蛋白质纯化指南（原书第2版） [Guide to Protein Purification] pdf epub mobi txt 电子书 下载 2025

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R.R.伯吉斯，陈薇 等 著，陈薇 等 译

图书标签:

• 蛋白质纯化
• 生物化学
• 分子生物学
• 蛋白质组学
• 实验技术
• 生物技术
• 实验室指南
• 蛋白质分析
• 纯化方法
• 生命科学

出版社： 科学出版社

ISBN：9787030380951

版次：1

商品编码：11304575

包装：精装

丛书名： 生命科学实验指南系列

外文名称：Guide to Protein Purification

开本：16开

出版时间：2013-08-01

用纸：胶版纸

页数：660

正文语种：中文

产品特色

编辑推荐

适读人群 ：本书既有对实验方案的详细描述，又有对各种实验方案的原理解释和分析探讨，具有操作规范、要点突出、分析透彻、可行性强的特点，是一本非常实用的蛋白质纯化技术工具书。本书既可供从事蛋白质科学研究的科技工作者和研究生作为实验操作指南，也可供生命科学其他领域的研究者作为参考用书。
　　《蛋白质纯化指南》的第一版在二十年前出版，一直被广泛用来指导学生和研究人员纯化、鉴定、处理蛋白质和酶。这一新版本修改和更新了内容，但仍然延续了本书的传统，呈现清晰、易于遵循的方式，使专家和新手科学家都可以成功地掌握实验室的前沿技术和经典方法。

内容简介

　　蛋白质生物化学仍是现代生物学研究的重要部分。随着基因组测序的深入进行，多数物种的基因组序列已知，有益于基因克隆、蛋白质合成及蛋白质性质、结构和功能的研究。同时重组蛋白质异源表达技术的迅速发展，使人们更容易合成所需要的蛋白质。但是蛋白质合成以后还需纯化和研究其特性，特别是蛋白质编码基因未知的情况下，这一点尤为重要。

作者简介

　　Richard R. Burgess，美国威斯康星州，威斯康星大学麦迪逊分校，McArdle癌症研究实验室；Murray P. Deutscher，美国佛罗里达州，迈阿密大学医学院，生物化学和分子生物学系。

目录

前言
撰稿人
第1章 序言
第1章 为什么要纯化酶？
第1部 分制定纯化流程
第2章 蛋白质纯化的策略与考虑因素
1�弊茉騖n
2�钡鞍字世丛碶n
3�敝票柑崛∥颸n
4�贝笈�量纯化步骤
5�贝炕�的精纯过程
6�苯崧踈n
参考文献
第3章 生物信息学在蛋白质纯化设计中的应用
1�卑被�酸序列中的重要信息
2�蔽薹ù有蛄兄性ぶ�的信息
3�苯崧踈n
参考文献
第4章 准备纯化工作简表
1�币�言
2�苯抛⒌闹匾�性
3�� SDS�睵AGE对分析主要蛋白质分离组分的价值
4�币恍┏＜�的错误和问题
第2部分 操作蛋白质和酶的常规方法
第5章 建立一个实验室
1�迸涮撞牧蟎n
2�奔觳夂头治龅谋匾�条件
3�钡鞍字史旨斗掷氲谋匾�条件
第6章 缓冲液：原理和实践
1�币�言
2�崩砺踈n
3�被撼逡旱难≡馶n
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5�被臃⑿曰撼逡篭n
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参考文献
第7章 酶活性的测定
1�币�言
2�贝呋�活性的原理
3�泵富钚缘募觳鈂n
4�狈从Ψ治龌旌衔锏淖槌蒤n
5�碧致踈n
参考文献
第8章 蛋白质定量
1�币�言
2�笔约僚渲频囊话阈灾傅糪n
3�弊贤馕�收光谱分析
4�被�于染料的蛋白质分析方法
5�笨悸硭沽晾兜鞍字逝ǘ确治龇�

精彩书摘

　　第1章 序言
　　怀着极大的敬意，我们在第二版将本书第一版完整的第1章，由已故的Arthur Kornberg所著的“为什么要纯化酶”重印。Arthur是20世纪生物化学领域的一位巨匠，他的强项就是酶学——在阅读本章节时，读者们将充分领会到个中缘由。Arthur的言语中洋溢着他对于鉴定某种酶的活性，并且将该酶纯化至均质（homogeneity）从而可以直接研究其特性的热情。不过他显然也清楚地意识到了酶的“社会性”（social face），也就是酶类与其他细胞组分的相互作用——由于我们现在进而开始研究细胞组织结构的重要性，酶类的这种“社会性”使其获得了更多的关注。
　　自这个章节撰写近20年来，本领域取得了很多进展，特别是当其基因已知时，相应蛋白质的纯化变得容易很多。然而，当你在研究某种酶的催化特性时，或在解析某种蛋白质的结构时，或是鉴定可能的调节因子时，“纯度，纯度，还是纯度”的告诫依然是极有意义的。当试图了解一个新近发现的细胞反应中的酶类，或是参与某个细胞过程的蛋白质时，蛋白质的纯化依然是头等重要的事情。因此，不管是第一次读，还是重读回味，Arthur所著的精彩明晰的章节都会让你有所收获。
　　Murray P�� Deutscher
　　(徐俊杰译)蛋白质纯化指南(原书第二版)第1章为什么要纯化酶？
　　第1章　为什么要纯化酶？
　　Arthur Kornberg已故
　　“不要把你纯粹的思想浪费在不纯的酶上！”，这是酶学与化学实践的核心人物Efraim Racker的告诫。这句话只是想告诉我们，在将感兴趣的酶从由其他的酶和物质组成的粗制细胞提取物中分离纯化出来之前，试图研究该酶是如何催化一种物质转化为另一种物质通常都是在浪费时间。从破裂的肝脏、酵母或细菌细胞中释放出来的上千种不同酶类的混合物可能含有一些指导原料进行其他重排反应的酶类和特定酶功能的产物。只有当我们将酶纯化到检测不到其他酶活性的程度，我们才能确信，一种单一类型的酶分子仅仅是催化物质A转化成物质B。只有这时，我们才能了解这种酶是如何进行反应的。
　　纯化酶的努力所获得的回报在Otto Warburg于19世纪30年代发表的一系列振奋人心的文章中得到了阐明。凭借着出自他在Berlin�睤ahlem的实验室的诸多酶纯化的方法和准则，呼吸过程和糖酵解过程中的关键反应及维生素功能得以阐明。Warburg的贡献在于他强化了经典的酶学方法，该方法始于20世纪之交Eduard Büchner对无细胞条件下蔗糖可转化为乙醇的偶然发现。科学家首先通过在无细胞系统中观察到的现象，追踪到细胞功能（如酵母中的乙醇发酵、肌肉中的糖酵解、萤火虫发光或DNA的复制）的分子基础。然后再通过将细胞提取物分成几部分并将其纯化至单一成分，以分离相应的酶（或多个酶）。接下来，科学家们希望可以充分了解酶的结构，从而可以解释该酶如何行使催化功能，如何响应调控信号，以及如何与细胞中的其他酶类和结构联系。
　　借助一个近几十年特别流行的被称为“新古典主义”（neoclassical）的反向过程，科学家首先得到一种蛋白质的结构，然后探索其功能。这种蛋白质最好是分子小且稳定的，可以通过分子克隆扩增，或是可购得商业化产品。通过对该蛋白质及其同源蛋白的深入研究，科学家们期望能得到其如何行使功能的线索。随着“新古典主义”方法越来越受欢迎，人们对传统的研究路线（即从功能入手，以分离相应的结构）的兴趣也在相应下降。
　　对于一个能够在试管中重建一个细胞可做的任何事情的热诚的生物化学家而言，对酶纯化的发自内心的热忱就是他的信条。实际上，生物化学家利用操作介质（pH、离子强度等）的优势，可通过提高反应物浓度，或是使产物与反应体系分离等方法，更容易进行这些研究。生物化学家的另一个信条是，所有在细胞中进行的反应都是由酶来催化的。化学家有时候会觉得这个说法很难接受。
　　最近，一位审慎而有名的物理化学家告诉我，我的工作中最吸引他的是DNA的复制居然是由酶来催化的！这让我想起1953年到圣路易斯时，我在华盛顿大学化学系做的一个报告。当我讲述合成和降解乳清酸的酶时，发现听众们正在迅速地溜走。也许他们原本打算听到一些关于乳清酸的有机合成的内容。我使出最后一招，希望能够挽回他们的注意，于是我大声地说，细胞中的每一个化学事件都依赖于一个酶的作用。这时，Joseph Kennedy（现在已故）这位才华横溢的年轻主席突然警醒，说：“你的意思是说就像二氧化碳的水合作用（生成碳酸）那么简单的事情也需要酶？”上帝总算把他交给我了。“是的，Joe，细胞中的确有这个酶，称为碳酸酐酶。它可以令这个反应的速率提高100万倍以上。”
　　酶是令人敬畏的机器，它们具有合适的复杂度。你可能会因努力应付单细胞操作的事情而心神不宁，更不用说那些多细胞生物了；或者，你可能对探测小分子的精细化学而感到无力。熟悉某种酶在主要合成路径中的表现是恰当的做法。为了充分了解酶，必须首先将酶纯化至接近均一。为了将含量为细胞群落中的成千上万种蛋白质的1%的1/10或1/100的某一蛋白质种类分离出来，需要好好策划，并且需要参照快速可靠地检测其催化活性的检测方法。
　　没有酶能被纯化至绝对的均一。即便在其他蛋白质组分低于纯化蛋白质的1%，并且用最好的检测方法都检测不到时，在反应混合物中依然可能存在几百万种外源分子。通常，这些污染物不会有影响，除非它们属于占优势的一类，并且在研究的组分中具有极高的活性。
　　只有在了解了纯酶的性质之后，研究其在粗酶状态下的行为才是有意义的。“不要把你纯粹的思想浪费在不纯的酶上”就是明智的信条。我从来不会吝啬于将时间花费在酶的纯化上，不管它是导致了一个反应路径的阐明，新酶的发现，独特的分析剂的获得，还是仅仅获得了纯化过程的实验技能。所以，应强调的是纯度，纯度，还是纯度。
　　纯化酶的整个过程都是有所回报的，从一开始在破碎细胞的大群的蛋白质中将其释放出来，直到最后将其出色的分离。当将酶从其舒适的细胞巢中取出来时，重要的是需要注意许多不利的因素：高度稀释于不利的溶剂中，接触玻璃表面及严苛的温度，暴露于金属、氧及数不胜数的其他危险中。酶纯化的失败常常归因于其脆弱性及易于变性的特点，但是也应该归咎于科学家的“变性”。正如家长为孩子的行踪和安全担心一样，你不能在不知道这一天的操作步骤纯化到了多少酶，有多少污染的蛋白质依然存在的情况下，就在晚上离开实验室。
　　为了达到纯化蛋白质的目的，基本的准则是，将酶活性与总蛋白的比率提高至极限。必须严格地记录每一个操作步骤和每一个阶段中蛋白质的活性单位及数量。在这种情况下，酶纯化的实验记录应该经得起审计员和银行监察员的仔细查阅。这并不是说你应该将这个实验作为生意或者是银行来经营，因为它常常看起来像是需要攀登的未知山峰：逻辑喜欢那些成功地提供更高地基的野营地的人。蛋白质的“死亡率”和令人困惑的污染物就如同遭遇不能预料的暴风雨及困境的历险一样；一路上悦人的风景满足了关于在顶峰将会看到什么的期待。纯化酶的最终奖赏相当于在顶峰居高临下地看到的一览无余的美丽风景。此时超越了宏大的远景和最先到达的激动，已经没有必要下山，而是会去勘察更有吸引力的山峦，每一座高山都许诺会有更宏伟的景色呈现。
　　利用纯化的酶，我们能了解其催化活性和其对调控分子（可提升或降低酶活性）的响应。除了催化和调控方面，酶还有一张“社交”的面孔，可以控制与其他酶类、核酸和膜表面的关键性相互作用。为了获得酶对细胞体系的贡献的观点，我们也必须确定诱导或抑制负责产生酶的基因的因子。追踪代谢或生物合成的酶揭示了细菌根据自己变化的需求而调控酶的产生的不可思议的复杂性。
　　目前公众的兴趣集中在认识果蝇及线虫的生长和发育，以及它们的细胞和组织。许多实验室致力于研究癌症的异常，并期望它们的研究将为正常的模式提供思路。同时，巨大的努力都投入了对AIDS研究，关注于病毒本身，以及其对免疫系统的破坏作用。在上述研究中，对于细胞基因组、病毒功能的操作尝试几乎总是在完整的细胞和生物体中监测的。很少有人尝试在无细胞体系中检测整个过程中的某一个阶段。当今生物学研究依赖完整细胞和生物体，以推测它们的化学过程，这是现代版的生机论（vitalism）。生机论最早由巴斯德提出，并且包含在这之前和之后的许多代生物学家的看法中。
　　令我感到疑惑的是，人们通常总是忽略了用绝对简单且经过验证的酶学方法解决基础的代谢问题。在能够解释更复杂的现象之前，必须了解分离的物质及其相互作用，这条箴言已经植根于生物化学的历史中，并且现在被完全地常识化。Robert Koch在一个世纪之前，在鉴定某传染病的致病物时教导我们，必须最先从所有微生物中分离出这种致病微生物。有机化学家甚至更早就知道我们必须通过纯化和结晶以证明某种物质的特性。历史上更近一些时候，维生素发现者们发现如果不把每一种维生素都分离为纯化形式，试图发现其代谢和营养作用都是空谈。因此，只有利用纯化的酶，我们才能清楚地鉴定负责一个独立的代谢活动的分子机器的每一个组件。由于对此深信不疑，我的一个研究生将其表达在了他的个性化车牌上（图1��1）。
　　……

前言/序言

《细胞信号通路调控与疾病机制研究：新方法与前沿进展》 导言 在生命科学的宏大叙事中，细胞信号通路无疑是理解生命活动奥秘的核心。从最基础的细胞增殖、分化到复杂的免疫应答、神经可塑性，乃至癌症、神经退行性疾病等重大病理过程，无不依赖于精确、高效的信号转导网络。近年来，随着高通量测序技术、单细胞分析、先进的成像技术以及生物信息学工具的飞速发展，我们对这些复杂网络的认识达到了前所未有的深度。然而，如何将这些海量数据转化为可验证的生物学机制，并最终应用于疾病的诊断与治疗，依然是当前研究亟待解决的关键挑战。《细胞信号通路调控与疾病机制研究：新方法与前沿进展》正是在这一背景下应运而生的一本综合性学术专著，它旨在系统梳理当前信号通路研究领域最尖端的技术范式、最新的发现以及对人类健康影响深远的机制研究成果。 第一部分：信号通路解析的新技术范式 本部分专注于介绍那些正在颠覆传统信号转导研究模式的前沿技术平台，这些技术极大地提高了研究的维度和分辨率。 第一章：高维单细胞信号转导组学 单细胞技术已经成为解析异质性细胞群信号状态的金标准。本章将深入探讨如何将蛋白质组学和磷酸化蛋白质组学与单细胞RNA测序（scRNA-seq）相结合。重点关注单细胞空间转录组学（Spatial Transcriptomics）在解析信号轴在组织微环境中如何定位和传递信息方面的应用，以及如何利用单细胞拉曼光谱技术来实时监测细胞内分子结构和功能状态的变化。讨论将聚焦于如何设计实验来捕获信号通路激活的瞬态事件，并区分“驱动性”突变与“乘客性”突变对信号网络稳定性的贡献。 第二章：活体（In Vivo）与超快（Ultrafast）信号成像技术 对信号分子动态过程的实时观测是理解其调控机制的关键。本章详细介绍了基于光控蛋白（Optogenetics）的工具箱的最新进展，特别是针对多蛋白复合体组装与解离的精确诱导系统。同时，重点阐述了双光子荧光显微镜和超分辨成像技术（如STED、PALM/STORM）在追踪亚细胞器（如内质网、线粒体、核孔复合体）边界处信号分子聚集与激活的时间分辨率和空间分辨率限制。还将探讨Förster共振能量转移（FRET）技术在探针设计上如何实现对特定激酶-底物相互作用的定量监测。 第三章：系统生物学与计算模型构建 纯粹的实验数据往往难以揭示复杂的反馈回路和非线性动力学。本章系统介绍了动力学建模（Kinetic Modeling）在信号通路研究中的应用。内容包括布尔网络（Boolean Networks）、微分方程模型（Ordinary Differential Equations, ODEs）以及随机模型（Stochastic Models）如何用于预测信号饱和点、稳态转换以及药物干预的潜在阈值效应。特别强调了如何利用机器学习算法（如深度学习）来从庞大的磷酸化肽谱数据中识别新的上游调节因子和下游效应通路。 第二部分：关键信号通路的深度解析与病理关联 本部分聚焦于当前研究热点中，与重大疾病发生发展密切相关的核心信号网络，并强调机制研究的深度。 第四章：肿瘤免疫微环境中的信号调控枢纽 癌症的发生与免疫逃逸机制是当前研究的焦点。本章深入剖析了JAK-STAT信号通路在肿瘤细胞与免疫细胞（如Treg、MDSC）之间信息拦截与反馈调节中的关键作用。同时，重点讨论了NF-κB通路在介导肿瘤耐药性（Chemoresistance）和肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）极化中的多重角色。章节还将探讨新型检查点抑制剂（如LAG-3, TIGIT）如何通过重塑T细胞受体（TCR）信号下游的分子事件来实现免疫激活。 第五章：代谢重编程与细胞命运决定 代谢与信号转导之间存在着双向的深刻联系。本章详细阐述了mTORC1/2复合体如何整合营养（氨基酸、葡萄糖）信号与生长因子信号，精确调控细胞的合成代谢与自噬（Autophagy）。此外，对AMPK通路在能量应激下如何重置细胞内氧化还原状态，并影响组蛋白修饰（Epigenetic Modification）的机制进行了深入的探讨。对于代谢疾病（如糖尿病、脂肪肝）的研究，本章着重于解析信号通路失调导致的线粒体功能障碍。 第六章：神经退行性疾病中的信号稳态失衡 神经系统疾病的病理机制往往涉及细胞骨架重塑、突触可塑性障碍和神经炎症。本章重点分析了Wnt/β-catenin通路在神经干细胞自我更新和神经元分化中的调控网络。此外，深入研究了Tau蛋白和淀粉样蛋白前体蛋白（APP）的异常磷酸化如何通过激活或抑制特定的激酶/磷酸酶，破坏轴突运输和突触囊泡循环，从而导致阿尔茨海默病（AD）和帕金森病（PD）的发生。 第三部分：信号通路调控的精准干预策略 本部分探讨如何利用对信号通路的深入理解，设计出更具特异性和有效性的新型治疗策略。 第七章：PROTACs与靶向蛋白降解技术的信号通路重塑 传统的激酶抑制剂往往面临脱靶效应和耐药性问题。本章详细介绍了靶向蛋白降解技术（TPD），尤其是PROTACs（Proteolysis-Targeting Chimeras）的设计原理，如何通过招募E3泛素连接酶来选择性地清除特定信号通路中的关键“驱动者”蛋白。重点分析了PROTACs在克服激酶活性位点突变导致的耐药性方面的潜力，并讨论了构建针对稀有或结构复杂信号蛋白PROTACs的挑战。 第八章：先进的基因编辑工具在信号通路研究中的应用 虽然CRISPR-Cas9已是常规工具，但本章侧重于其在信号通路机制验证中的高级应用。包括利用CRISPRi/a（干扰/激活）系统对转录因子网络进行精细调控，以及Prime Editing和Base Editing技术在模拟特定疾病相关的点突变以构建更精确的疾病模型方面的优势。此外，章节还探讨了利用这些技术来鉴定新的信号通路负反馈调节因子。 结论与展望 总结部分将提炼本领域未来五到十年的发展方向，强调跨学科合作（如生物物理学与临床医学的融合）对于解决信号通路调控中的复杂问题的重要性，并展望更个性化、更少副作用的信号通路靶向治疗前景。本书为该领域的研究人员、高年级研究生以及生物制药领域的专业人士，提供了一个全面、深入且紧跟时代前沿的参考平台。

评分☆☆☆☆☆

这本书，我是在寻找特定蛋白分离技术的过程中偶然发现的，当时手里已经有不少零散的文献和操作手册，总觉得不成体系，而且很多细节上的疑问始终得不到解答。拿到《蛋白质纯化指南（原书第2版）》后，我做的第一件事就是快速翻阅目录，看它是否涵盖了我目前最关注的几个方面，比如亲和层析的原理和常见介质的选择，以及离子交换层析中pH和盐梯度的优化策略。起初只是抱着“看看有没有用的”心态，但随着阅读的深入，我渐渐发现这本书的价值远超我的预期。作者在阐述基础理论时，并没有仅仅停留在概念层面，而是通过大量的实例和图表，生动地解释了各种技术背后的分子机制。特别是关于多步纯化策略的设计部分，书中提供了非常系统化的思路，从蛋白的性质分析，到选择合适的分离技术组合，再到每一步的优化目标和潜在陷阱，都进行了详细的剖析。这对于我这种实验室初学者来说，简直是及时雨，让我不再像无头苍蝇一样乱撞，而是能够有条不紊地规划实验步骤，大大提高了我的实验效率和成功率。

评分☆☆☆☆☆

说实话，当初购买《蛋白质纯化指南（原书第2版）》更多的是一种“收藏”的心态，因为我对蛋白质纯化这个领域已经有了一定的了解，以为它不会带来太多新意。然而，事实证明我的想法过于片面了。这本书最让我惊喜的地方在于它对“高级”纯化技术的深入探讨，以及对如何将这些技术有机结合形成高效纯化方案的独到见解。例如，书中对多克隆抗体亲和层析、谷胱甘肽-S-转移酶（GST）标签蛋白纯化、以及金属离子螯合层析（IMAC）等技术的详细阐述，不仅包含了理论基础，还提供了大量的实验细节，例如如何选择合适的配体、如何优化洗脱条件以获得高纯度目标蛋白，以及如何应对潜在的非特异性结合问题。此外，书中还强调了在设计多步纯化策略时，不仅要考虑每一步的效率，还要考虑各步骤之间的兼容性，以及如何最大限度地减少蛋白损失。这种系统性的思维模式，对于我这种需要同时处理多种复杂蛋白样品的研发人员来说，非常有启发性。

评分☆☆☆☆☆

说实话，一开始我对《蛋白质纯化指南（原书第2版）》的期待并没有那么高，毕竟市面上关于蛋白纯化的书籍不少，很多都显得陈旧或者过于理论化，难以应用于实际操作。然而，这本书给我带来的惊喜是全方位的。它的语言风格非常务实，没有太多花哨的辞藻，而是直奔主题，深入浅出地讲解每一个纯化步骤。我尤其欣赏的是书中对各种仪器设备和试剂耗材的详细介绍，包括它们的性能特点、使用注意事项以及如何根据具体实验需求进行选择。例如，在介绍超滤/渗析时，书中不仅解释了原理，还给出了不同截留分子量（MWCO）的超滤膜如何影响蛋白浓缩效率和损失的对比分析，并提供了具体的操作建议，如何避免蛋白过度聚集和活性降低。这种细节上的关注，恰恰是许多教科书所忽略的，但对于我们在实际操作中却至关重要。我感觉这本书更像是一位经验丰富的导师，手把手地指导你完成每一个实验环节，让你少走弯路，少犯低级错误。

评分☆☆☆☆☆

在一次偶然的机会下，我通过同行推荐了解到了《蛋白质纯化指南（原书第2版）》，当时我正面临着一个棘手的项目，需要从复杂的细胞裂解液中分离一种低丰度、不稳定且容易聚集的蛋白。之前的尝试屡屡失败，各种文献上的方法都效果甚微。抱着最后一丝希望，我购买了这本书，并被其内容深深吸引。书中不仅仅是罗列了各种纯化方法，而是提供了一种解决问题的框架。它引导读者首先深入理解目标蛋白的物理化学性质，例如等电点、疏水性、分子量、稳定性以及是否存在糖基化或二硫键等修饰，然后基于这些信息，系统地评估和选择最适合的纯化策略。书中对每种分离技术的优缺点、适用范围以及关键参数的优化都进行了详尽的阐述，并且给出了大量关于如何处理非特异性吸附、蛋白变性、酶促降解等常见问题的实用技巧。我印象特别深刻的是关于“选择性沉淀”部分的讲解，书中列举了不同盐类（如硫酸铵）的溶解度曲线和对不同蛋白沉淀效果的比较，这让我能够更理性地选择沉淀条件，从而提高初始的蛋白回收率。

评分☆☆☆☆☆

自从开始接触生物化学研究，我就一直在寻找一本能够真正指导我进行蛋白质纯化的实操手册，《蛋白质纯化指南（原书第2版）》绝对是其中的佼佼者。它不像一些理论书籍那样枯燥乏味，也不像一些简略的实验手册那样信息不足。这本书的特点在于它的全面性和深度。从起始材料的处理，比如细胞的裂解和匀浆，到各种层析技术的原理、方法和优化，再到最后的蛋白鉴定和定量，几乎涵盖了蛋白质纯化的每一个环节。我特别喜欢书中关于“问题排除”章节的编排，它模拟了在实际操作中可能遇到的各种难题，并提供了清晰的诊断思路和解决方案。比如，当发现层析柱上蛋白峰分离不佳时，书中会详细分析可能的原因，包括流动相的pH、盐浓度、流速、填料的性质等，并给出逐一排查的建议。这种循序渐进的指导方式，让我能够独立地解决实验中遇到的各种复杂问题，而不再仅仅依赖于他人的经验。

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挺好的，平时使用过城中的工具书，很实用

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很不错的专业工具书，对工作有帮助

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挺好的，就是没给光盘。

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经典专业书，指导性较强

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还没收到就提前说我收货了

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经典书籍，不能错过。

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