響因素。例如，在討論限製性內切酶的選擇時，書中不僅列舉瞭常用的酶種，還用大量的篇幅對比瞭其在不同緩衝液體係中的活性差異，並提供瞭實戰中應對“酶切不完全”或“載體自身連接”問題的應急預案。特彆是其中關於高保真DNA聚閤酶熱啓動機製的論述，結閤瞭最新的酶結構功能研究成果，使得理論的深度達到瞭一個新的層次，這對於希望優化實驗流程、追求更高成功率的研究生來說，無疑是一份寶貴的財富。

評分☆☆☆☆☆

關於數據分析與結果解讀的部分，這本書展現齣瞭超越傳統教科書的實用主義傾嚮。它沒有將重點放在繁瑣的數學推導上，而是集中火力於如何將PCR産物轉化為具有生物學意義的信息。例如，對實時熒光定量PCR（qPCR）數據分析的介紹，不僅詳述瞭Ct值的意義，更詳細對比瞭ΔΔCt法與標準麯綫法在不同樣本集中的適用性邊界和誤差來源。書中提供的幾個經典案例分析，都是從原始的譜圖數據齣發，一步步推導齣實驗結論，其中對背景噪音的過濾和基綫校正的討論，體現瞭作者豐富的實際操作經驗。這種“從數據到結論”的實戰導嚮，對於正處於數據分析瓶頸期的科研人員來說，具有極高的參考價值。

評分☆☆☆☆☆

這本書在對新興技術和應用領域的覆蓋上，顯示齣緊跟時代前沿的魄力。關於下一代測序（NGS）文庫製備中，基於特定標簽的擴增策略的介紹，詳盡闡述瞭如何利用具有特定接頭序列的引物進行高效的靶嚮富集。此外，書中對於一些高難度應用，如單細胞PCR（scPCR）的微流控技術結閤方案也進行瞭簡要而精煉的概述，雖然篇幅不多，但勾勒齣瞭未來發展的方嚮。這種廣度與深度的平衡拿捏得非常到位，它既能滿足需要紮實掌握傳統技術的實驗室人員，也為那些渴望瞭解行業最新動態、探索新技術平颱的研究人員提供瞭一個可靠的參照框架，體現瞭編著者對整個領域生態的深刻洞察。

評分☆☆☆☆☆

這本書的章節邏輯安排，簡直像是為初學者量身定製的導航圖。它從最基礎的DNA結構和酶促反應的宏觀概念入手，循序漸進地引入到PCR反應體係的每一個關鍵要素——引物設計、模闆的質量控製、循環參數的優化等。每一個概念的引入都伴隨著清晰的圖示和流程圖，極大地降低瞭理解門檻。我特彆欣賞它在討論“假陽性”和“假陰性”問題時的處理方式，它沒有簡單地歸納原因，而是通過構建一係列相互關聯的故障樹分析（Fault Tree Analysis）模型，引導讀者像偵探一樣去係統地排查問題根源。這種由淺入深、邏輯嚴密的敘事風格，讓原本枯燥的理論學習過程變得更加引人入勝，讓人願意主動去探索下一個知識點。

評分☆☆☆☆☆

這本書的裝幀設計著實令人眼前一亮，厚實的封麵材質握在手中就有一種沉甸甸的質感，仿佛預示著其中內容的深度與廣度。內頁的紙張選用也十分考究，觸感光滑細膩，油墨印刷清晰銳利，即便是長時間閱讀也不會感到視覺疲勞。整體的排版布局非常閤理，文字段落之間的留白恰到好處，使得復雜的專業術語和公式推導在視覺上得以舒緩，易於讀者的眼睛進行捕捉和消化。封麵上的那枚抽象的分子結構圖案，設計感十足，簡約而不失專業性，與書名“PCR理論與技術”的主題完美契閤，讓人在拿起書本的第一時間就能感受到這是一本經過精心打磨的、注重用戶體驗的專業著作。光是翻閱這個過程，就足以讓人感受到齣版方在書籍製作上的匠心獨運，這在許多同類專業教材中是難得一見的用心。