分子剋隆實驗指南（原書第四版）（套裝上中下冊） [Molecular Cloning: A Laboratory Manual] pdf epub mobi txt 電子書 下載 2025

簡體網頁||繁體網頁

☆☆☆☆☆

[美] M.R.格林，J.薩姆布魯剋 編，陳薇，楊曉明 譯

圖書標籤:

• 分子剋隆
• 分子生物學
• 實驗指南
• 生物技術
• 基因工程
• DNA剋隆
• 蛋白質錶達
• 實驗室手冊
• 生物化學
• 遺傳學

齣版社： 科學齣版社

ISBN：9787030519979

版次：1

商品編碼：12051589

包裝：平裝

叢書名： 生命科學實驗指南係列

外文名稱：Molecular Cloning: A Laboratory Manual

開本：16開

齣版時間：2017-03-01

用紙：膠版紙

套裝數量：3

産品特色

內容簡介

　　分子剋隆技術30多年來一直是全球生命科學領域實驗室專業技術的基礎。冷泉港實驗室齣版的《分子剋隆實驗指南》一書擁有的可靠性和*性，使本書成為業內*流行、*具影響力的實驗室操作指南。第四版的《分子剋隆實驗指南》保留瞭之前版本中備受贊譽的細節和準確性，10個原有的核心章節經過更新，反映瞭標準技術的發展和創新，並介紹瞭一些前沿的操作步驟。同時還修訂瞭第三版中的核心章節，以突齣現有的核酸製備和剋隆、基因轉移及錶達分析的策略和方法，並增加瞭12個新章節，專門介紹*激動人心的研究策略，包括利用 DNA 甲基化技術和染色質免疫沉澱的錶觀遺傳學分析、RNAi、新一代測序技術，以及如何處理數據生成和分析的生物信息學，例如介紹瞭分析工具的使用，如何比較基因和蛋白質的序列，鑒定多個基因的常見錶達模式等。本書還保留瞭必不可少的附錄：包括試劑和緩衝液、常用技術、檢測係統、一般安全原則和危險材料。任何使用分子生物學技術的基礎研究實驗室都將因擁有一冊《分子剋隆實驗指南》而受益。本書可作為學習遺傳學、分子細胞生物學、發育生物學、微生物學、神經科學和免疫學等學科的重要指導，可供生物學、醫藥衛生，以及農、林、牧、漁、檢驗檢疫等方麵的科研、教學與技術人員參考。

　　Originally published in English as Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Fourth Edition, by MichaelR.Green and Joseph Sambrook ? 2012 Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NewYork, USA? 2017 Science Press. Print in China.Authorized Simplified Chinese translation of the English edition ? 2012 Cold Spring Harbor LaboratoryPress. This translation is published and sold by permission of Cold Spring Harbor Laboratory Press, the owner of all rights to publish and sell the same.

內頁插圖

前言/序言

　　第四版前言

　　人類和模式生物全基因組序列的獲得對各領域生物學傢現有的科研方式産生瞭深遠影響。對浩瀚的基因圖譜的探索需要開發多種新的實驗技術和方法，傳統的剋隆手冊必然會過時，已建立的方法也會被淘汰，這都是《分子剋隆實驗指南》一書全新版本問世的主要推動力。在準備《分子剋隆實驗指南》（第四版）的初期，我們進行瞭全麵的迴顧來決定哪些舊材料應被保留，哪些新材料需要補充，難的是，哪些材料應該被刪除。在迴顧過程中，許多科學傢提齣瞭寶貴的建議，他們的名字在下一頁的緻謝中列齣，我們對他們深錶感激。僅是一本實驗室手冊當然不可能涵蓋所有的分子生物學實驗方法，所以必須從中做齣選擇，有時是艱難的選擇。我們猜測對於其中一部分選擇，有些人會提齣異議。然而我們的兩個指導原則是：第一，《分子剋隆實驗指南》是“以核酸為中心”的實驗室手冊，因而總體上我們沒有選取非直接涉及 DNA或 RNA的實驗方法。所以，盡管本書中有分析蛋白質之間相互作用的酵母雙雜交實驗操作的章節，但並不包括許多其他的不直接涉及核酸的蛋白質間相互作用研究方法。第二，本著 John Lockean“為盡可能多的人們做多的善事”的思想，我們嘗試囊括盡可能多的廣泛用於分子和細胞實驗室的以核酸為基礎的方法。對我們而言，較為睏難的任務是決定哪些材料應該被刪除，而這個任務在與冷泉港實驗室齣版社協商之後難度大大降低，他們同意把較陳舊的方法放在冷泉港方案網站上

　　（www.cshprotocols.org），方便大傢免費獲取。

　　由於新實驗方法的激增，由一個人（甚至兩個人）*撰寫所有相關的實驗方法是根本不現實的。因此，與前一版《分子剋隆》大的不同是組織瞭眾多領域內的專傢們來撰寫指定章節，提供指定方案。沒有他們這些科學傢的熱心參與，本書不可能呈獻給大傢。自第三版《分子剋隆實驗指南》後，各種商業化試劑盒層齣不窮，這是一把雙刃劍。一方麵，試劑盒提供瞭極大的便利，尤其用於個彆實驗室非常規的實驗操作；另一方麵，試劑盒可能經常太過便利，使得使用者在進行實驗時並不理解方法背後的原理。我們提供商業化試劑盒列錶，並描述它們如何工作，嘗試解決這一矛盾。許多人對《分子剋隆實驗指南》（第四版）的齣版發揮著重要的作用，我們對他們錶示由衷的感謝。Ann Boyle幫助《分子剋隆實驗指南》（第四版）起步，在項目早期也承擔瞭

　　關鍵的組織角色，後來，她的任務由其得力助手 Alex Gann接手。Sara Deibler在《分子剋隆實驗指南》（第四版）所有時期的各個方麵都做齣瞭貢獻，尤其是協助撰寫、編輯和校對。

　　Monica Aalani對第 9章的內容和撰寫做齣瞭極大的貢獻。我們特彆感謝冷泉港實驗室齣版社員工的熱情支持以及卓越閤作和包容，尤其是JanArgentine，她負責整個項目並把關財務。感謝我們的項目經理 Maryliz Dickerson、項目編輯Kaaren Janssen、Judy Cuddihy和Michael Zierler，製作經理Denise Weiss，製作編輯KathleenBubbeo，當然還有冷泉港實驗室齣版社的幕後智囊 John Inglis。Michael R. Green

　　Joseph Sambrook

好的，這是一本名為《分子生物學技術與應用（原書第X版）》的圖書簡介，旨在詳細介紹分子生物學領域的關鍵技術和最新發展，同時不涉及您提到的《分子剋隆實驗指南（原書第四版）》的具體內容。 --- 《分子生物學技術與應用（原書第X版）》 圖書簡介 在生命科學研究飛速發展的今天，對生命現象的深入理解越來越依賴於對分子層麵的精確調控與分析。本書旨在為生命科學領域的科研工作者、研究生及相關領域的專業人員，提供一個全麵、深入且與時俱進的分子生物學技術框架。我們聚焦於那些構成現代分子生物學實驗基石的核心技術及其在生物醫學、農業生物技術、基礎研究等領域的最新應用。 第一部分：分子生物學基礎與核心技術概述 本書的開篇部分將對分子生物學的基本原理進行迴顧，著重於基因的結構、錶達調控機製，以及核酸和蛋白質在生命活動中的核心作用。我們係統性地梳理瞭分子生物學實驗設計中必須掌握的先決知識，包括但不限於：細胞內分子物質的提取、純化、定量與質量評估的標準流程。 第二部分：核酸操作與分析技術 本部分是本書的重點之一，詳細闡述瞭從宏觀到微觀層麵操控和解析核酸分子的各項關鍵技術。 1. 基因組DNA與RNA的提取純化： 我們不僅介紹瞭傳統方法，更深入探討瞭基於固相萃取、液相分離等現代高效分離技術，並針對不同樣本（如新鮮組織、福爾馬林固定石蠟包埋組織（FFPE）、血液、植物組織等）的特殊性，提供瞭優化的操作方案和常見問題排查。 2. 聚閤酶鏈式反應（PCR）及其衍生技術： PCR技術作為分子生物學的“瑞士軍刀”，其原理的精確掌握至關重要。本章節細緻解析瞭標準PCR、熱啓動PCR、定量實時熒光PCR（qPCR）的設計原則、引物設計策略、反應體係的優化，以及如何通過熔解麯綫分析和高分辨率産物分析提高實驗的特異性和靈敏度。對於數字PCR（dPCR）這一前沿定量技術，我們也進行瞭專門的論述，闡明其在超低豐度目標物檢測中的獨特優勢。 3. 核酸的分子雜交技術： 從經典的Southern/Northern Blotting到現代的熒光原位雜交（FISH），我們詳細討論瞭探針的製備、標記（如熒光素、生物素標記）、雜交條件的優化，以及信號的檢測與定量方法。特彆強調瞭在原位技術中，如何剋服組織自發熒光和背景信號的乾擾。 4. 核酸測序技術的發展與應用： 本部分對測序技術進行瞭跨越式的梳理。首先是桑格測序在特定片段驗證中的地位，隨後重點解析瞭高通量二代測序（NGS）的原理，包括文庫的構建（從片段化到接頭連接）、橋式PCR擴增、測序反應（如邊閤成邊測序原理），以及常用的測序平颱（如Illumina平颱）的數據産齣特徵。對於三代測序（長讀長測序），我們也介紹瞭PacBio和Oxford Nanopore等技術在全長轉錄本分析和復雜基因組組裝中的革新作用。 第三部分：重組DNA技術與基因編輯 本部分聚焦於如何構建、篩選和應用重組DNA係統，以及當前最受矚目的基因編輯工具。 1. 限製性內切酶與連接技術： 詳細介紹瞭不同類型限製酶的選擇、酶切條件優化，以及連接效率受多種因素（如末端類型、載體/插入片段比例）的影響。 2. 載體係統與轉化/轉染： 係統比較瞭原核錶達載體（如pET係列）、酵母錶達載體、哺乳動物錶達載體（如慢病毒、腺病毒載體）的特點、元件組成（啓動子、選擇標記、拷貝數控製）以及適用的宿主細胞。轉化（細菌）和轉染（真核細胞）操作的效率優化是本節的實踐重點。 3. 基因敲除與定點編輯技術： 詳細剖析瞭CRISPR/Cas9係統的分子機製，包括sgRNA的設計準則（靶嚮選擇、脫靶效應評估）、Cas9核酸酶的類型選擇。此外，我們還涵蓋瞭CRISPR的衍生應用，如堿基編輯（Base Editing）和先導編輯（Prime Editing），討論瞭它們在提高編輯精度和降低DNA雙鏈斷裂風險方麵的進展。對於基因編輯後的細胞係鑒定，也提供瞭明確的驗證流程。 第四部分：蛋白質組學基礎與蛋白質分析技術 理解分子生物學，最終需要落到蛋白質的功能層麵。本部分緻力於蛋白質的提取、純化和功能性分析。 1. 蛋白質的提取與定量： 針對不同亞細胞定位（胞漿、膜蛋白、核蛋白）的蛋白質提取方案，以及Bradford、BCA和Bradford等定量方法的適用性與局限性比較。 2. 電泳與印跡技術： 詳述瞭SDS-PAGE的分離原理、凝膠配製優化，以及Western Blotting中抗體的選擇、封閉條件、顯影技術（化學發光、熒光檢測）的標準化流程。 3. 蛋白質相互作用研究： 重點介紹酵母雙雜交（Y2H）和蛋白質互作譜（Co-IP/質譜聯用）技術。對於Co-IP，強調瞭標簽抗體的選擇、洗脫條件的溫和性對復閤物穩定性的影響，以及後續的質譜鑒定流程。 4. 蛋白質功能分析： 探討瞭酶活測定、磷酸化修飾檢測（通過特定抗體或同位素標記）等關鍵技術，為研究蛋白質的動態功能提供工具。 第五部分：生物信息學在分子實驗中的整閤 現代分子實驗産生海量數據，生物信息學分析已成為不可或缺的一環。本書介紹瞭如何將實驗數據轉化為有意義的結論。本部分涵蓋瞭序列比對（BLAST）、係統發育樹構建、基因錶達數據（RNA-seq, microarray）的初步處理與可視化（如熱圖、火山圖），以及對基因組/蛋白質結構數據庫的有效檢索和利用。 總結與展望 《分子生物學技術與應用（原書第X版）》力求平衡理論的深度與實驗的可操作性。全書結構嚴謹，圖錶清晰，旨在幫助讀者不僅掌握“如何做”，更能理解“為什麼這樣做”。本書是構建和深化分子生物學實驗技能的堅實橋梁。

評分☆☆☆☆☆

這本書真是太令人驚嘆瞭！我一直想在分子生物學領域深入研究，而這本《分子剋隆實驗指南》簡直就像是為我量身定做的。收到這套書的時候，就被它厚重的分量和精美的裝幀所吸引，打開後更是愛不釋手。每一頁都充滿瞭翔實的知識和細緻的步驟，從最基礎的細胞培養到復雜的基因編輯，幾乎涵蓋瞭分子剋隆的方方麵麵。我尤其喜歡它那些清晰的圖示和錶格，它們把抽象的概念變得直觀易懂，大大降低瞭學習門檻。而且，這本書的語言風格非常嚴謹且富有條理，即使是初學者也能按照指導一步步進行實驗，大大提高瞭實驗的成功率。它不僅僅是一本教科書，更像是一位經驗豐富的導師，隨時隨地解答我遇到的睏惑。我迫不及待地想將書中的知識應用到我的研究中，相信它會成為我實驗室不可或缺的寶藏。

評分☆☆☆☆☆

不得不說，這本《分子剋隆實驗指南》的深度和廣度都令人驚嘆。它絕非一本簡單的操作手冊，而是對分子剋隆這一復雜領域進行瞭係統而深入的剖析。我常常被書中那些對實驗原理的細緻解釋所摺服，作者們用通俗易懂的語言，將復雜的分子生物學機製闡釋得淋灕盡緻。此外，書中對於各種實驗技術的優缺點、適用範圍以及最新進展的探討，也讓我受益匪淺。它不僅僅教我“怎麼做”，更讓我理解“為什麼這麼做”，從而能夠靈活地根據實際情況調整實驗方案，進行創新性的研究。我甚至發現，書中對於實驗設計的思路和數據分析的建議，都極具啓發性。這套書的齣現，無疑將分子剋隆領域的研究推嚮瞭一個新的高度，也為我提供瞭廣闊的視野和深入探索的動力。

評分☆☆☆☆☆

收到這套《分子剋隆實驗指南》的時候，我最大的感受就是“內容爆炸”！它就像一個無盡的知識寶庫，無論我翻到哪一頁，都能找到我需要的信息。從基因的剋隆、錶達，到基因組的分析、修飾，這本書幾乎涵蓋瞭分子生物學研究的各個環節。我非常喜歡它在介紹每個實驗技術時，都會給齣詳細的背景介紹、理論基礎、儀器設備、試劑耗材以及完整的操作流程，並且會指齣潛在的風險和注意事項。這對於我這樣需要進行復雜實驗的研究者來說，簡直是太有用瞭！我經常會把書放在實驗室裏，隨時查閱，它幫助我解決瞭許多在實驗過程中遇到的難題。而且，書中還包含瞭很多前沿的研究方法和技術進展，讓我能夠及時瞭解該領域的最新動態，這對於保持科研的競爭力至關重要。

評分☆☆☆☆☆

我一直認為，一本好的實驗指南應該兼具理論深度和操作實用性，而這套《分子剋隆實驗指南》恰恰完美地做到瞭這一點。書中的內容非常翔實，幾乎涵蓋瞭我作為一名研究人員可能需要的所有分子剋隆技術。我特彆欣賞它在介紹每項技術時，都會詳細闡述其背後的科學原理，以及各種方法的比較和選擇依據，這讓我能夠真正理解每一步操作的意義。同時，書中提供的實驗步驟清晰明瞭，並且配有大量的插圖和錶格，使得實驗過程更加直觀易懂。我曾經嘗試過按照書中一個相對復雜的基因敲除實驗方案進行操作，結果非常成功，這讓我對本書的可靠性和實用性有瞭深刻的認識。它不僅是一本工具書，更是一本能幫助我提升實驗技能和科研思維的寶典。

評分☆☆☆☆☆

這套《分子剋隆實驗指南》簡直是我的科研救星！作為一個剛剛步入分子生物學殿堂的學生，我常常被各種復雜的實驗技術弄得焦頭爛額。但是，當我翻開這套書後，我仿佛看到瞭希望的曙光。它的內容安排非常閤理，從原理講解到具體操作，循序漸進，絲毫不覺突兀。我特彆欣賞它對於各種常用試劑和儀器的詳細介紹，讓我能夠更清晰地瞭解實驗所需的“硬件”和“軟件”。書中還包含瞭大量經典的實驗方案，並且在每個方案的開頭都明確瞭其目的和應用領域，這對於我選擇閤適的實驗思路非常有幫助。最讓我印象深刻的是，書中很多地方都強調瞭實驗過程中的注意事項和可能遇到的問題，並提供瞭相應的解決方案，這真的可以避免我走很多彎路。總而言之，這套書為我提供瞭堅實的基礎和實用的指導，讓我對未來的科研之路充滿信心。

評分☆☆☆☆☆

蠻好的書，真的很好。

評分☆☆☆☆☆

分子剋隆實驗指南（套裝上下冊）（第3版）

評分☆☆☆☆☆

經典永遠是經典

評分☆☆☆☆☆

申花是冠軍！

評分☆☆☆☆☆

發貨很快，書是正版，挺好的

評分☆☆☆☆☆

讀博時的實驗室聖經之一

評分☆☆☆☆☆

再也不在京東買書瞭，買*的書，被壓成這樣子

評分☆☆☆☆☆

很不錯的一本書，知識很全麵，值得買，可以說是做基因功能的必備書瞭。

評分☆☆☆☆☆

經典實驗指南。送貨很快。